MORFOLOGIA CELULAR PREPARACIONES EN FRESCO, COLORACIÓN SIMPLE Y COLORACIÓN DE GRAM LUISA FERNANDA PACHECO BELLO ANGELA GALLO RIVERO LISY GRACIA HERRERA ANDREA DORIA PEDRAZA UNIVERSIDAD DE CORDOBA FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD PROGRAMA DE BACTERIOLOGIA INTRODUCCIÓN A LA MICROBIOLOGÍA HORARIO: MIERCOLES DE 4-7PM INTRODUCCIÓN Los microorganismos que reciben el nombre de bacterias se pueden encontrar en todas partes. La inmensa variedad de especies ha permitido a estas formas de vida colonizar casi cualquier punto del mundo. Tampoco hace falta remarcar que han sido y siguen siendo elementos esenciales para la vida actual; por ejemplo, están al cargo de la descomposición orgánica. Las bacterias esféricas solitarias se conocen con forma de coco. Sin embargo, si en vez de una son dos células redondas unidas, entonces es son conocidas como diplococos. Hay uniones más complejas que originan una cadena (estreptococos) o formas irregulares que parecen un racimo de uvas (estafilococos). La característica principal en este tipo de bacterias, bacilo, es que presentan forma de bastoncillos alargados. Al igual que pasaba en los cocos, los subtipos parten de cómo se agrupan las células. La forma solitaria es lo que se llama como bacilo. Si se encuentran dos células unidas, entonces se trata de un diplobacilo. En las uniones más multitudinarias pueden ser diferenciadas según si se unen por las puntas formando una cadena (estreptobacilos) o por los laterales, formando un muro (empalizada). Preparaciones no coloreadas: Las preparaciones en fresco se utilizan para observar microorganismos vivos, se puede observar con facilidad su movilidad y su forma Preparaciones coloreadas: Las técnicas de coloración permiten la observación morfológica con un mejor contraste que en el examen en fresco, así como la observación de estructuras celulares. La tinción de Gram es uno de los métodos de tinción más importantes en el laboratorio bacteriológico y con el que el estudiante debe estar perfectamente familiarizado. Su utilidad práctica es indiscutible y en el trabajo microscópico de rutina del Laboratorio de Microbiología las referencias a la morfología celular bacteriana (cocos, bacilos, positivos, negativos, etc.) se basan justamente en la tinción de GRAM Los colorantes vitales permiten observar movilidad, así como algunos de sus organelos o inclusiones teñidas, sin daño aparente; estos se preparan en soluciones acuosas o alcohólicas muy diluidas. En tanto que los colorantes supravitales, aun cuando tienen la ventaja de hacer más evidentes algunos organelos, presentan el inconveniente de afectar la viabilidad de los organismos. Estos colorantes varían en su composición y consisten en mezclas de reactivos que incluyen el colorante, ácidos, aldehídos, alcoholes y agua. Los primeros se aplican directamente en la muestra, en tanto que para los supravitales se recomienda aplicar una pequeña cantidad del colorante al portaobjetos y dejar secar y posteriormente colocar la muestra. Para que la aplicación del colorante sea uniforme, se recomienda extenderlo con la ayuda de otro portaobjetos. OBJETIVOS Conocer la morfología de los diferentes microorganismos Identificar y describir las características microscópicas y tintoriales de las bacterias. Mostrar la importancia de una tinción para la diferenciación de bacterias basándose en las propiedades estructurales de la pared celular MARCO TEORICO En 1884, durante su viaje a Berlín, diseñó y presentó el método microbiológico de tinción de bacterias que lleva su nombre. Se compone de yodo, yoduro potásico y agua, y permite teñir determinados elementos por contraste con otros o con el fondo. El método de Gram permite clasificar a las bacterias en dos tipos fundamentales, grampositivas y gramnegativas. La diferencia entre las bacterias grampositivas y gramnegativas está en función de si retienen o no el colorante cristal violeta después de una serie de tratamientos. Esto permite averiguar qué tipo de pared celular tienen las bacterias. Otros microorganismos también responden a este tipo de tinciones, como por ejemplo las levaduras, que son grampositivas, y las bacterias del género rickettsias, que son gramnegativas. La curiosidad es siempre la ayuda perfecta de un científico, y ella le permitió a Gram observar, mientras examinaba un tejido pulmonar de un paciente que había muerto de neumonía, que las bacterias presentes en la muestra tomaban diferentes coloraciones cuando se les colocaban distintos colorantes. ¡Cuántos serían los ensayos realizados por Gram para lograr establecer que debía realizarse la coloración de estos microorganismos en diferentes pasos! Hoy en día es sencillo escribir sobre esta técnica, pero queremos trasladarnos a ese tiempo y averiguar cómo fue logrado por Gram Creemos que Gram no supo valorar lo trascendencia de su método de coloración; era muy modesto, y esto lo observamos cuando escribió "He publicado un método, aunque estoy consciente de que todavía es defectuoso e imperfecto; pero deseo que en manos de otros investigadores pueda resultar de utilidad". Hoy en día la coloración de Gram es de uso mundial. Sabemos, sin temor a equivocarnos, que este método es, sin duda, una de los pilares del diagnóstico temprano de las infecciones bacterianas. CONCLUSIÓN Luego de terminar el laboratorio logramos concluir que la tinción de Gram es una herramienta muy útil en el laboratorio de microbiología así como en los análisis clínicos y diagnostico medico siendo ineludible conocer su fundamento y procedimiento, para poder tener una correcta interpretación de los datos que nos otorga la diferenciación de Gram positiva y negativa concluyendo que debido a la estructura de sus paredes celulares tendrán o no propiedades patológicas diferentes. El químico al dar los resultados sobre un estudio de Gram positiva o negativa es realmente importante para el diagnóstico y buen tratamiento de la patología relacionada en los microorganismos es necesario saber cómo influyen en las manifestaciones clínicas las diferencias existentes entre la pared celular de las bacterias Gram positivas y Gram negativas en su detección y en el tratamiento. Porque existen componentes de la pared celular que contribuyen a la virulencia delas bacterias protegiéndolas de las respuestas inmunitarias. BIBLIOGRAFIA Gram, C. (1884). The differential staining of Schizomycetes in tissue sections and in dried preparations. Fortschritte der Medizin, 2, 185-9. Madigan, M. T; Martinko J., Parker J. (2004): Brock biology of microorganisms. Lippincott Williams & Wilkins, décima edición, 2004. ISBN 0-13-066271-2. Madani, Kaivon. Dr. Hans Christian Jaochim Gram: inventor of the Gram stain. https://cienciatoday.com/tincion-de-gram/ https://www.biografiasyvidas.com/biografia/g/gram.htm