بسم هللا الرحمن الرحيم Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist طرق جمع العينات البيولوجية Definitions Definition of toxicology Toxicology can be defined as that branch of science that deals with poisons. Poison can be defined as any substance that causes a harmful effect when administered, either by accident or by design, to a living organism. علم السموم يمكن تعريفه بأنه ذلك الفرع .من العلوم التي تتعامل مع السموم السم يمكن تعريفها بأنها أي مادة تسبب إما عن طريق،تأثير ضار عندما تقدم الي كائن،الصدفة أو عن طريق العمد .حي What is toxicant? The term “Toxicant” refers to toxic substances that are produced by or a by product of human activity What is toxin ? The term of “toxin” refers to toxic substance that are produced naturally. Dose The amount of chemical entering the body كمية من المادة الكيميائية التي تدخل الجسم This is usually given as mg of chemical/kg of body weight = mg/kg وعادة ما يعطى على هذا النحو ملغ من مادة / كجم من وزن الجسم = ملغ/ كيميائية كغ The dose is dependent upon الجرعة تعتمد على التركيز البيئي * The environmental concentration * The properties of the toxicant * The frequency of exposure تواتر التعرض * The length of exposure مدة التعرض * The exposure pathway مسار التعرض الخصائص السمية Lethal dose 50 Def: the dose required to kill 50% of a population under stated conditions vary from one organ to another as well as with age, genetics, gender, diet, physiological condition, or the health status of the organism. من العدد٪50 الجرعة المطلوبة لقتل .المعرض للمادة تحت نفس الظروف تختلف من عضو إلى آخر وكذلك مع تقدم العامل الوراثي والجنس والنظام،العمر أو الحالة، والحالة الفسيولوجية،الغذائي .الصحيةللكائن الحي Dose Lethal dose Laboratory in toxicology Laboratory in toxicology Clinical laboratory tests that indicate the effects or presence of drugs can be useful in the emergency evaluation of the patient with an overdose. However, the majority of toxicologic diagnoses and therapeutic decisions are made on the basis of clinical findings, even though advances in technology have provided the potential ability to measure many toxins. Medical tests can be categorized as belonging to one of three types: monitoring, diagnostic testing, and screening. الفحوصات المخبرية السريرية التي تشير إلى آثار أو وجود أدوية يمكن أن تكون مفيدة في تقييم حاالت الطوارئ لمريض الجرعة .الزائدة يتم إجراء معظم التشخيصات، ومع ذلك سمية والقرارات العالجية على أساس على الرغم من التقدم،النتائج السريرية في التكنولوجيا وفرت القدرة المحتملة .لقياس العديد من السموم ويمكن تصنيف االختبارات الطبية على أنها :تنتمي إلى واحدة من ثالثة أنواع ،)الرصد(متابعة قياس األدوية العالجية والفرز (اختبار،واالختبارات التشخيصية .)الموظفين Screening tests must have good sensitivity (finding all cases) if they are to detect the test condition in a low-prevalence situation. يجب أن تكون اختبارات الفحص لديها حساسية جيدة (العثور على جميع الحاالت) إذا كانت للكشف عن حالة في .الوضع المنخفض االنتشار Non specificity arising from the screening tests can be corrected with subsequent, more specific testing. غير الخصوصية الناشئة عن هذه باختبار،ًالفحوصات يمكن تصحيحها الحقا .أكثر تحديدا TYPE OF MEDICAL APPLICATION PURPOSE PRE SELECTION of POPULATION PRIOR PROBABILITY OR (PREVALENCE ) OF TEST CONDITION PRIMARY ATTRIBUTE REQUIRED OF TEST TOXICOLOGI C EXAMPLE Monitoring Measure change Yes 85%–100% Precision TDM Diagnostic Categorize, confirm Yes 30%–85% Specificity* Tox “screen” Screening Find No 0%–30% Sensitivity Employee drug testing نوع التطبيق الطبي الهدف الختيار المسبق من السكان إحتماالت مسبقة عن االختبار السمة األساسية المطلوب من االختبار مثال متابعة قياس التغير نعم 85%–100% الدقة متابعة قياس األدوية العالجية تشخيص التصنيف و التأكيد نعم 30%–85% النوعية فحص السموم 0%–30% حساسية اختبار الموظفين فحص(الغربلة) البحث و التفتيش ال Uses of laboratory in toxicology TDM Occupational tests diagnosis of overdose Screening tests )DOA( post mortem work The techniques for detecting the presence of drugs include a variety of : spectrometric techniques immunoassays