¿Qué es la Biotecnología? La Biotecnología, incluye cualquier técnica que utilice organismos vivos (o parte de ellos) para obtener o modificar productos, mejorar plantas y animales, o desarrollar microorganismos para usos específicos. La biotecnología está dividida en diferentes ramas, ciencia y tecnología con conocimiento. Organismos y células, organelas, moléculas. Para hacer productos útiles y para resolver problemas. Diferencia de la biotecnología tradicional de la moderna. En la Biotecnología tradicional, No se utilizan técnicas de manipulación del ADN, Utilización de organismos vivos para la producción de bienes o servicios. Surge nuevas áreas del conocimiento: nace la microbiología, inmunología, la bioquímica y la genética. Biotecnología moderna Se utilizan las técnicas de manipulación del ADN de los organismos. Utiliza técnicas que en su conjunto se denomina ingeniería genética, para modificar y transferir los genes de un organismo a otro. Surge a paso de la biotecnología de laboratorio a una biotecnología industrial. Clasificación de la Biotecnología por colores o sectores. Biotecnología blanca Se utiliza en la Industria Realización de nuevos y mejores productos que sean menos contaminantes. Ejemplo: mejoras de procesos industriales, bioprocesos, bioplásticos, bioenergía. Biotecnología gris Se utiliza en el Ambiente Disminuye y contrarresta los efectos de la contaminación en el medio ambiente. Ejemplo: biorremediación, limpieza de contaminación. Biotecnología verde Se utiliza en el Sector agrícola Producir o modificar una planta Ejemplo: soja transgénica, mejoramiento de plantas, biofertilizantes. Biotecnología marrón Se utiliza en Animales Mejoramiento genético vacuno Ejemplo: desarrollar y producir fármacos, vacunas y mejoramiento animal. Biotecnología azul Es la Marina Preservar y restaurar la variedad de especies y usar especies para desarrollar nuevas medicinas Ejemplo: cosméticos. Biotecnología violeta Se utiliza en Bioseguridad y propiedad intelectual Analiza el marco jurídico e institucional de los procesos y aplicaciones de los resultados de la biotecnología. Ejemplo: bioseguridad. Biotecnología roja En Medicina Crear productos farmacéuticos, antibióticos y vacunas Ejemplo: terapia genética, diagnósticos, vacunas, huella genética. Biotecnología dorada En Bioinformática y nanotecnología Comprender la expresión y función de los genes y de las proteínas, mediante herramientas computacionales e información tecnológica Ejemplo: nanorobots y nanopartículas. Biotecnología amarilla Es la Alimentaria Aumenta la producción y procesamiento de nuevos alimentos y bebidas Ejemplo: uso de enzimas para la producción y procesamiento de los nuevos y mejores alimentos. Cuestionario – Fundamentos de la Biotecnología 1. ¿Qué es la célula? La célula es la unidad estructural de los seres vivos. Sean bacterias, amebas, espermatozoides o neuronas, las células están formadas por agua, iones inorgánicos y moléculas orgánicas (proteínas, carbohidratos, lípidos y ácidos nucleicos). Todas ellas presentan una membrana plasmática que separa el citoplasma del medio externo y permite el intercambio de moléculas entre ambas. 2. ¿Cómo se clasifican las células? ¿Qué las diferencia? Las células se clasifican en procariotas y eucariotas. Células procariotas Se encuentran exclusivamente en el Reino Monera Estas células son pequeñas y se multiplican rápidamente. No posee núcleo Presenta a la información genética dispersa en el citoplasma en forma circular. Células eucariotas Se encuentra en los cuatro Reinos restantes (Protista, Fungi, Plantae y Animalia. Estas son dos veces más grandes que las procariotas. Posee un núcleo bien definido y delimitado por una membrana celular. Presenta a la información genética dentro del núcleo organizada en cromosomas. 3. Similitudes y diferencias entre célula vegetal y animal. diferencias Célula vegetal Presenta una pared celular que rodea a la membrana plasmática. Contiene cloroplastos. Poseen vacuolas de gran tamaño. No poseen centriolos ni lisosomas. Célula animal No presenta pared celular. No posee cloroplastos Posee vacuolas de tamaño reducido. Poseen centriolos y lisosomas. Similitudes Una de las principales semejanzas o similitudes entre estos dos tipos de células es que son las unidades morfológicas y funcionales básicas. Tanto las células vegetales como animales son células eucariotas. Las células eucariotas animales y vegetales, a diferencia de las células procariotas (bacterias y arqueas), poseen un núcleo celular organizado con una cubierta que los protege, orgánulos celulares, citoesqueleto (esqueleto celular) y un genoma organizado y empaquetado en cromosomas, entre otras cosas. Están rodeadas por una membrana plasmática semipermeable que delimita el citoplasma. Tamaño que oscila entre 10 y 100 µm. Las células animales pueden alcanzar las 30 µm, mientras que las vegetales, las 100 µm una micra es una milésima parte de un milímetro). Dado su pequeño tamaño, no pueden ser observadas a simple vista y se requiere la ayuda de microscopios. 