Traducido del inglés al español - www.onlinedoctranslator.com Capítulo 3 Principios y prácticas de bioseguridad para el laboratorio de diagnóstico veterinario Joseph Kozlovac y Beverly Schmitt Resumen Los buenos programas y prácticas de bioseguridad y biocontención son componentes críticos del funcionamiento exitoso de cualquier laboratorio de diagnóstico veterinario. En este capítulo proporcionamos información y orientación sobre los elementos críticos del programa de gestión de la bioseguridad, los requisitos de las instalaciones, el equipo de protección y los procedimientos necesarios para garantizar que el trabajador del laboratorio y el medio ambiente estén adecuadamente protegidos en el entorno de trabajo desafiante del laboratorio de diagnóstico veterinario en general y proporcionar orientación específica para aquellos laboratorios que emplean técnicas de diagnóstico molecular. Palabras claveBioseguridad, Biocontención, Bioseguridad de laboratorio 1. Introducción Los laboratorios de diagnóstico veterinario desempeñan un papel crítico y fundamental en los sistemas de salud pública y de salud veterinaria de cada país, pero también actúan como un componente clave de los sistemas de salud pública y de salud veterinaria regionales y mundiales. El campo de la bioseguridad promueve prácticas y procedimientos de laboratorio seguros y el uso adecuado de los equipos e instalaciones de contención; promueve actividades responsables entre los trabajadores de laboratorio; y brinda asesoramiento sobre el diseño de laboratorios. Las personas que trabajan en laboratorios de diagnóstico veterinario tienen exposición ocupacional a una variedad de materiales peligrosos en el lugar de trabajo. Los laboratorios de diagnóstico son entornos de trabajo exigentes donde el ritmo es frenético, la carga de trabajo suele ser pesada y la presión para proporcionar resultados rápidos, precisos y confiables está siempre presente. Mónica V. Cunha y João Inácio (eds.),Biología de infecciones veterinarias: diagnóstico molecular y estrategias de alto rendimiento, Métodos en Biología Molecular, vol. 1247, DOI 10.1007/978-1-4939-2004-4_3, © Springer Science+Business Media Nueva York 2015 31 32 Joseph Kozlovac y Beverly Schmitt 2 Elementos básicos de un programa de bioseguridad Todos los programas exitosos de bioseguridad, y de hecho cualquier programa efectivo de seguridad y salud, tendrán los siguientes elementos clave en común: (1) compromiso y liderazgo de la gerencia, (2) participación de los empleados, (3) identificación y evaluación de peligros, (4) prevención de peligros. y control, (5) comunicación de peligros y capacitación, y (6) evaluación de la efectividad del programa [1]. El diagrama de la Fig.1describe los elementos básicos necesarios para un programa eficaz de gestión de la bioseguridad, y cada uno se analizará más adelante. La bioseguridad se ha desarrollado como un campo distinto ya veces independiente de la seguridad industrial debido a la complejidad, el entorno de trabajo único y la naturaleza evolutiva del peligro: los organismos biológicos. Por lo tanto, el compromiso de la gerencia debe ser sólido y consistentemente demostrable para que un programa de bioseguridad se desarrolle, implemente, sostenga y mejore continuamente. El liderazgo de una organización establece el tono para el programa de bioseguridad, y esto comienza con las declaraciones de visión y misión de la organización. Una declaración de visión es la imagen mental del liderazgo del estado futuro posible y/o deseable de la organización (o subcomponente de la organización). Para que la visión del liderazgo tenga impacto en los empleados, debe comunicarse de manera duradera y dramática; “Excelente ciencia Misión Declaración Programa bioseguridad Evaluaciones Política Organizativo Visión Entrenar y Programa Asistencia Objetivos bioseguridad Riesgo Manual Evaluación (POE) (IBC) Figura 1Elementos básicos del programa de gestión de la bioseguridad Bioseguridad para Laboratorio de Diagnóstico Veterinario 33 hecho de manera segura” sería un buen ejemplo. Una declaración de misión es la visión de una