Final meeting , Ljubljana (SI) 2013-02-18 Developing quarantine pest detection methods for use by national plant protection organizations (NPPO) and inspection services.(Q-Detect) Chinese Academy of Inspection and Quarantine CAIQ as a partner in Q-Detect Consortium Work package involved for CAIQ CAIQ in Q-Detect Consortium Beneficiary for CAIQ Roles of CAIQ in Q-Detect What we have done for Q-Detect 1、Provision of samples The CLCuV material provided for PRI The young leaves of Hibiscus rosa-sinensis about 1.3~1.5g per tube with the obvious symptoms of CuCLV were selected and freeze-dried by lyophilizer. A Modified CTAB Method to Extract Total DNA from plant leaves was used in the experiment. PCR of the CLCuV According to the EST segment of CLCuV searching from the NCBI, the primers were designed ,we can obtain about 1000bp amplicons,shown in the picture. M 1 2 3 4 1kbp Figure. the amplified products in lane 1、2、3、4 Forward primer sequence:ATTATGTCGAAGCGAGCTGC Reverse primer sequence: AGCTCTGGGAGTGCACAAGT 2、Validation and testing of confirmatory methods Preliminary Research on the Development of LAMP for the Detection of CLCuV Three sets of the primers were designed and the first set of primer has two Loop B primers. CLCuV1 FIP CLCuV1 BIP CLCuV1 F3 CLCuV1 B3 CLCuV1 Loop B1 CLCuV1 Loop B2 AGGTTTGTCAACAGGTCGTCGGGAATCACACGAATTCGGT ACGAACCCAGTACAGCAACTTAACGGTTGCATGCCATT TGGATGGATGAAAATATAAAGACC ACTCGCATATTGACCACC AGTCATAGGGACCGTTATCAGG GGGACCGTTATCAGGTGTTGAGG CLCuV2 FIP CLCuV2 BIP CLCuV2 F3 CLCuV2 B3 CCACGAGTAACATCAGAAATACACAGCCCATGTAAGGTACAGT GTCGGTTTGACCCATCGTATTGTCATCCATCCATATCTTACCTAA GCTCCAAAGGGTTGTGAAG ATTCGTGTGATTCCTGGT CLCuV3 FIP CLCuV3 BIP CLCuV3 F3 CLCuV3 B3 CCACGAGTAACATCAGAAATACACAGGTACAGTCTTTTGAGTCCA GACCCATCGTATTGGTAAACGTTTGGTCTTTATATTTTCATCCATCC CAAAGGGTTGTGAAGGCC ACCGAATTCGTGTGATTCC Turbidity To screen the most appropriate primers 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 -0.1 1 NC PC P1 P2 P3 LB1 LB2 6 11 16 21 26 31 36 41 46 51 56 61 66 71 76 81 86 91 Time(min) M LB2 NC PC P1 P2 P3 LB1 To Select the suitable temperature with the appropriate primer Temperature of LAMP reaction 0.8 0.7 59 60 61 62 63 64 65 66 Turbidimeter 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 -0.1 1 4 7 10 13 16 19 22 25 28 31 34 37 40 43 46 49 52 55 58 61 64 67 70 73 76 Time(min) 62-64℃ is most suitable reaction temperature range. Finally,we chose 63 ℃ as the reaction temperature。 