4. ¿Por qué la célula es la unidad funcional de un organismo? Es unidad funcional porque todas las funciones que cumple un ser vivo las cumplen sus células. Si un ser vivo se mueve, habla, escucha, ve, se reproduce, etc. Es porque sus células se lo permiten. Las principales funciones de los seres vivos son tres: nutrición, sensibilidad y reproducción. La nutrición es la capacidad de obtener nutrientes del medio y asimilarlos, es decir en transformarlos en sustancias propias. La sensibilidad le permite relacionarse con el medio en el cual se desarrolla captando una gran diversidad de señales (la temperatura, la intensidad de la luz, la humedad, etc.) para poder responder de la manera más adecuada y así poder sobrevivir. La reproducción, finalmente, es la capacidad de dejar descendencia y así permitir que las especies se perpetúen en el tiempo. 5. ¿Cuál es la composición de una célula? Las células contienen cuatro tipos principales de moléculas orgánicas pequeñas: azúcares, ácidos grasos, nucleótidos y aminoácidos. Se las puede encontrar libres en el citoplasma o dentro de alguna organela, vesícula o membrana, donde participan de diferentes procesos. Algunas pueden ser transformadas en moléculas más pequeñas aún, con el fin de que la célula obtenga la energía necesaria para sus funciones. 6. ¿Qué técnicas de laboratorio existen? Explique brevemente cada una de ellas. Técnicas de microscopia que permiten una visualización detalla de las células: Microscopia óptica: se utiliza para observar cortes de tejido, generalmente, esto se fijan y tiñen con colorantes que reaccionan con las proteínas o con los ácidos nucleicos, aumentando el contraste de la imagen. Microscopia de contraste de fase: transforma las diferencias de grosor o la densidad del fragmento observado en diferencias de contraste. Microscopia de fluorescencia: asocia anticuerpos específicos a un reactivo como la GFP para marcar las moléculas y visualizar su distribución en las células. Microscopia confoncal: combina la microscopia de fluorescencia con el análisis electrónico de la imagen, brindando una imagen tridimensional. Microscopia electrónica: permite la observación en un plano de cortes teñidos con sales de metales pesados y la observación tridimensional de la célula (microscopia de barrido). Técnicas físicas como la centrifugación diferencial Permiten separar los componentes celulares para estudios bioquímicos posteriores. Técnicas instrumentales Posibilitan el conteo de células y la separación de poblaciones celulares o de cromosomas. Técnicas de cultivos de células Conjunto de técnicas que permiten el mantenimiento de células in vitro, preservando al máximo sus propiedades fisiológicas, bioquímicas y genéticas 7. ¿A qué hace referencia la controversia de la generación espontánea? La especulación sobre el origen de los microorganismos dividió a los científicos en dos grupos. Por un lado, estaban los que pensaban que los microorganismos provenían de la descomposición de las plantas o animales, es decir, eran el resultado y no la causa de la descomposición. Los que apoyaban esta teoría creían que la vida se generaba a partir de materia no viva, proceso que se denominó abiogénesis y que fue la base del concepto de la generación espontánea. Por otro lado, estaban los que apoyaban la teoría de la biogénesis, que creían que los microorganismos se originaban a partir de otros microorganismos, como ocurre con las plantas y los animales 8. Describa las proteínas y los ácidos nucleicos Proteínas: Las proteínas son las verdaderas obreras de la célula, y también las macromoléculas más abundantes y diversas en estructura y función. Hay proteínas estructurales, como las que le dan forma a la célula, otras transportan oxígeno, como la hemoglobina, otras participan en la respuesta inmune contra los agentes patógenos, como los anticuerpos. Pero muchas son enzimas, proteínas que tienen la capacidad de acelerar (catalizar) reacciones químicas que no podrían ocurrir espontáneamente en la célula. Sin las enzimas, los procesos celulares como la reproducción, conversión de alimento en energía, construcción de macromoléculas, excreción de desechos celulares, entre otros, no serían posibles. Las proteínas son polímeros de aminoácidos. Ácidos nucleicos: Los ácidos nucleicos son polímeros de nucleótidos. Cada nucleótido está compuesto por una base nitrogenada, un fosfato y un azúcar. Hay dos tipos de ácidos nucleicos: el que tiene nucleótidos formados por el azúcar ribosa, es el ARN (ácido ribonucleico), y contiene las bases nitrogenadas A (adenina), G (guanina), C (citosina) y U (uracilo). 