ENTEROBACTERIAS
Familia enterobacteriaceae:
● No son formadores de endosporas anaerobios facultativos
●
Utilizan la glucosa por vía fermentativa dando como producto acidos mixtos
algunas veces con producción de gas
●
Reducen nitratos a nitritos
●
Catalasa positiva, oxidasa negativa por eso son anaerobios facultativos
●
Muchas patógenos humanos, animales, e incluso plantas
●
Microbiota del intestino grueso, también en faringe, genitales
●
Pueden estar en el suelo y el agua
División serotipos
●
Somático “O” que está dado por el flagelar dado por el antígeno “H”
●
Capsular que está dado por el antígeno K
Clasificación de las enterobacterias
Pruebas básicas
TSI:
●
Color: Rojo ladrillo
●
Indicador de pH: Rojo de fenol
●
Sustratos principales: Proporción 10: 1: Lactosa y sacarosa (10), glucosa (1), para
las bacterias es más fácil utilizar el monómero de la glucosa porque tiene la
enzima glucosa 6 fosfato deshidrogenasa,y cuando ponemos lactosa
(glucosa+galactosa)la bacteria activa la maquinaria metabólica que descompone la
lactosa en hasta monómeros de glucosa, con la sacarosa la bacteria tiene que
activa invertasa que la vuelve fructosa y glucosa. Obtienen monómeros a partir
de un polisacárido
●
Sustratos secundarios: Tiosulfato sódico,peptona, citrato férrico amoniacal y
extractos
●
Glucosa en el fondo del tubo y lactosa, galactosa en la parte de arriba del tubo
●
Fundamento: La bacteria utiliza la glucosa, sacarosa y lactosa dando lugar a
acidos mixtos que hacen que el rojo de fenol haga que el medio vire a amarillo, el
color inicial del medio es rojo ladrillo, tiene la enzima deshidrogenasa formica
que da produccion de gas y ocurre un desplazamiento del medio. Si tiene la
enzima tiosulfatasa el medio vira aun color negro que surge por que hay
presencia de de H2S que se combina con sales de hierro y citrato de Na
C:
1: K/K Presencia de gas -, H2S 2: K/A Presencia de gas - , H2S 3: K/A Presencia de gas +, H2S +++
4: A/A Presencia de gas +++, H2S - .La bacteria utiliza la glucosa, sacarosa y
lactosa dando lugar a acidos mixtos que hacen que el rojo de fenol vire a amarillo,
tiene la enzima deshidrogenasa formica que da produccion de gas y no tiene la
enzima tiosulfatasa por lo que no hay produccion de H2S
4A: A/A Presencia de gas +++, H2S 5: A/A Presencia de gas + , H2S +++. La bacteria fermenta las tres azucares, por
la vía fermentativa se produce el H2S que se mezcla con citrato de Na y sales de
hierro que gacen que se vuelva a un color negro
LIA:
●
Color: Lila
●
Indicador de pH : Púrpura de bromocresol
●
Se siembra por picadura profunda y luego por estría
●
Sustratos
-
Principales: Lisina (Nos ayuda a saber si hay desaminación y
descarboxilación) y glucosa (producción de ácidos)
●
Secundarios: peptona, tiosulfato de sodio, extracto de levadura
Evaluar la presencia de las enzimas lisina decarboxilasa y lisina
desaminasa
●
En la parte de abajo del tubo se evalúa la actividad de la lisina K:
Descarboxilación (Y para que esta suceda debe haber un ambiente
anaerobio y ácido) El pH ácido se lo da la glucosa, ya que la bacteria
utiliza la glucosa obteniendo un producto ácido, dando lugar a las condiciones
necesarias para que la bacteria pueda utilizar su enzima lisina descarboxilasa,
producto de la descarboxilación de la lisina obtenemos cadaverina que es alcalino
y hace vuelva a retomar el color inicial.