organización traducida a forma escrita. Debe ser una declaración breve y concisa de objetivos y prioridades, como el siguiente ejemplo de una declaración de misión para un programa de bioseguridad: El propósito del Programa de Bioseguridad es prevenir o minimizar la exposición de los empleados o la liberación ambiental accidental de agentes biológicos peligrosos a través de la promoción de prácticas y procedimientos de laboratorio seguros y el uso adecuado de equipos e instalaciones de contención por parte de empleados, estudiantes, visitantes y contratistas. La visión y misión del programa de bioseguridad para lograr la máxima eficacia debe poder vincularse directamente con las declaraciones o metas de visión y misión de la institución. La política de bioseguridad de una institución es especialmente crítica porque define las funciones y responsabilidades del programa en todos los niveles, así como la metodología para definir las metas del programa y cómo se mide la responsabilidad individual en todos los niveles. Es importante que la política de bioseguridad establezca claramente la intención y la dirección del liderazgo institucional, y la documentación de respaldo debe identificar una cadena de responsabilidad para la información sobre temas relacionados con la bioseguridad. Es importante señalar que la política escrita de bioseguridad/biocontención es solo otro mecanismo para comunicar la política a los empleados. Supervisores de laboratorio, investigadores principales, La actitud de los profesionales de la seguridad y la bioseguridad y otros líderes institucionales hacia la seguridad de la biotecnología y lo que hacen tanto a nivel individual como colectivo, o dejan de hacer, es una expresión más poderosa de la política y cultura de seguridad de la biotecnología real que las palabras escritas reales de la política. En otras palabras, solo se creará y mantendrá una cultura de bioseguridad sólida cuando todos los niveles de gestión demuestren su compromiso personalmente incorporando y recompensando los comportamientos que apoyan la cultura y abordando de manera concluyente los comportamientos de otros que socavan la cultura de seguridad. Siguiendo en el sentido de las agujas del reloj en el diagrama de la Fig.1, el globo cuarto al séptimo representan colectivamente la participación universal de los empleados a través de la identificación y evaluación de peligros, la prevención y el control de peligros, la información y la capacitación, y la evaluación de la eficacia del programa. La participación de los empleados es fundamental para el éxito de cualquier programa de bioseguridad. Los empleados de todos los niveles dentro de la organización deben involucrarse y brindarles oportunidades para participar activamente en el programa de bioseguridad, como participar en varios comités de seguridad involucrados en la evaluación de riesgos y el desarrollo de políticas, participar en discusiones activas sobre temas de bioseguridad en reuniones de laboratorio programadas regularmente. la inclusión del personal de laboratorio en los equipos de inspección y auditoría de bioseguridad y, finalmente, garantizar que los empleados participen en la determinación de las metas y métricas relacionadas con la bioseguridad para sus áreas de trabajo específicas. 34 Joseph Kozlovac y Beverly Schmitt recomendaciones para mejorar la seguridad y la salud en su entorno de trabajo. Los componentes críticos de este estímulo son la creación y el cumplimiento de protecciones tipo "denunciante" para aquellos empleados que informen inquietudes como mínimo e, idealmente, la creación de una estructura de recompensas para informes que fomenten prácticas seguras pero desalienten informes falsos o represalias. A medida que se establece una cultura de seguridad dentro de una organización y los empleados adoptan esos comportamientos críticos de seguridad como norma, se crea un entorno en el que los comportamientos de riesgo ya no se toleran entre los compañeros o la gerencia [2]. Por supuesto, cualquier programa sólido de bioseguridad debe incluir un proceso formal continuo de identificación de peligros, evaluación de riesgos, prevención y mitigación de peligros, que está a cargo del supervisor del laboratorio o de un comité como un comité de bioseguridad. Discutiremos más estos elementos en la siguiente sección, ya que están estrechamente relacionados. 