chromatographic methods chemical tests Spectrometric assays may require a chemical reaction (direct or enzymatic) that converts the target drug into a light-absorbing species. These assays were commonly used in the distant past for the routine determination of barbiturates, acetaminophen, salicylates, quinidine, methaqualone, and chlordiazepoxide. Still in use today are the spectrometric assays for carboxyhemoglobin, methemoglobin, and cyanide. Immunoassays Immunoassays are available for rapid identification of specific drugs in urine and for quantitation of drugs in serum. Most immunoassay methods are easily adapted to automated analyzers. Any immunoassay depend on the ability of a drug-specific antibody to bind to either labeled drug (which may be bound to a fluorescent molecule, to an enzyme, or attached to a solid matrix) or to the free drug in a sample. Immunoassay techniques are available with a variety of analytic end points based on aggregation-light transmission, enzyme product formation, fluorescent polarization, and other principles. The most common immunoassay techniques used for the detection of drugs are the enzyme immunoassay fluorescent polarization immunoassay, and immunoaggregation assay. Chromatographic assays Chromatographic assays are widely used in emergency toxicology because a large number of drugs can be detected on a single chromatogram. Sensitivity is adequate for detecting the presence of many common pharmaceuticals at concentrations seen in overdose. For most chromatographic procedures, drugs first must be extracted from serum or urine. There are three general types of chromatography used in toxicological analyses thinlayer chromatography gas chromatography High-performance liquid chromatography(HPLC) In thin-layer chromatography (TLC), extracted drugs are dried onto silica gel–coated plates. Gas chromatography (GC) requires that the extracted drug be volatile at the temperatures inside the GC column (80° C to 300° C). High-performance liquid chromatography (HPLC) is similar in many respects to TLC. In thin-layer chromatography (TLC), extracted drugs are dried onto silica gel–coated plates. Gas chromatography (GC) requires that the extracted drug be volatile at the temperatures inside the GC column (80° C to 300° C). High-performance liquid chromatography (HPLC) is similar in many respects to TLC. Thin-layer chromatography Methods of collection of biological samples INTRODUCTION The pre-analytical phase for samples collected for the analysis of therapeutic drugs and toxins is as critical as the analytical phase. One of the most important aspects to this phase is the knowledge of the time at which the sample was collected and its relationship to the time of dosing or ingestion. These pieces of information are absolutely necessary for interpretation of the results. In addition, samples must be collected using the proper devices and processed or stored under conditions that minimize alterations to the drug concentration. خطوات ماقبل تحليل العينة حرجة .و مهمة كتحليل العينة بالضبط واحدة من أهم هذة الخطوات هي معرفة وقت سحب العينة وعالقته بالحدث التي تسحب من .أجله العينة ً هذة المعلومات مهمة جدا لتفسير النتيجة تفسير مناسب و .صحيح باإلضافة لذلك يجب أن يكون جمع العينة باألجهزة و المعدات المناسبة و تعالج و تخزن بالطريقة المناسبة التي ال تؤثر .على نسبة المادة المراد قياسها INTRODUCTION Much focus is placed on the analytical portion of drug testing. يتم وضع الكثير من التركيز على الجزء .التحليلي من اختبار األدوية و أن المرحلة ما قبل التحليل غالبا ما Unfortunately, this means that the pre-analytical -يتم التقليل من شأنها أو حتى نسيان phase of the process is often downplayed or even حتى واحد يقضي ساعات،وهذا هو forgotten—that is, until one spends hours استكشاف األخطاء وإصالحها و يتوقع troubleshooting what seems to be an analytical .أن المشكلة في التحليل فقط problem only to trace the issue back to an earlier step in the process. وتشمل هذه المشاكل القضايا حاويات،المرتبطة بتوقيت جمع العينة These problems include issues associated with the .