●
En la parte de arriba del tubo se evalúa la actividad de la lisina Desaminasa, la
bacteria está haciendo desaminación de la lisina, obteniendo ácido carbónico que
aprovecha las sales de hierro que tiene el medio y se mezcla con el oxígeno y las
sales dando lugar a un color rojo
●
Fundamento:
C: K/K
1: K/A descarboxila la lisina, solo fermentación de la glucosa
2: R/A, Desaminación de la lisina y la fermentación de la glucosa
3: K/K, H2S - La bacteria descarboxila la lisina
4: K/A descarboxila la lisina, produccion de H2S;
AGAR MAC CONKEY:
● Medio selectivo (Cristal violeta y sales que inhibe a los gram positivos o no
entericos) y diferencial (lactosa)
●
ph: Rojo neutro
●
Tiene cristal violeta
●
Fermentación de la lactosa: Colonias fucsias
●
No fermentadoras de la lactosa colonias incoloras de color del medio
●
Se puede ver un color amarilloen las colonias, como no puede utilizar la
glucosa estas bacterias requieren una fuente de energia y utilizan la
peptona del medio, dando como producto el amoniaco que hace que el
medio se vuelve alcalino y por el rojo neutro se pongan de un color
amarillo. Salmonella, shiguella, proteus utiliza la peptona del medio y eso
lo alcaliniza y hace que vire a amarillo
HE(Hektoen Enteric Agar):
●
Es un medio selectivo (sales biliares) y diferencial (lactosa, sacarosa, salicina,
citrato de amonio y triosulfato)
●
Indicador de pH: Azul de bromotinol Fucsina ácida y el citrato de amonio
●
Precipitado negro en presencia de H2S
●
Colonias
-
fermentadoras son amarillos: Cuando fermenta los carbohidratos,
productofinal serian acidos que reaccionan con la fucsina, Azul de
bromotinol y hace que se formen las colinias amarillas
●
●
no fermentadoras
Shigella
-
Sin producción de H2S
-
Colonias verdes
Salmonella
-
Producción de H2S
-
Colonias con puntos negros
XLD (XYLOSE LYSINE DESOXYCHOLATE AGAR)
●
Medio selectivo (desoxicolato de sodio) y diferencial(sacarosa, xilosa, lactosa,
lisina y tiosulfato de sodio ):
-
el desoxicolato de sodio inhibe m.o.
-
tiosulfato de sodio y citrato de amonio férrico detectan H2S
●
pH: rojo de feno
●
Microorganismo fermentador
●
La xilosa la utilizan todas las enterobacterias, pero shigella no la fermenta
●
Shigella: No fermenta xilosa(es la única de las enterobacterias que no fermenta
xilosa), colonias rojas, transparentes o del color del medio
●
Salmonella: Fermenta xilosa, descarboxila la lisina producen cadaverina lo que
hace que se vean unas colonias fucsias con un punto negro (Produccion de H2S)
como ojitos de pescado, produce H2S tiene la enzima tiosulfatasa
¿Cómo empiezo a identificar una bacteria?
Muestras: pueden ser variadas (Orina) , siempre llegan en heces fecales
En el Gram verificamos si son bacilos Gram negativos, catalasa +, oxidasa -,
nitratos Se mira sin son fermentadoras o no
Se siembra en agar macConkey o agar sangres
FAMILIA Enterobacteriacea
Escherichia coli
●
●
Fuerte y rápida fermentadora
EMB: fermenta la lactosa Produce gran cantidad de ácido que se combinan con
eosina y azul de metileno dando colonias de verde brillantes, las colonias no
fermentadoras se ven del color del medio, Shiguella se ve como un ojo de pescado
●
SS: Selectivo y diferencial, Shigella
●
Mac Conkey: Fermentadora de lactosa, colonias rosadas
●
XLD: colonias de amarillas a rojo amarillentas
Salmonella spp
Cuadros Clínicos: Fiebre tifoidea, septicemia, gastroenteritis infecciosa
Mac Conkey: No fermentadoras de lactosa
Agar Sangre:
Klebsiella
Klebsiella pneumoniae
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La única no móvil
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Utiliza las sales como fuente de energía citrato y malonato positivo
Klei
Enterobacter cloacae
●
Colonias grandes y chiclosas
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Es no movil
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Microbiota estomago, tambien en agua, tierra y plantas
Citrobacter ssp
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fermentador lento
Serratia marcescens
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Tiene la facilidad de crecer en cualquier medio de cultivo creando un
pigmento rojo-naranja llamada PRODIGIOSINA
Enterobacterias no fermentadoras
Serratia es fermentadora lenta
Proteus
● Movimiento swarning
Baterías
TSI: K/A H2S +
Edwarsiella tarda
Tubo 3: Lia K/A Proteus vulgaris
Morganella morganii
API 20 E
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https://www.quios.com.co/wp-content/uploads/2017/05/API-20E-FT.pdf
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Llenar el tubo y la cupula en las CIT, VP y GEL
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Par ADH, LDC, ODC, H2S, URE crear atmosfera de anaerobiosis con aceite de
parafrina
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Adicion de reactivos
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Prueba TDA: agregar una gota del reactivo TDA. Un color marrón-rojizo indica
una reacción positiva que se anotará en la hoja de resultados.
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Prueba IND: agregar 1 gota del reactivo JAMES. Un color rosado que se
difumina en toda la cúpula indica una reacción positiva, que se debe anotar en la
hoja de resultados.
-
Prueba VP: agregar una gota de los reactivos VP 1 y VP 2. Esperar un mínimo de
10 minutos. Un color rosa o rojo indica una reacción positiva que se anotará en la
hoja de resultados. Una débil coloración rosa que aparece después de 10 minutos
debe ser considerada como negativa.
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Prueba 21: Oxidasa
Agares
Agar Mac Conkey
SS:
XDL: