Practica 12 y 13 | ABO tipado
globular y sérico; factor Rh
El sistema ABO (A, B, AB, O)
Una persona puede tener diferentes antígenos en la superficie de sus
eritrocitos tales como:
A
B
AB
O “cero”
El antígeno que se tiene presente generará una presencia de un anticuerpo
opuesta en plasma;
A — anticuerpos B en suero
B — anticuerpo A en suero
AB — NO no anticuerpos
O — anticuerpos A y B
NO PUEDES TENER UN ANTICUERPO Y UN ANTIGENO ESPECIFICO O
GENERAS REACCION INMUNE DE AGLUTINACION.
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Métodos para poder identificar el tipo
sanguíneo ABO (tipificación)
DIRECTA EN TUBO (METODO DIRECTO) — Detec.
ANTIGENO
necesitaras 2 muestras de sangre de un mismo paciente (una con anticoagulante y otra
sin anticoagulante), hay que lavar el eritrocito para usarlo como antígeno
Pasos necesarios antes de procesamiento de muestra
1. Extraer punción venosa, 1 tubo será suficiente (5mL)
2. dejar que se forme el coagulo
3. despejar el coagulo
4. centrifugar 5 minutos a 3000 r.p.m
a. retirar el suero del tubo y colocarlo en un tubo de 12X75mm
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5. usar el paquete globular en el siguiente proceso
Proceso de muestra y lavado
1. vaciar 10 gotas con una pipeta del paquete globular del tubo vacutainer en un
tubo de ensaye de tamaño 13X100mm
2. agregar en el tubo de paquete globular 5mL de solución salina isotónica (SSI) a
0.9%
3. homogeneizar y centrifugar tubo a 3000 r.p.m por 1 minuto
4. decantar el sobrenadante
5. repetir desde paso 2 a 4 al menos otras 3 veces
6. al terminar la ultima decantación, el concentrado presente son eritrocitos lavados
7. los eritrocitos deberían estar lavados completamente
SUSPENSION DE ERITROCITOS AL 5%
1. Absorber 0.25mL de paquete globular lavado y adicionarlo a 4.75mL de SSI
(Solución salina isotónica) - homogeneizar con cuidado.
a. primero agregas la solución salina en un tubo 13X100mm y después vaciar los
eritrocitos lavados
TECNICA ABO DIRECTA (Tipado globular) — Detec. ANTIGENO
EN ERITRO
Vamos a usar los eritrocitos del paciente y los vamos a hacer reaccionar con
anticuerpos de laboratorio
1. después, colocar 4 tubos de ensaye de 12X75mm
a. rotular los tubos
i. 1 (Anti-A)
ii. 2 (Anti-B)
iii. 3 (Anti-AB)
iv. 4 (Anti-D) - Rh
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2. depositar una gota de reactivo hemo-clasificador (anticuerpo) dependiendo el
tubo
1. Adicionar una gota de suspensión de eritrocitos al 5% en cada tubo
2. mezclar los tubos agitando la gradilla suavemente
3. centrifugar todos los tubos a 3400 r.p.m durante 30 segundos
4. revisar si hay presencia de botones de eritrocitos (aglutinación) en cada tubo
5. anotar resultados
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PRUEBA INVERSA (METODO INDIRECTO) — Detec.
ANTICUERPO / tipado sérico
Los seres humanos desarrollan anticuerpos para antígenos de los grupos
sanguíneos del sistema ABO a excepción del antígeno que presentan (de) sus
propios eritrocitos, esto ayuda a conocer el grupo sanguíneo de alguien, si no
presentan reacción a un tipo de antígeno de un grupo entonces ese es su grupo.
Los eritrocitos son los reactivos
Se utilizará plasma O SUERO
TECNICA
1. colocar 4 tubos en una gradilla de tamaño 12X75mm
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a. rotular:
i. 5 (EA1) = eritrocito A1
ii. 6 (EA2) = eritrocito A2
iii. 7 (EB+) = eritrocito B
iv. 8 (EO+) = eritrocito O Rh+
2. Depositar 2 gotas del suero del paciente en cada tubo
3. depositar una gota del eritrocito indicado en su tubo correspondiente
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1. centrifugar los tubos a 3400 r.p.m durante 30 segundos
2. revisar si hay presencia de botones de eritrocitos (aglutinación) en cada tubo
3. anotar resultados
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FACTOR Rh (Antígeno D)
El factor Rh no es un anticuerpo natural (Rh- = presencia de anticuerpos anti Rh);
solo será presente si la persona fue expuesta a sangre con factor Rh positivo (Rh+ =
presencia de antígenos Rh)
se reaccionara suero Anti-Rh (ó Anti-D) con una muestra con eritrocitos; si hay
presencia de aglutinación es Rh positivo (presencia antígeno Rh) y si no hay
aglutinación es Rh negativo (presencia de anticuerpo Rh)
METODO
1. usar 2 tubos
a. rotular:
i. 9 (Anti-Rh0D)
ii. 10 (CA: control con albumina)
2. colocar 2 gotas de suero anti Rh0D en tubo 9
3. colocar 2 gotas de albumina al 22 o 30% en tubo 10
4. agregar 1 gota de susp. eritrocitos al 5% en los 2 tubos
5. mezclar cuidadosamente
6. centrifugar 3400 r.p.m 14 segundos
7. leer tubos y anotar resultados
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The Composition and Function of Blood
Of course we all know what blood is, and everyone has had at least
a minor injury involving blood. But what is it exactly? What's it made
of? What does it do...
https://www.youtube.com/watch?v=yj7bfZKlIp8&list=PLybg94Gv
OJ9HVbNobTmFnOxXRn1dIpffc&index=16
Blood Types (ABO and Rh) - Antigens and Antibodies
This video explains what blood types (ABO and Rh groups,
specifically) mean in terms of antigens and antibodies and why
certain types are incompatible with o...
https://www.youtube.com/watch?v=nP-HQPZ8-0I
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