9. ¿En qué se basa la teoría celular? Hoy la teoría celular se basa en los siguientes postulados: • Todos los seres vivos están formados por células • Todas las células derivan de otra preexistente • Todas las funciones vitales de los organismos ocurren dentro de las células • Las células contienen la información necesaria para realizar sus propias funciones y las funciones de las próximas generaciones de células. 10.Función y distribución de las estructuras celulares (tabla) 11.Diferencie la estructura y composición del ADN y del ARN. ADN y ARN son los ácidos nucleicos que conforman la base de nuestro genoma. Estas dos biomoléculas determinan lo que somos como especie y en buena medida, lo que somos como individuos. El ácido desoxirribonucleico (ADN) es un ácido nucleico que contiene toda la información genética hereditaria que sirve de “manual de instrucción” para desarrollarnos, vivir y reproducirnos. El ADN se encuentra en el núcleo de las células, aunque una pequeña parte también se localiza en las mitocondrias, de ahí los términos ADN mitocondrial y ADN nuclear. El ADN como ácido nucleico está compuesto por estructuras más simples, las bases nitrogenadas. Estas son 4: Citosina – Guanina – Adenina - Timina. El orden que adoptan estas bases determinará nuestro código genético. El ARN o ácido ribonucleico es el otro tipo de ácido nucleico que posibilita la síntesis de proteínas. Si bien el ADN contiene la información genética, el ARN es el que permite que esta sea comprendida por las células. Está compuesto por una cadena simple, al contrario del ADN, que tiene una doble cadena. 12.¿Qué tipos de células madre existen? ¿A qué hace referencia cada una? Las células madre pueden clasificarse atendiendo a su origen en: células madre adultas (CMA) y células madre embrionarias (CME). Las CMA o multipotenciales, también son conocidas como órgano-específicas, ya que generan los tipos celulares del mismo tejido. Las CME provienen de embriones y actualmente se conocen tres fuentes para su obtención, a saber: a) embriones que no llegaron a utilizarse en los procedimientos de FIV, b) embriones creados de células somáticas por técnicas de transfección y c) líneas de CME ya existentes, las cuales se obtienen de cultivos celulares. Estas últimas son las que han provocado menos controversia en cuanto a factores bioéticos. La diferencia entre las CME y las CMA radica en la capacidad de cada una para generar las líneas germinales de un organismo. Las CMA se derivan principalmente de la MO, mismas que son capaces de generar todos los tipos celulares de la sangre y del sistema inmune; se han aislado también de la piel, tejido adiposo, ligamentos periodontales, membranas sinoviales, hueso trabecular, sistema nervioso, piel, entre otros. 13.¿Qué es la diferenciación celular? Por diferenciación celular se entiende el proceso mediante el cual una célula cambia sus características de un modo permanente (aunque no forzosamente irreversible), de forma que sus descendientes mantendrán esas características o las cambiarán de nuevo si ocurre una nueva diferenciación en otro sentido. 14.Describa señalización química Es el proceso por el que la célula responde a sustancias del exterior de la célula mediante moléculas de señalización que están en la superficie de la célula o dentro de ella. 15.¿De qué se trata la medicina regenerativa? Es la especialidad que aplica principios de la ingeniería y de ciencias de la salud para fabricar sustitos biológicos que mejoren o reemplacen órganos o tejidos que están tan dañados que ya no pueden llevar a cabo sus funciones. La piel y los cartílagos artificiales son ejemplos de tejidos fabricados por la ingeniería, aunque actualmente tienen un uso limitado en pacientes humanos. Enzimas y biotecnología ¿A qué grupo de macromoléculas pertenecen las enzimas? Las enzimas pertenecen a un grupo especial de macromoléculas: las proteínas. ¿Qué función tienen las enzimas? La función que presentan las enzimas es acelerar la velocidad de las reacciones químicas que ocurren dentro de la célula. Por eso se las conoce como “catalizadores biológicos”. Las enzimas ayudan en procesos esenciales, tales como la digestión de los alimentos, el metabolismo, la coagulación de la sangre y la contracción muscular. El modo de acción es específico, cada tipo de enzima actúa sobre un tipo particular de reacción y sobre un