العينات ومعالجتها وتخزينها timing of sample collection, sample containers, processing, and storage. التوثيق الصحيح لتاريخ العينة ، وطريقة جمع ونقل وتخزين،(االمنشأ Proper documentation of the history of the sample .وما شابه ذلك) أمر ضروري (origin, mode of collection, transport, storage, and the like) is essential. INTRODUCTION Whole blood, plasma (the fluid obtained on centrifugation of البالزما أو المصل، الدم anticoagulated whole blood), or serum (the fluid remaining تستخدم على نطاق واسع .في العمل السريري when blood has clotted) are widely used in clinical work. This is because not only is blood relatively easy to collect, but also a quantitative analysis can often give useful information as to the magnitude of exposure and hence the severity of poisoning. Excretions (exhaled air, urine) or secretions (saliva, bile) are often less useful as regards interpretation of quantitative data, but can be very useful in qualitative work. هذا ليس فقط ألن الدم سهل ولكن، نسبيا في جمع عيناته أيضا يمكن لتحليله الكمي في الغالب ان يعطي معلومات مفيدة بالنسبة لحجم التعرض .وبالتالي شدة التسمم البول) أو، اإلفرازات (هواء الزفير والصفراء) وغالبا ما،(اللعاب تكون أقل فائدة فيما يتعلق ولكن،بتفسير البيانات الكمية يمكن أن تكون مفيدة جدا في .العمل النوعي INTRODUCTION Postmortem specimens العينات بعد الوفاة هي Postmortem specimens are a special problem because, ألنها بشكل،مشكلة خاصة generally, information on the analyte concentration in blood at مطلوب معلومات عن،عام ت وق تركيز المادة في الدم في the time of death is required. Postmortem blood concentrations may not accurately reflect perimortem blood concentrations for several reasons. .الوفاة قد ال تعكس تركيزات الدم بعد الوفاة بدقة تركيزات الدم ما .قبل الوفاة لعدة أسباب Haemolysis is common, for example, whilst haemostasis may على،انحالل الدم هو الشائع lead to changes in the cellular composition of the ‘blood’ being في حين تخثر،سبيل المثال الدم قد يؤدي إلى تغيرات في sampled. ."التركيب الخلوي ”للدم There is also the possibility of contamination during collection, وهناك أيضا إمكانية التلوث أثناء مع، على سبيل المثال،جمع for example, with stomach contents, and of leakage of analyte من والتسرب،محتويات المعدة from adjacent tissues. .األنسجة المجاورة The leakage of intracellular potassium into plasma, which begins soon after death, is such an example. تسرب البوتاسيوم داخل التي تبدأ،الخاليا في البالزما هو،في وقت قريب بعد الموت مثال على ذلك Health and safety Always keep reagent bottles tightly capped. الكواشف دائما الزجاجات .تغطى بإحكام Always have adequate ventilation whenever volatilization takes place, eg:Opening a bottle, heating a substance or in use of organic solvent. أن يكون دائما التهوية الكافية على،كلما يأخذ التطاير مكان ،سبيل المثال فتح زجاجة تسخين مادة أو في استخدام .المذيبات العضوية Health and safety Always label the container before filling it. تسمية دائما الحاويات قبل .الملئ Always report defective cords ,hotplates, or other electrical equipments ,so that proper repair ، تقرير دائما األشياء المعيبة or replacement can be made and short circuit or المعدات أو ،سخانات fire prevented. بحيث،الكهربائية األخرى Always use aseptic technique and special care when handling contaminated or infectious samples. إصالح أو االستبدال بالسليم الماس لتالفي بسرعة .الكهربائى أو النار تقنيات استخدام دائما التعقيم والحذر خاصة عند التعامل مع العينات الملوثة أو .المعدية Health and safety Sample handling should be performed with due attention to preventing droplets splashing into the eyes and minimizing aerosol formation (wear eye protection, perform mixing and other procedures in a fume cupboard or microbiological safety cabinet, and always use either sealable centrifuge tubes or a centrifuge with sealable rotors). يجب أن يتم التعامل مع العينة بإيالء االهتمام الواجب لمنع قطرات الرش في العينين وتقليل تكوين الرزاز الجوي نفذ،(ارتداء حماية العين االختالط وغيرها من اإلجراءات في خزانة الدخان أو خزانة ،الميكروبيولوجية السالمة ودائما استخدام أنابيب الطرد المركزي محكمة الغلق أو جهاز .