3 Evaluación de riesgos para laboratorios de diagnóstico veterinario La naturaleza del trabajo de diagnóstico veterinario, que implica trabajar con muestras de estado desconocido que pueden contener patógenos veterinarios estrictos o patógenos zoonóticos, difiere del trabajo realizado en laboratorios de investigación donde se conocen los riesgos del agente y se pueden incorporar en la evaluación de riesgos inicial. Los trabajadores de diagnóstico que trabajan en salud pública (humana) tienen un riesgo de exposición ocupacional significativo y conocido a cultivos o tejidos que contienen patógenos que infectan a los humanos. Sin embargo, el riesgo para aquellas personas que trabajan en laboratorios de diagnóstico veterinario por exposición ocupacional a patógenos que pueden infectar y causar enfermedades en humanos no es despreciable. De hecho, el 65 % de las enfermedades infecciosas identificadas en humanos son causadas por organismos que infectan a múltiples huéspedes en la naturaleza.3]. En consecuencia, los profesionales de la salud veterinaria y los trabajadores de diagnóstico deben estar familiarizados con los principios y prácticas para prevenir la transmisión de agentes infecciosos (conocidos colectivamente como "precauciones estándar"). En 2006, el Comité de Control de Infecciones Veterinarias de la Asociación Nacional de Veterinarios de Salud Pública del Estado (NASPHV) publicó un compendio de precauciones estándar veterinarias, Prevención de Enfermedades Zoonóticas en el Personal Veterinario[4], que es una excelente revisión de las precauciones estándar que se deben emplear al trabajar con animales en el campo, en clínicas veterinarias y en laboratorios de diagnóstico que manipulan tejidos animales o agentes zoonóticos. Otra excelente referencia sobre precauciones estándar tituladaPauta para las precauciones de aislamiento:Prevención de la transmisión de agentes infecciosos en entornos de atención médicafue publicado en 2007 por el Comité Asesor de Prácticas de Control de Infecciones en el Cuidado de la Salud (HICPAC) [5]. Esta guía analiza las prácticas y precauciones de los trabajadores para minimizar Bioseguridad para Laboratorio de Diagnóstico Veterinario 35 transmisión de enfermedades infecciosas en el cuidado de pacientes y laboratorios de diagnóstico y es otra referencia valiosa para aquellas personas que trabajan en laboratorios de diagnóstico de animales y humanos. Además de los riesgos laborales asociados con patógenos veterinarios potencialmente zoonóticos, aquellas personas que realicen una evaluación de riesgos con patógenos veterinarios en los que los humanos no son un huésped relevante deben ser conscientes de los factores de riesgo para la agricultura animal que se basan principalmente en el impacto económico potencial en la salud animal. asociado con la liberación de un patógeno veterinario, así como las implicaciones comerciales internacionales de la enfermedad [6]. Algunas características específicas del agente que deben evaluarse como parte de una evaluación integral de riesgos que involucre patógenos de importancia veterinaria son las siguientes: - ¿El agente es endémico o foráneo a la región? - ¿El animal huésped es nativo o exótico del área? - - - ¿Qué se sabe sobre la morbilidad y mortalidad causada por el agente, incluso si es exclusivamente un agente animal o un agente zoonótico? ¿Existen profilaxis, tratamientos o vacunas eficaces disponibles (para animales y/o humanos)? ¿Cuáles son los patrones de diseminación y transmisión del agente en las especies hospedantes relevantes? - - - ¿Se introducirá el agente en especies de las que no hay datos? ¿Existen programas activos de control o erradicación de la enfermedad? ¿Cuáles son la estabilidad ambiental, la cantidad y la concentración del agente? ¿Cómo se utilizarán los agentes: en animales (a gran o pequeña