sustrato específico. ¿Cómo realiza su función? Para realizar su función, una enzima reconoce una molécula específica, llamada sustrato. Cada enzima une a su sustrato específico en el sitio activo y provoca en él un cambio químico, por el cual se obtiene un producto. El cambio implica la formación o rotura de un enlace covalente. La enzima que participa en la reacción no sufre modificaciones, y puede volver a actuar sobre otro sustrato del mismo tipo. Hay dos modelos sobre la forma en que el sustrato se une al centro activo del enzima: el modelo llave-cerradura y el modelo del ajuste inducido. Descríbalos. El modelo llave-cerradura supone que la estructura del sustrato y la del centro activo son complementarias, de la misma forma que una llave encaja en una cerradura. En algunos casos, el centro activo de la enzima adopta la conformación idónea sólo en presencia del sustrato. La unión del sustrato al centro activo de la enzima desencadena un cambio conformacional que da lugar a la formación del producto. Este es el modelo de ajuste inducido. ¿Qué pasaría en ausencia de enzimas? En ausencia de las enzimas, las reacciones bioquímicas serían extremadamente lentas y la vida no sería posible. Las enzimas pueden aumentar la velocidad de las reacciones en un millón de veces. ¿Debido a qué se desnaturalizan las enzimas? ¿Qué significa que se desnaturalicen? Las enzimas se desnaturalizan debido a los cambios de temperatura y acidez. Las enzimas funcionan correctamente dentro de un rango limitado de pH y temperatura. En condiciones de temperatura elevada o pH alto, una enzima se desnaturaliza. Que una enzima se desnaturalice significa que se rompen las uniones débiles y se desarma la estructura tridimensional de la proteína, perdiendo su capacidad para actuar como enzima. ¿Para qué se usan las enzimas? Las enzimas se utilizan en procesos biotecnológicos tradicionales, como la obtención de yogurt, la producción de cerveza o la fermentación de la uva para fabricar vino. La mayoría de las enzimas industriales se extraen de bacterias y hongos. Entre ellas: Proteasa de bacilo, Amiloglucosidasa, Glucosa isomerasa, Cuajo microbiano, Pectinasa, Proteasa fúngica. Aplicaciones de las enzimas en diferentes áreas de la Biotecnología: Fabricación de alimentos: la fermentación alcohólica es un ejemplo de los procedimientos en que se efectúan alteraciones enzimáticas, tanto cuando se agrega alguna enzima como cuando se añade algún microbio vivo que las contiene (por ej, levaduras). Mediante un proceso fermentativo, se fabrican el yogur, las bebidas alcohólicas, el vinagre, los embutidos, etc. Por ejemplo, la elaboración de vinagre con alcoholes es un proceso enzimático producido por un microbio vivo (Acetobacter acetil). En la fabricación de queso, se utiliza la enzima renina para producir la coagulación de las proteínas de la leche (caseína). Industria textil: en la fabricación de telas, se utiliza un proceso llamado lavado enzimático. En éste, se realiza la bio-preparación del algodón en rama utilizando ciertas enzimas. Entre las enzimas más utilizadas, se pueden mencionar: Proteasas, usadas en el tratamiento de fibras proteínicas (seda y lana); Catalasa, para la eliminación del peróxido de hidrógeno después del blanqueado y antes del teñido; Lipasa, para el desengrasado. Industria de detergentes: las enzimas empleadas en detergentes se constituyen las manchas, facilitando la remoción de los mismos. Entre las enzimas utilizadas, se pueden encontrar: proteasas (degradación de proteínas); amilasas (degradan el almidón, quitando manchas de chocolate y papa); lipasas (rompen los lípidos por hidrólisis); celulosas (utilizadas para restaurar la suavidad y el color de fibras de algodón). Industria del papel: se utilizan las enzimas celulosas para degradar la celulosa, componente principal de la madera. Análisis clínicos: las enzimas se emplean como reactivos estándar en los laboratorios para el diagnóstico de enfermedades (anemias, leucemias, tumores, entre otras). También se usan para la identificación y control de la concentración de drogas o sus metabolitos en la sangre. Productos médicos y farmacéuticos: uno de los productos obtenidos mediante el uso de enzimas son los aminoácidos. Además, las enzimas son utilizadas para la producción de antibióticos semi-sintéticos; por ejemplo, la penicilina semi-sintética. También se utilizan en la producción de esteroides, éstos se utilizan en antiinflamatorios. Generación de energía: otra aplicación biotecnológica de las enzimas es la generación de energía, a partir de fuentes orgánicas. Un ejemplo de biocombustible es el alcohol obtenido por fermentación de material rico en azúcares y almidón, o de residuos forestales. ÁCIDOS NUCLEICOS 1. ¿Qué es el dogma central de la Biología? Consiste en la generación de moléculas de ARN o RNA, para permitir a nivel citoplasmático la síntesis de proteínas, conocido también como proceso de decodificación. El producto final es la creación de proteínas y recibe en nombre de síntesis de proteínas. Éste consiste de dos procesos: transcripción y traducción. La transcripción ocurre en el núcleo. Utiliza el ADN como modelo para crear una molécula de ARN. EL ARN luego sale del núcleo y va a un ribosoma en el citoplasma, donde ocurre la traducción. La traducción lee el código genético en el ARNm y crea una proteína. 