Instituto Politécnico Nacional
Escuela Nacional de Ciencias Biológicas
Práctica α-amilasa pancreática y γ glutamil
transpeptidasa
Profesor: Miguel Ángel Antonio Ibáñez Hernández
Alumno: Ruíz Valdez Saúl
AQM1
Fecha de entrega: 03/06/2021.
Introducción
La enzima γ-glutamil transferasa (GGT), interviene en la transferencia del residuo γglutamil de del glutatión (γ-glutamil-cysteinil-glicina) a aminoácidos, para la regulación de
concentraciones de glutatión tisular y en transporte de aminoácidos por membranas
celulares.
Su actividad se encuentra sobre todo en riñón, cerebro, próstata, páncreas e hígado. En
el hígado, la GGT se localiza en los canalículos biliares. Por lo que esta enzima GGT se
ve aumentada en casi todos los trastornos hepatobiliares. Se observa las concentraciones
mas altas en construcción de la vía biliar.
La amilasa cataliza la degradación del almidón y glucógeno. Hidroliza los enlaces α-1,4.
Las células acinares del páncreas y glándulas salivales son fuente de la amilasa. hay
concentraciones menores en musculo esquelético, intestino delgado y trompas de Falopio.
por su tamaño pequeño se filtra regularmente en orina.
La presencia de amilasa en suero y orina tiene relevancia en el diagnostico de pancreatitis
aguda. Otros trastornos distintos como insuficiencia renal, por lo que no es específica a
páncreas.
Objetivos
El alumno cuantificará la α -amilasa presente en una muestra problema.
El alumno determinará la actividad de la γGT en una muestra problema por un método de
monitoreo continuo.
Fundamento
La α -amilasa se determina utilizando como sustrato un oligo sacarido conformado por
siete monómeros de glucosa unidos por enlaces α-1,4, con un grupo p-nitrofenil unido en
el elnlace α acetal. Este p-nitrofenil-maltoheptosido esta bloqueado con bennzilidina, de
modo que la α -amilasa no hidrolizara el ultimo enlace entre el p-nitrofenil y el extremo
reductor, dejando libre el p-nitrofenil con dos a cinco glucosas unidas.
ELp-nitrofenil con una enzima glucosamina o α-glucosidasa, catalizara la hidrolisis del
enlace entre el extremo reductor de la glucosa unido al p-nitrofenil, lo que dará producción
de color y puede determinarse la absorbancia a 400-420nm.
En el método colorimétrico de la γ glutamil transferasa, se usa un sustrato sintético como
el L-γ-glutamil-3-carboxi-4-nitroanilida, el cual en presencia de glicilglicina y con la γ-GT
de la muestra, se cataliza la transferencia del γ-glutamil a la glicilglicina, dejando como
productos la γ-glutamil-glicilglicina y la p-nitroanilida que da la formación de color, del cual
puede leerse la absorbancia a 405nm y esta será proporcional a la enzima γ-GT en la
muestra.
Resultados
Tabla 1. Resultados de absorbancia de GGT.
37ºC
M1
M2
ΔA
ΔA
1’
0.31
0.180
2’
0.310
0.178
3’
0.312
0.175
ACTIVIDAD ΔA X F
359.75
205.73
F=1158
Tabla 2. Resultados de absorbancia de α-amilasa.
37ºC
ΔA
ΔA
ΔA
ΔA
ΔA
C2
C3
M1
M2
(82-110 UI/L)
(238-320
UI/L)
ORINA/24
HRS
1’
0.019
0.067
0.028
0.066
0.088
2’
0.022
0.065
0.030
0.070
0.099
3’
0.025
0.066
0.026
0.073
0.099
FACTOR=
4712
103.664
310.9
131.9
328.3
449.2
M2
Discusión
En α-amilasa, los controles estas dentro de los rangos que indica el fabricante, por lo que
se da validez a la corrida analítica.
Los resultados de GGT aumentados se pueden deber a alteraciones biliares y hepáticas,
se le considera un marcador de colestasis, que es más sensible que fosfatasa alcalina, de
forma temprana su valor se puede elevar hasta 30 veces. Aumenta en pacientes con un
consumo habitual de alcohol o que esta llevando un tratamiento con antiepilépticos
(fenitoína o fenobarbital), también se ha visto elevada en otras enfermedades como
diabetes mellitus, en infarto al miocardio, síndrome metabólico y en casos de pancreatitis.
En algunos casos la determinación de GGT se utiliza como un indicador de abstinencia de
alcohol en pacientes, por lo que en ese caso, podría interpretarse que estos pacientes
han seguido con su consumo de alcohol.
Los resultados de α-amilasa se observa que en la muestra 1 el valor de esta enzima se
halla dentro de los valores de referencia, así que no se asocia a una patología relacionada
al páncreas, en la muestra 2 se observa que el valor de α-amilasa sérica esta elevada por
encima de los valores de referencia, las principales causas de la hiperamilasemia son
asociadas a alteraciones pancreáticas como pancreatitis aguda. En este caso el valor se
encuentra ligeramente elevado, lo que podría indicar que ya ha pasado un tiempo desde
el inicio de síntomas, ya que dentro de las primeras 6-8 horas del inicio de síntomas
relacionados a la pancreatitis aguda, esta enzima se eleva a mas de tres veces el límite
superior de los valores de referencia y esta decrece hasta los 3 a 5 días. O puede ser que
la patología sea diferente, ya que valores de la actividad de α-amilasa en sangre que sean
menores a 500UI/L pueden deberse a parotiditis, alteraciones gastrointestinales como una
ulcera péptica, gastritis, apendicitis aguda, peritonitis, también en personas que abusen
de opiáceos, en caso de intoxicación aguda de alcohol y enfermedades renales.
Se ha observado que la isoenzima S se puede asociar a inmunoglobulonas sobre todo A
o G formando complejos de alto peso molecular, lo que se denomina macroamilasemia,
elevando su actividad en suero por encima de los valores de referencia, pero sin que haya
una patología asociada, y debido a su alto peso molecular, no se puede filtrar en el
glomérulo por lo que no hay elevación de la α-amilasa en orina, como es el caso de la
muestra 2 donde hay una ligera elevación de la actividad en suero, sin incremento en
orina. Aunque estos casos asociados a macroamilasemia representan solo un 5% de las
causas de elevación de la actividad de α-amilasa sérica.
Conclusiones
La amilasa y GGT aunque son especificas y se relaciona al páncreas, deben
acompañarse de otras pruebas para dar un diagnóstico certero.
La enzima GGT puede elevarse en enfermedades hepáticas, pancreáticas o por consumo
de alcohol.
Bibliografia.
Bishop. M.L. Química clínica. Principios, procedimientos y correlaciones. 5ª Edición.
McGraw Hill. México. pp. 255-257
¿Cómo evaluar la elevación de las enzimas hepáticas en personas aparentemente sanas? Su
importancia
para
el
médico
general.
Recuperado
de:
http://www.scielo.org.pe/pdf/rgp/v33n3/a11v33n3.pdf
Pregunta extra
Pancreatitis
aguda.
01082010000900010
https://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1130-