escala), en el campo o en el laboratorio? - - ¿Cuál es el rango de huéspedes del agente? ¿Existen programas de pruebas de vigilancia en curso? ¿El agente es vectorizado y transmitido, y cuál es la ocurrencia de vectores competentes? [7]. Una evaluación de riesgos también debe revisar los elementos operativos del trabajo propuesto con peligros biológicos. Los laboratorios de diagnóstico necesitan (como mínimo) realizar una evaluación de riesgos en las siguientes áreas operativas: - Recepción, desembalaje y traslado al laboratorio. - Procesamiento inicial de la muestra. - Preparación de muestra para análisis (cultivo, ELISA, reacción en cadena de la polimerasa (PCR), etc.) [8]. Aunque la metodología de evaluación de riesgos puede ser cuantitativa o cualitativa, se reconoce que la mayoría de las instituciones de ciencias biológicas 36 Joseph Kozlovac y Beverly Schmitt Figura 2Proceso de evaluación y gestión de riesgos favorezca la metodología cualitativa como la gestión del riesgo operativo, que es un proceso continuo que se puede desglosar en los pasos clave representados en el diagrama de la Fig.2. Para obtener información más detallada sobre los riesgos operativos asociados con actividades de diagnóstico específicas, los autores recomiendan que los lectores revisen los Centros para el Control y la Prevención de Enfermedades (CDC) de EE. UU.: Directrices para prácticas laborales seguras en laboratorios de diagnóstico médico humano y animal(www.cdc.gov/mmwr/preview/mmwrhtml/su6101a1. htm) [9]. Finalmente, una evaluación de riesgos debe revisar la capacitación, la experiencia y la competencia de las personas que realizarán el trabajo con riesgos biológicos. El riesgo de exposiciones, infecciones adquiridas en el laboratorio y la liberación no intencional de materiales de investigación, clínicos o de diagnóstico al medio ambiente debe reducirse en última instancia al garantizar la competencia de los trabajadores de laboratorio en todos los niveles. De hecho, muchas instituciones han implementado con éxito un programa formal de capacitación y tutoría para personas nuevas en el laboratorio, independientemente de su educación y experiencia previas en otros lugares, y los autores creen que esta es una práctica que debe fomentarse en todos los laboratorios. Sin embargo, cuando se trabaja con un nuevo riesgo biológico o un cambio en el trabajo que se realiza actualmente, se debe realizar un cambio en el nivel de riesgo y una evaluación del riesgo. que incluye una revisión de la experiencia y competencia del supervisor y el personal del laboratorio como parte de este proceso formal de evaluación de riesgos. Un suplemento MMWRDirectrices para la competencia del laboratorio de bioseguridadfue publicado en nombre de los CDC y la Asociación de Laboratorios de Salud Pública (APHL) en 2011 [10]. Estas competencias describen las habilidades, los conocimientos y las habilidades esenciales que se requieren para trabajar con agentes biológicos en los tres niveles más altos de bioseguridad (BSL, por sus siglas en inglés) (niveles 2, 3 y 4) según se define en la publicación HHS/NIHBioseguridad en Microbiología y Biomedicina Bioseguridad para Laboratorio de Diagnóstico Veterinario 37 laboratorios, 5ª edición [11]. Este documento puede ser una herramienta útil para categorizar el nivel de competencia de laboratorio del personal de un laboratorio de diagnóstico, así como para el desarrollo de programas de capacitación en bioseguridad basados en competencias. Una vez que una evaluación de riesgos válida y completa ha identificado los peligros de los agentes, los peligros operativos y las necesidades de capacitación del personal, la(s) persona(s) que realiza(n) la evaluación de riesgos puede(n) minimizar esos riesgos mediante el uso de controles de ingeniería de instalaciones, controles administrativos, equipo de protección personal y programas de formación diseñados para integrar todos esos factores al nivel de competencia individual de los empleados. 