從光鉗到生醫 From Optical Tweezers To Biomedical Application 輔仁大學物理系 陳慧琪 個人簡歷 • 高一修習生物低空掠過,高二後第二類組 • 中原大學物理系學士 • 中央大學光電科學研究所博士 萬能、青雲科技大學兼任講師 蒲朗克公司兼任研發工程師 • 陽明大學博士後研究 • 輔大物理系助理教授 合作研究群 輔仁大學 生科系 呂誌翼教授 物理系 梁君致教授、林更青教授 化學系 楊恩哲教授 中央光電所 鄭益祥教授 師大光電所 鄭超仁所長 3 大綱 1. 2. 3. 4. 光鉗及光學操控簡介 光鉗在生醫上的應用 全像光鉗及其在生醫上的應用 拉曼光鉗及其在生醫上的應用 4 Acceleration & Trapping of Particles By Radiation Pressure, A. Ashkin, Phys. Rev. Lett. 1970, p156 光壓 雷射 光束 樣本溶液槽 Optical Fiber 光纖 2009 Nobel Prize 高錕 Trapping force and microsphere motion in the fiber-optic trap H. C. Chen, Y. T. Chen, Y. J. Chang, A. Chiou, CLEO 2005 光纖光束操控微粒 7 Acceleration and Trapping of Particles by Radiation Pressure, A. Ashkin Phys. Rev. Lett. 24, 156, 1970 Dual beam trapping 雙光束光鉗 Laser Beam 1 Laser Beam 2 Optical Levitation By Radiation Pressure A. Ashkin, J. M. Dziedzic, Appl. Phys. Lett. Vol. 19, #8 283,1971 光學漂浮 Optical force 光學力 Gravitational Force 重力 9 Single beam trapping 單光束鉗住 A revolution in optical manipulation, Observation of a Single-Beam Gradient Force Optical Trap for Dielectric Particles A. Ashkin, et al, Opt. Lett. V11, 288, 1986 Laser Beam High NA D. G. Grier, Nature, 810, 2003 光鉗作用力原理 Ray Optics Model (R>λ) 幾何光學模型 Laser beam Objective ai ar+at ai ∆P at ar n1 n2 n2>n1 ∑F 11 Optical Force Microscopy 光子力顯微鏡 E. Stelzer Optical tweezers system 光鉗系統 100倍 高度聚焦 顯微物鏡 綠 光 雷 射 13 紅 外 光 雷 射 Optical manipulation 光學操控 2μm Rotational control within optical tweezers by use of a rotating aperture Anna T. O’Neil and Miles J. Padgett Optics Letter 2002 Bio- ~ Stick-like cell manipulation 光鉗在生醫上的應用(1) 圓柱形物體在光鉗下的運動 E-coli 大腸桿菌 1μm 在光鉗下的E-coli 光鉗在生醫上的應用(2) 紅血球 RBC 單分子操控在生醫中的應用 Michelle D Wang Analytical biotechnology Combined optical trapping and singlemolecule fluorescence The Optical Stretcher 光學延伸器, 2000 細胞膜彈性量測 Single Fiber Trapping R. S. Taylor and C. Hnatovsky, Canada, 2003 光鉗在生醫上的應用(1) • 適當的選擇波長,不傷害生物樣品 • 單一細胞或微生物偵測 雷射波長選擇 綠光雷射鉗住紅血球 光子與物質的交互作用 光子入射被吸收 激發放射,物質吸 收光子,放射出2 個一樣的光子 自發放射,物質放射出光子 Holographic tweezers 全像光鉗 25 電腦全像光鉗-多微粒操控 2004 國立陽明大學生醫 魏名佐,楊坤達,張耀仁,陳慧琪,邱爾德 光電所 林政宏 國立台灣大學光電所;何恭璿 工業技術研究院光電所 反射式 液晶顯示器 45mW, particle~2.58μm 5μm/s 26 Work of M. Padgett, Glasgow Uni, UK THE SMALLEST STRIP THE WILLOW IN THE WORLD! 3-D 操控 27 Real-time three-dimensional optical micromanipulation of multiple particles and living cells P. J. Rodrigo, V. R. Daria, J. Glückstad Opt. Lett. 2004, p2270. Pattern formation(1) Pattern formation(2) 光子晶體 製作 奈米製造 微流道應用 Lab on the Chip 引導神經再生,2009, DJ Carnegie 奈米粒子與生物細胞間的交互作用 奈米粒子簇 溶液 生物 細胞 Optical Vortex 光學漩渦 35 光學漩渦操控 奈米氧化鐵簇,2010 36 Raman tweezers 拉曼光鉗 Laser tweezers Raman spectrum LTRS system 拉曼光鉗系統 CCD Laser L M IF Spectrometer 光譜儀 DM1 DM2 or BS M L L 高倍率高度聚焦 顯微物鏡 LED CCD M 38 光子與物質的交互作用 光子入射被吸收 激發放射,物質吸 收光子,放射出2 個一樣的光子 自發放射,物質放射出光子 Raman scattering 拉曼散射 無輻射躍遷 v=2 v=1 v=0 ν 振動能階 ν – ∆ν ν ν + ∆ν h ∆ν Rayleigh scattering Stokes Raman scattering Anti-Stokes Raman scattering v=1 v=0 ∆E = h ∆ν, ∆ν : Raman shift(cm-1) Wavenumber :cm-1 基態 Fluorescence 螢光 40 Raman spectroscopy in astrobiology, S. E. Jorge, 2006 拉曼光譜在太空生物學的應用 41 Thermosynechococcus elongatus 高溫藍綠藻菌 42 單一活體高溫藍綠藻菌(TA01)拉曼光譜 1265 1189 1210 953 964 873 1003 δ(C-CH3) ν(C=C) 1156 ν(C–C) 1519 β-carotene 514.5nm laser Resonance power:10mW acquisition time:90s 43 43 oil-producing microalgal cells 產油微生物 不飽和指防酸: 飽和脂肪酸 EHA, DHA…. 44 單一活體產油微生物拉曼光譜 514.5nm laser 45 Thanks for your attention