M 66 59 60 61 62 63 64 65 3、Training Course, Tibet Building, Beijing, 16-18,1, 2013 The training course for the detection and identification of species on-site Trainees in the Course 序号 姓 名 性别 1 楼军文 女 2 万本屹 男 3 张 立 男 4 薛达元 男 5 罗述金 女 6 吕学农 男 7 王欣月 女 8 夏云成 男 9 渠开山 男 10 郑春生 男 11 廖 男 芳 12 刘曼玉 女 13 褚 栋 男 14 王建昌 男 “物种资源现场查验鉴定技术应用培训班”通讯录 序号 1 2 3 4 5 6 姓 名 楼军文 万本屹 张 立 薛达元 罗述金 吕学农 性别 女 男 男 男 女 男 单位 国家质检总局动植司 国家质检总局动植司 中国检科院 中央民族大学 北京大学 新疆检验检疫局 职务/职称 处长 副处长 副院长 教授 教授 7 王欣月 女 北京检验检疫局动植处 科长 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 夏云成 渠开山 郑春生 廖 芳 刘曼玉 褚 栋 王建昌 蒋 丹 刘淑艳 王 耀 刘金华 徐 颖 王 珏 贾 琴 薛华杰 林颖峥 伏建国 许萍萍 刘晓宇 武 扬 男 男 男 男 女 男 男 女 女 男 男 女 女 女 男 女 男 女 女 男 首都机场检验检疫局旅检处 首都机场检验检疫局旅检处 北京检验检疫局技术中心 天津局 天津局 河北局植检处 河北出入境检验检疫局技术中心 辽宁出入境检验检疫局技术中心 辽宁出入境检验检疫局技术中心 辽宁出入境检验检疫局 吉林出入境检验检疫局 上海铁路检验检疫局 外高检验检疫局 机场检验检疫局 上海局动植物与食品检验检疫中心 上海局动植物与食品检验检疫中心 江苏局 南京出入境检验检疫局 南京出入境检验检疫局 浙江局动植处 副处长 科长 农艺师 高级农艺师 科员 副科长 28 王栋梁 男 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 张明哲 张吉红 王 旭 宫文妮 李 振 周卫川 许新军 杨 斌 李 林 尹伟力 盛存波 韩 英 宋 南 李 萌 柏建山 赵菊鹏 王新国 男 女 男 女 男 男 男 男 男 男 男 男 男 男 男 女 男 46 谭章龙 47 王照金 48 蒋 49 联系方式 62752307 18999916990 58619025 邮箱 xuedayuan@hotmail.com Luo.Shujin@pku.edu.cn lvxuenong@126.com Wangxy@bjciq.gov.cn 副科长 副科长 科长 58648124 58648029 58648822 13752253690 13821082527 18632166836 18632166991 18604099925 13700080757 15998520339 18686427214 13482525736 13671743218 15921364759 13916174869 18817449520 13776649379 13512510382 13951876372 15868189568 Xiaych@bjciq.gov.cn Quksh@bjciq.gov.cn Zhengchsh@bjciq.gov.cn liaof@tjciq.gov.cn liumy@tjciq.gov.cn chudong321321@163.com jianchangwang1225@126.com jiangdan66@163.com liushuyan05@163.com 15998520339@126.com liujinhua02@163.com Idxuying@gmail.com andy-wjue@163.com jiaq@shciq.gov.cn xuehj@shciq.gov.cn 1072166009@qq.com fujg@jsciq.gov.cn xupp@jsciq.gov.cn liuxy@jsciq.gov.cn wuy@ziq.gov.cn 浙江局杭州机场办 主任科员 13625811589 wangdl@ziq.gov.cn 浙江局技术中心 宁波检验检疫局 秦皇岛检验检疫局 无锡出入境检验检疫局 芜湖出入境检验检疫局 福建出入境检验检疫局技术中心 青岛局 青岛机场检疫局 烟台局 烟台局 龙口检验检疫局 河南检验检疫局植检处 河南检验检疫局技术中心 洛阳检验检疫局 广州机场出入境检验检疫局 广东检验检疫技术中心植检室 黄埔出入境检验检疫局 高级工程师 高级兽医师 副主任科员 科员 科员 研究员 副科长 副主任科员 副科长 博士/农艺师 博士/农艺师 工程师 高级农艺师 高级农艺师 zhangmz@ziq.gov.cn zhjhw@yahoo.com.cn wangxuciq@163.com Gongwn@jsciq.gov.cn lizhenowen@sina.com wczhou@163.com ponymani@163.com yangbinqingdao@sina.com lin_li@189.cn vi123vi@163.com shengcunbo@163.com Ying965335@163.com songnan1980@163.com limengjeff@126.com bjslinyi@sina.com zhaojp@iqtc.cn wangxinguo99@163.com 男 汕尾出入境检验检疫局 兽医师 13656655958 13056772005 15303358077 15052429536 18055336592 13959137811 13012470321 13793215625 18905356633 15966463378 18953526559 13803996112 13733188976 