للطرد المركزي محكم الغلق Screw-capped sample tubes are preferable to those with push-in stoppers as there is less risk of aerosol formation when opening the tube. األنابيب ذات الغطاء القابل للدوران هي أفضل من تلك التي مع سدادات بالدفع في كما أن هناك خطر أقل من تشكيل .الهباء الجوي عند فتح األنبوب Health and safety Biological samples may contain infective agents and must be handled with care, especially if originating from drug abusers, and must always be treated as if they are infective. قد تحتوي على العينات البيولوجية على عوامل ويجب التعامل،معدية خاصة إذا كان،معها بحذر مصدرها من متعاطي ويجب دائما أن،المخدرات تعامل كما لو كانت .عدوى Such staff should be vaccinated against hepatitis B, polio, tuberculosis, and وينبغي تطعيم هؤالء tetanus and possibly other diseases in الموظفين ضد التهاب specific countries. شلل األطفال،B الكبد والسل والكزاز واألمراض ربما غيرها في بلدان .محددة Health and safety Labs should have procedures in place for the use and disposal of chemicals, as well as a safety plan in case of emergency (including a safety shower and eyewash station)., also emergency phone should available. Chemical containers should be properly labeled with the correct chemical name. Flammable liquids should always be kept in special storage containers or a storage room. Putting these types of chemicals in a regular refrigerator can lead to an explosion. يجب أن تعمل المختبرات بإجراءات معتمدة الستخدام والتخلص من فضال عن خطة،المواد الكيميائية السالمة في حاالت الطوارئ (بما في ذلك دش السالمة ومحطة غسل كما ينبغي هاتف الطوارئ،)العين .المتاحة الحاويات الكيميائية ينبغي أن توضع بشكل صحيح مع االسم الكيميائي .الصحيح وينبغي دائما أن تبقى السوائل القابلة لالشتعال في حاويات التخزين .الخاصة أو غرفة التخزين يمكن وضع هذه األنواع من المواد الكيميائية في الثالجة العادية تؤدي .إلى انفجار Collection Many analytical toxicology procedures require collection of blood, urine, stomach contents, and ‘scene residues’ that is, material such tablet or bottles found at the scene of an incident. However, such samples should be retained (4 or −20 ◦C) in case they are needed. Addition of fluoride also helps to protect other labile drugs such as clonazepam, cocaine, and nitrazepam from degradation. The use of disinfectant swabs containing alcohols should be avoided. ، تتطلب العديد من تحليالت السموم جمع الدم " و "بقايا المشهد، ومحتويات المعدة،البول كالزجاجات و األقراص التي عثر عليها في مسرح .الحادث 20- أو4 ينبغي اإلبقاء على هذه العينات، ومع ذلك .درجة مئوية في حالة الحاجة إليها إضافة الفلورايد يساعد أيضا على حماية األدوية . ونترازيبام من االتحلل، الكوكايين،مثل كلونازيبام وينبغي تجنب استخدام مسحات مطهرة تحتوي .على الكحول في جمع العينات Sample requirements for general analytical toxicology Sample Notes Whole blood or 10 mL (lithium heparin or EDTA tube – use fluoride/oxalate if ethanol suspected; plastic tube if paraquat suspected; glass or plastic tube with minimal headspace if carbon monoxide or other volatiles suspected) Plasma/serum 5mL(send whole blood if volatiles, metals and some other compounds suspected Urine 20–50 mL plain bottle, no preservative Gastric contents 25–50 mL plain bottle, no preservative Scene residues As appropriate Other samples Vitreous humour (maximum available, collect separately from both eyes), bile (2 mL) or liver (about 5 g) can substitute for urine in postmortem work. Other tissues (brain, liver, kidney, lung, subcutaneous fat – 5 g) may also be valuable, especially if organic solvents or other volatile poisons are suspected Smaller volumes may often be acceptable, for example in the case of young children على سبيل،قد تقبل أحجام أصغر في كثير من األحيان المثال في حالة األطفال الصغار In whole blood :In postmortem work collect from femoral or other peripheral vein ensuring no contamination from central or cavity blood – collect one portion into 2% (w/v) sodium fluoride and another into a plain tube أو غيرها منfemoral بعد الوفاة جمع من: في الدم األوردة الطرفية ضمان عدم وجود تلوث من الدم المركزي فلوريد الصوديوم وآخر٪2 جمع جزء واحد إلى- أو تجويف في أنبوب عادي في البول عادة العينة الوحيدة المطلوبة لفحص المخدرات ينبغي أن تضاف إذا اشتبهw/v)٪2( فلوريد الصوديوم اإليثانول والدم غير متوفر غسل المعدة، وتشمل القيء:في محتوى المعدة . الخ،) العينة األولى،(تنظيف المعدة ، و حاويات المشروبات، زجاجات أقراص:بقايا المشهد وخاصة،توضع بشكل منفصل تماما من العينات البيولوجية .