2. Completar la siguiente tabla Componentes de los ácidos nucleicos ADN ADN ADN ARN Fosfato Presente Presente Base Azúcar Purinas Desoxiribosa Guanina Adenina Ribosa Guanina Adenina Pirimidinas Citosina Timina Citosina Uracilo Señalar la respuesta correcta ¿Cuál de estos científicos no intervino en las investigaciones que llevaron al conocimiento de ADN? d. Charles Darwin El científico P.A. Levene analizó los componentes del ADN y concluyó que la unidad básica (un nucleótido) estaba compuesto a partir de,: a. una base pegada a un azúcar y que el fosfato también estaba pegado al azúcar. ¿Cuál de estos compuestos no estaba en la lista de los que Levene describió como formando parte del ADN? c. Uracilo ¿Cuál de estos es el azúcar que Levene identificó formando parte del ADN? c. desoxirribosa Las hebras que forman el ADN son: b. complementarias Cuando de un lado de la molécula de ADN se encuentra A (adenina) del otro lado se encuentra: b. T (timina) Las bases de ambas hebras de ADN se unen entre sí por b. puente hidrógeno Biotecnología – Metabolismo Celular Cuadro comparativo entre catabolismo y anabolismo. Catabolismo, Oxidación neta, Degradación de biomoléculas, Producción de energía. Anabolismo, Consumo de energía, Síntesis de biomoléculas, Reducción neta . Metabolismo: Conjunto de reacciones degradativas, mediante las cuales se oxidan las biomoléculas con liberación de energía y poder reductor. Electrones: Plural) Partícula elemental de carga negativa que junto con los protones y los neutrones forma a los átomos y las moléculas. Pueden estar libres. Cuando una molécula los acepta se reduce y al cederlos se oxida. ATP: Molécula transportadora de energía por excelencia. NADH: Molécula transportadora de electrones (reducida). Interviene en la respiración celular, aceptando los electrones provenientes del ciclo de Krebs y cediéndolos en la cadena transportadora de electrones mitocondrial. Anabolismo: Conjunto de reacciones de biosíntesis que ocurren en la célula. Consumen energía y poder reductor. Retro inhibición: Estrategia de regulación enzimática en la que un producto de la vía metabólica inhibe alguna de las primeras enzimas implicadas. Glucosa: Se trata de un azúcar simple, intermediario clave en varias vías del metabolismo. Cuando hay exceso de energía se almacena en forma de glucógeno o almidón. En caso contrario es oxidada para la obtención de energía e la respiración celular aeróbica. Energía: Es la medida del trabajo que un sistema puede entregar. Es absorbida durante reacciones anabólicas o de reducción y liberada en reacciones catabólicas o de oxidación. Fotosíntesis: Proceso de biosíntesis, en el que la energía lumínica es transformada en química durante la síntesis de azúcares a partir de CO2 y agua. Enzimas: Catalizadores biológicos por excelencia. En su mayoría son de naturaleza proteica. Oxidación: Proceso inverso a la reducción. A. El esquema anterior: ¿se trata de una ruta metabólica? ¿Por qué? Claramente el esquema presente hace referencia a una ruta metabólica, siendo el metabolismo un conjunto de transformaciones y reacciones que se produce en la célula por lo que se puede observar que todas las transformaciones que se produce, hasta la síntesis de los tres aminoácidos (lisina, metionina, y treonina) conforman el metabolismo celular. La ruta presentada grafica solo una pequeña porción del metabolismo en su totalidad. B. ¿A qué hacen referencia las flechas continuas del esquema? Las flechas continuas representan a la actividad catálica de las diversas enzimas o sea describen las transformaciones que cada una de las enzimas lleva a cabo, de este modo transforma sustratos en productos. C. ¿A qué hacen referencia las flechas discontinuas del esquema? Las flechas discontinuas representan la regulación negativa que presentan algunas moléculas sobre dos de las enzimas (treonina y lisina) lo que inhibe la actividad catálica de las enzimas lo que provoca el bloqueo en diferentes puntos la ruta. D. Graficar la ruta metabólica abreviada.