4 niveles de biocontención Muchas instituciones y organizaciones en todo el mundo deben considerar los riesgos presentados por la investigación propuesta con patógenos agrícolas y tomar decisiones con respecto a la ubicación de estos patógenos en categorías adecuadas de biocontención y/o bioseguridad [6]. Muchos países y organizaciones internacionales como la Organización Mundial de Sanidad Animal (OIE) han publicado una guía para definir los niveles de biocontención y/o bioseguridad, que proporcionan combinaciones específicas de características de diseño de instalaciones, controles de ingeniería, prácticas laborales y equipos de protección personal (o alternativas). barreras) para una gama de riesgos asignados de menor a mayor. La mayoría de los documentos de orientación recomiendan que la selección de las características de diseño de las instalaciones, el equipo de protección y los controles administrativos se basen en una sólida evaluación de riesgos específica del sitio (como se describió anteriormente) que tenga en cuenta las características del agente y el tipo de trabajo que se llevará a cabo. y capacitación y competencia del personal que realiza el trabajo. En la Sesión General de la OIE de mayo de 2014 se adoptó el nuevo capítulo del Manual de la OIE “Normas para la gestión del riesgo biológico en los laboratorios veterinarios y las instalaciones para animales”. Todavía no se ha combinado con el antiguo capítulo del Manual sobre bioseguridad; ese todavía es un capítulo independiente, aunque se están haciendo esfuerzos para combinar los dos en un futuro próximo. El nuevo capítulo se basa en gran medida en los conceptos articulados en el Acuerdo de taller CEN (CWA) 15793 sobre gestión de riesgos biológicos en laboratorios, que estaba programado para expirar en septiembre de 2014, pero se transfirió a la Organización Internacional de Normalización (ISO) para ser utilizado como fuente principal para un Entregable ISO. El nuevo capítulo se aleja del enfoque tradicional de describir los niveles mínimos recomendados de biocontención a un enfoque de medidas de control de riesgos específico del laboratorio. 38 Joseph Kozlovac y Beverly Schmitt prácticas de bioseguridad y aplaudimos a la OIE por incluir estos conceptos como uno de los puntos focales en el nuevo capítulo del Manual Terrestre. Sin embargo, los autores todavía ven valor para las organizaciones internacionales en proporcionar niveles mínimos de biocontención. 5 Requisitos mínimos de las instalaciones para todo el trabajo de laboratorio biológico 1. El laboratorio debe ser fácil de limpiar, con superficies impermeables al agua y resistentes a los productos químicos. Habrá un lavamanos cerca de la salida. En cada suite de laboratorio debe haber una ducha de emergencia, incluido un lavaojos, adecuada a los riesgos que representan los productos químicos y otros peligros presentes. 2. Se debe restringir el acceso del personal al área de trabajo; pueden ser necesarias medidas de seguridad adecuadas, como el acceso electrónico controlado, con agentes de mayor riesgo. 3. La puerta del laboratorio debe estar cerrada cuando se está trabajando y debe proporcionarse ventilación extrayendo el aire de la habitación (cuando se utilicen gabinetes de bioseguridad, se debe tener cuidado de equilibrar los sistemas de ventilación). 4. No se deben desechar materiales infecciosos en los fregaderos del laboratorio y debe haber disponible un método para descontaminar los materiales de desecho dentro de la instalación (autoclave, etc.). 5. No se recomiendan las ventanas del laboratorio que se abren al exterior. Si un laboratorio tiene ventanas operables, deben estar equipadas con mosquiteros [9,11]. Los laboratorios de diagnóstico veterinario reciben rutinariamente especímenes donde es posible una variedad de enfermedades. Cuando se desconoce la naturaleza infecciosa de la muestra, es prudente que las actividades iniciales de procesamiento utilicen instalaciones, procedimientos y equipo de protección personal según lo descrito por la Organización Mundial de la Salud (OMS) (www.who.int/csr/resources/publications/biosafety/ WHO_CDS_CSR_LYO_2004_11/en) y otras orientaciones reconocidas internacionalmente como nivel de bioseguridad 2. Debe utilizarse equipo de contención primaria, como una cabina de seguridad biológica Clase II, cuando las manipulaciones de laboratorio tengan el potencial de generar aerosoles o salpicaduras de materiales potencialmente infecciosos. Cuando la historia clínica de la muestra sugiera un mayor nivel de contención, ese nivel debe utilizarse de manera similar. 