إذا كان هناك احتمال التسمم بالمواد المتطايرة In urine sample Normally the only sample that is required for drugs of abuse screening. Sodium fluoride (2 %, w/v) should be added if ethanol is suspected and blood is not available In gastric content :includes vomit, gastric lavage (stomach washout, first sample), etc. Scene residues: Tablet bottles, drinks containers, aerosol canisters, and so on – pack entirely separately from biological samples, especially if poisoning with volatiles is a possibility. Collection Time Time is a critical factor in both TDM and toxicology, and its importance and roles repeat throughout discussions of these services. Most commonly, the best window of collection takes place during the 30–60 min preceding a dose when circulating concentrations necessary for the drug to be effective are lowest. Samples collected at this time are referred to as trough samples. When a drug is most effective over a very narrow concentration range and toxicity is a concern, monitoring may be most effective using peak concentrations when maximal concentrations are achieved. الوقت هو العامل الحاسم في كل من مراقبة وأهميته،األدوية العالجية و الكشف عن السموم .واألدوار تتكرر طوال المناقشات لهذه الخدمات -30 وأفضل إطار لجمع يحدث خالل، األكثر شيوعا دقيقة تسبق الجرعة حيث دوران التركيزات60 .الالزمة للدواء تكون فعالة و هي األدنى ويشار إلى العينات التي تم جمعها في هذا .trough samples الوقت عندما يكون الدواء األكثر فعالية على نطاق وتركيز قد يكون الرصد،ضيق جدا وسميته مصدر قلق األكثر فعالية باستخدام تركيزات الذروة عندما يتم .تحقيق تركيزات القصوى Collection Time This type of collection is difficult to control as the time at which peak concentrations are achieved vary with the individual for each drug collected in this manner and may even vary with the formula, dosing route, and co-ingestion of food. Samples are also collected at other points in the dosing cycle, for example, as with the once-daily dosing protocols used for aminoglycoside or vancomycin administration. In these protocols, samples are collected at defined points within the dosing cycle. Some laboratories call these “random” samples because they are neither peak nor trough and the time of collection may vary, but this is an inaccurate use of the term because for the result to be useful, the collection time must be controlled and known—not random. هذا النوع من جمع من الصعب التحكم فيه على مثل الوقت الذي يتم تحقيق تركيزات الذروة تختلف مع بل وربما،الفرد عن كل دواء تم جمعها بهذه الطريقة و الطعام المتناول، الجرعات الطريق،تختلف مع الصيغة .من قبل الشخص يتم جمع عينات أيضا في نقاط أخرى في دورة كما هو الحال مع، على سبيل المثال،الجرعات بروتوكوالت الجرعات مرة واحدة يوميا تستخدم .ألمينوغليكوزيد أو فانكومايسين يتم جمع العينات في نقاط،في هذه البروتوكوالت بعض المختبرات تدعو.محددة وضمن دورة الجرعات trough هذه العينات "عشوائية" ألنهم ال الذروة وال ولكن هذا االستخدام غير،ووقت الجمع قد يختلف الدقيق لهذا المصطلح ألنه بالنسبة للنتيجة تكون . وتخضع لتجيل الوقت وليس عشوائي،مفيدة Documentation Information recorded on the sample container at the time the sample is collected should include the names (first and family or last name), patient/subject/animal number, the date and time of collection, collection site, and the sample type (including a note of any preservative), and any other appropriate information. The date and time of receipt of all specimens by the laboratory should be recorded and a unique identifying number assigned in each case. المعلومات المسجلة على الحاوية عينة وقت جمع العينة يجب أن تتضمن األسم ،)(األول واسم العائلة أو االسم األخير وتاريخ ووقت، الرقم/ المادة/ المريض ونوع العينة (بما في، موقع الجمع،جمع وأية معلومات،)ذلك أي مواد حافظة .