15978629195 13798197690 13660536301 13560480886 13927978822 男 广东云浮出入境检验检疫局 科员 寒 女 麦向真 女 南海检验检疫局 珠海检验检疫局(拱北办) 高工 工程师 主任科员 高级工程师 科员 副主任科员 主任科员 农艺师 兽医师 18023368030 tanzl@sw.gdciq.gov.cn wangzj@yf.gdciq.gov.cn 13078181102 jiangh@nh.gdciq.gov.cn 主任科员(农艺师) 13823098331 cnmxz@21cn.com 科员 13075608993 niweihunan@163.com 珠海出入境检验检疫局技术中心 海口机场出入境检验检疫局 海口机场出入境检验检疫局 重庆江北机场出入境检验检疫局 四川检验检疫局植检处 四川检验检疫局技术中心 四川检验检疫局陆运办 四川检验检疫局机场办 云南出入境检验检疫局技术中心 检验员 副科 科员 科员 18688151812 13876987291 15008976018 13983715060 15388153253 15982007446 15882326467 18224045624 qyb19860224@163.com 173683674@qq.com elvalove2007@163.com ronda.baoyun.54@163.com chuanjinwu@163.com sbl0218@qq.com ilmj1314@qq.com zhangli1985424@126.com 农艺师 13700631406 yueliangliang@126.com 新疆局植检处 新疆局技术中心 新疆阿拉山口出入境检验检疫局 喀什出入境检验检疫局 伊犁出入境检验检疫局综合技术服务中心 伊犁出入境检验检疫局都拉塔办事处 科员 初级农艺师 科员 中级 农艺师 科员 13659933046 13899927245 18997769691 18999090550 18999397048 18099511260 18999391602 Wendyyu816@163.com 110983128@qq.com 42606440@qq.com 1120277255@qq.com Qianyike123@126.com zkk8-511@163.com 副科长(农艺师) 13771859550 wxy8032@163.com 副科长 助理农艺师 科长 副科长 农艺师 研究员 研究员 13424307071 13418560528 13973197571 13877061883 13978751780 13701285600 13366307040 15201209401 15210508956 18505110080 13810925425 shisi-bihua@qq.com pg0101@126.com zhanglei@hnciq.gov.cn zhoug@gxciq.gov.cn 405992479@qq.com limf9@sina.com chk@163.com sydef1016@yahoo.com.cn zhaozhu-100@163.com 15057520@qq.com xujin1199@sina.com xiongyufen@126.com 珠海检验检疫局(横琴局) 50 倪 伟 男 51 52 53 54 55 56 57 58 权永兵 吕 微 张 特 包 贇 吴传金 邵宝林 鲁 昕 张 笠 男 女 女 女 男 男 女 男 59 岳亮亮 男 60 61 62 63 64 65 王小玉 李亚伟 邵振宗 尹梦亭 乾义柯 邹克坤 女 男 男 女 男 男 66 郭志君 男 67 万晓泳 男 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 朱锦锋 潘 广 张 磊 周 纲 白华菊 李明福 陈 克 宋 云 赵 竹 张 健 许 瑾 男 男 男 男 女 男 男 女 女 男 女 深圳局(罗湖) 深圳局动植中心 湖南局植检处 东兴检验检疫局 凭祥检验检疫局 中国检科院 中国检科院 中国检科院 中国检科院 中国检科院 中国检科院 79 熊玉芬 男 中国检科院 15210211104 80 王仁睿 女 中国检科院 15201085210 霍尔果斯局 苏州出入境检验检疫局邮件办 农艺师 农艺师 主任科员 gzjdit@126.com woshiarui1129@yahoo.com.cn 第一组 使用GenieⅡ鉴定南美斑潜蝇(Liriomyza huidobrensis) 试验指导:宋 云 A组: 伏建国(组长)、薛华杰、张吉红、邹克坤、郭志军、邵振宗、王栋梁、 许萍萍、张笠、刘晓宇 B 组:张明哲(组长)、鲁昕、吕学农、王欣月、褚栋、王建昌、蒋丹、刘 淑艳、王耀、李亚伟、谭章龙 第二组 使用GenieⅡ鉴定香蕉穿孔线虫(Radopholus similis) 指导老师:丁小兰: A组: 岳亮亮(组长)、邵宝林、刘曼玉、廖芳、许新军、杨斌、宫文妮、李 振、吕微、张特 B 组:周卫川(组长)、渠开山、王小玉、林颖峥、徐颖、麦向真、倪伟、 权永兵、王旭、谭波 第三组 使用浊度仪鉴定香蕉穿孔线虫(Radopholus similis) 指导老师:熊玉芬: A组: 李林(组长)、尹伟力、郑春生、乾义柯、夏云成、刘金华、盛存波、 柏建山、王新国、包贇 B 组:武扬(组长)、吴传金、侯保宁、尹梦亭、王珏、贾琴、韩英、宋南、 李萌、蒋寒、王照金 What we do next step Extension and application of the new techniques from Q-detect Promote new project cooperation Welcome to Beijing for ICPP2013 !