6 Procedimientos Operacionales (Énfasis en Pruebas Moleculares) El uso de procedimientos moleculares como PCR y secuenciación no excluye la necesidad de procedimientos adecuados de bioseguridad y biocontención para trabajar con muestras y/o agentes de diagnóstico. Bioseguridad para Laboratorio de Diagnóstico Veterinario 39 Los procedimientos operativos de biocontención y bioseguridad deben determinarse y deben basarse en una evaluación de riesgos [12]. Los procedimientos operativos estándar para el manejo de muestras y/o agentes de diagnóstico son los siguientes: 1. El acceso al laboratorio está restringido. 2. El personal del laboratorio debe lavarse las manos después de manipular material infeccioso y antes de abandonar el laboratorio. 3. No está permitido comer, beber, fumar, manipular lentes de contacto y aplicarse cosméticos o medicamentos en las áreas designadas para trabajar con material infeccioso. Los alimentos se almacenan fuera del área de trabajo del laboratorio. 4. Está prohibido pipetear con la boca. 5. Debe existir una política para el manejo de objetos punzocortantes. 6. Se debe minimizar la generación de aerosoles. Cualquier procedimiento que se reconozca que genera aerosoles debe realizarse en un equipo de contención primaria, como una cabina de seguridad biológica Clase II. 7. Las superficies de trabajo deben descontaminarse antes y después de la manipulación de material infeccioso. 8. Todo el material infeccioso debe descontaminarse antes de desecharlo utilizando un método como el autoclave. 9. Se debe usar equipo de protección personal (EPP) según la evaluación de riesgos del material infeccioso. Ejemplos de PPE son bata de laboratorio, guantes (látex, nitrilo) y respirador (si se usa un respirador, la persona debe participar en un programa de protección respiratoria del centro que incluye evaluación médica, capacitación y pruebas de ajuste). 10. Las cabinas de bioseguridad se recomiendan para trabajos con material infeccioso ya que su uso adecuado protegerá al operador y evitará la contaminación del medio ambiente [11]. 6.1 Seguridad especial Consideraciones para trabajo molecular Los laboratorios que realizan trabajos moleculares pueden enfrentar riesgos de seguridad únicos, como descargas eléctricas, luz ultravioleta y productos químicos cáusticos, corrosivos, cancerígenos o mutagénicos. Las fuentes de energía de alto voltaje utilizadas en equipos de electroforesis y secuenciación no deben usarse cerca de líquidos y gases inflamables. Las fuentes de energía deben ser reparadas únicamente por técnicos debidamente capacitados. La luz ultravioleta (UV) se utiliza para visualizar bandas de ácido nucleico en geles y para descomponer el ADN y el ARN en las superficies de trabajo. Se debe tener especial cuidado de usar protección para los ojos y la piel cuando haya una posible exposición a la luz ultravioleta. Los productos químicos como el fenol, el cloroformo, el bromuro de etidio y el isotiocianato de guanidina se utilizan comúnmente en trabajos moleculares como la extracción de ácidos nucleicos.9]. 40 Joseph Kozlovac y Beverly Schmitt 6.2 Movimiento de ADN/ARN extraído de alta a baja contención Áreas de laboratorio Un laboratorio puede tener la necesidad de extraer ARN/ADN de muestras que pueden estar infectadas con un patógeno de alto impacto y posteriormente analizarse en un nivel de contención más bajo. En estas situaciones, se debe considerar el tipo de patógeno con énfasis en si el método de extracción proporcionará una inactivación completa. Los procedimientos de extracción de virus que utilizan productos químicos de disrupción de proteínas como el fenol y el isotiocianato de guanidina (GITC) inactivarán completamente la mayoría de los virus.13]. Estos métodos pueden ser menos efectivos para las esporas bacterianas, y es posible que el trabajador deba introducir un paso de tratamiento térmico [14]. Después de la extracción, el sedimento puede probarse a un nivel más bajo de biocontención con un tratamiento recomendado del tubo que contiene el sedimento con un desinfectante adecuado. Todos los procesos desarrollados deben probarse y validarse con un protocolo de aislamiento sólido antes de la implementación. 6.3 Operacional Desafíos Las técnicas moleculares, como la PCR en tiempo real, han demostrado una mayor utilidad en los brotes de enfermedades en comparación con las técnicas convencionales, como el aislamiento de virus.15]. La PCR en tiempo real realizada en un formato de placa de 96 pozos permite el uso de equipos de alto rendimiento que pueden aumentar drásticamente la "capacidad de aumento" del laboratorio. Debido a la velocidad y precisión del procedimiento, el número total de muestras analizadas está prácticamente limitado principalmente por los pasos iniciales de procesamiento e informe de muestras. Si bien el uso de PCR en un brote puede disminuir la cantidad de personas necesarias en el banco, es necesario contar con personal adecuado para los puestos de apoyo para manejar el procesamiento inicial de muestras y las tareas de informes. Una gran cantidad de recursos monetarios y de personal se han dedicado en la última década a establecer e implementar PCR en países de bajos recursos, en particular, para la detección de influenza aviar. Si bien la PCR es una herramienta de diagnóstico sólida, esta tecnología tiene requisitos de infraestructura previos, como una fuente confiable de electricidad para hacer funcionar equipos especializados (termocicladores y software de análisis). La falta de recursos en los países de bajos recursos será un desafío continuo para el desarrollo y mantenimiento de los programas de vigilancia de las enfermedades animales y zoonóticas de interés. La validación y el control de calidad de las técnicas moleculares son muy similares a los que requieren los ensayos convencionales, con algunas consideraciones especiales [dieciséis]. La PCR puede prestarse al uso de controles internos que pueden garantizar el rendimiento de la prueba en varios pasos clave, como la extracción y la amplificación. Se recomienda que se utilicen controles internos validados para fines de control de calidad. La nueva tecnología de secuenciación de próxima generación está haciendo que el análisis genómico sea más barato y esté más disponible para laboratorios de cualquier tamaño. Desde una perspectiva de bioseguridad, esta tecnología tiene los mismos requisitos que se describieron anteriormente en el capítulo. Bioseguridad para Laboratorio de Diagnóstico Veterinario 41 7. Conclusión La implementación y mantenimiento de medidas de bioseguridad apropiadas es una de las partes más importantes de las operaciones de laboratorio de diagnóstico veterinario. Se deben realizar evaluaciones de riesgo sólidas y completas para determinar las medidas de protección adecuadas que se utilizarán en el laboratorio. El uso de técnicas moleculares no excluye la aplicación de medidas de bioseguridad adecuadas para manejar los riesgos biológicos de las muestras de diagnóstico previas a la extracción, así como las medidas generales de seguridad de laboratorio necesarias para abordar los peligros químicos y físicos inherentes a estos procedimientos. Referencias 1. Roughton J, Mercurio J (2002) Desarrollo de una cultura de seguridad efectiva: un enfoque de liderazgo. Butterworth-Heinemann, Oxford, Reino Unido 2. Gershon R, Karkashian C, Grosch J et al (2000) Clima de seguridad hospitalaria y su relación con prácticas laborales seguras e incidentes de exposición en el lugar de trabajo. Am J Control de infecciones 28:211–221 3. Asociación Médica Veterinaria Estadounidense (2008) Una salud: un nuevo imperativo profesional.http:// www.avma.org/onehealth. Consultado el 23 de diciembre de 2013 (eds) Antología de bioseguridad XIII. Producción y protección animal: desafíos, riesgos y mejores prácticas. 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