أخرى مناسبة ينبغي تسجيل تاريخ ووقت استالم جميع العينات من قبل المختبر ورقم تعريفي .يعين في كل حالة Documentation Name, address and telephone number of clinician/pathologist and/or Coroner’s officer, and address to which the report and invoice are to be sent. الطبيب الشرعي و/ اسم وعنوان ورقم هاتف الطبيب .الجهه التابع لها والعنوان الذي سيرسل اليه التقرير .قد يكون بعد الوفاة (رقم المرجع) من المناسب أيضا A postmortem (reference) number may also be appropriate. ظروف الحادث (بما في ذلك نسخة من تقرير الوفاة .)المفاجئة إن وجد Circumstances of incident (including copy of sudden death report if available). Past medical history, including current or recent prescription medication, and details of whether the patient suffered from any serious potentially infectious disease such as hepatitis, tuberculosis, or HIV. بما في ذلك الحالي أو اخر،التاريخ الطبي الماضي وتفاصيل ما إذا كان المريض يعاني من أي،وصفة دواء مرض قد يكون معدي أو خطير مثل التهاب الكبد الوبائي والسل وفيروس نقص المناعة البشرية من، والوقت المقدر،معلومات عن السبب المحتمل وطبيعة وكمية المادة المحتمل، الموت/ التعاطي .التسمم بها Information on the likely cause, and estimated time, of ingestion/death, and the nature and quantity of any substance(s) implicated. Documentation If the patient has been treated in hospital, a summary of the relevant hospital notes should be supplied to include details of emergency treatment and drugs given, including drugs given incidentally during investigative procedures Note of occupation/hobbies. A copy of any preliminary pathology report, if available. Biological specimens should be stored at 4 ◦C before transport to the laboratory in general. Exceptions to this include hair and nail, which are stable at room temperature. Each specimen bottle should be securely sealed to prevent leakage, and individually packaged in separate plastic bags. ينبغي تقديم،إذا تم عالج المريض في المستشفى ملخص من المالحظات ذات الصلة في المستشفى لتشمل تفاصيل عن العالج في حاالت الطوارئ بما في ذلك األدوية التي أعطيت أثناء،واألدوية إجراءات التحقيق .تدوين الوظائف التي شغلها و هواياته إن وجدت و ان كان،نسخة من أي تقرير تشريح .اولي قبل4 ◦C يجب أن يتم تخزين العينات البيولوجية في .نقلها إلى المختبر بشكل عام والتي هي،استثناءات لهذه تشمل الشعر واألظافر .مستقرة في درجة حرارة الغرفة يجب أن تكون كل زجاجات العينات محكمة اإلغالق وتعبئتها بشكل منفصل،بشكل آمن لمنع التسرب .تماماً في أكياس بالستيكية Post mortem collection In order to maximize the reliability of measurements performed on postmortem blood, it is recommended that من أجل تحقيق أقصى قدر من االعتماد على القياسات التي تجرى على الدم بعد فمن المستحسن أن،الوفاة The interval between death and the postmortem examination is minimized. يتم التقليل من الفترة الفاصلة بين .الموت والفحص بعد الوفاة The body/samples are stored at 4◦C before the examination/after collection. C ◦4 العينات في/ يتم تخزين الجسم . بعد جمع/ قبل الفحص Blood is collected from two distinct peripheral sites, preferably the femoral veins, after tying off the vein proximally to the site of sampling. يتم جمع الدم من موقعين الطرفية بعد، femoral veins ويفضل،متميزة .ريط الوريد قريب من موقع أخذ العينات (فلوريدw/v) ٪2 حافظة [حوالي العينة/ يضاف إلى جزء من عينة الدم . والبول،من وريد واحد يجب أن تسجل في الموقع الدقيق كما ينبغي أخذ،الخذ عينات من الدم وقت العينات و(تقريبا) وقت الوفاة إن .كان معروفا Preservative [about 2% (w/v) fluoride is added to a portion of the blood sample/the sample from one vein, and to urine. The exact site of blood sampling should be recorded, as should the time of sampling and (approximate) time of death if known. CONTAINERS Continuing in the pre-analytical phases of TDM and toxicology, it is important to think about the sample type needed and collection container. Most laboratories have also transitioned from glass tubes to plastic for safety reasons. In postmortem work, the use of disposable hard plastic (polystyrene) Sterilin tubes is recommended. في المراحل ما قبل التحليلية في مراقبة ،األدوية العالجية و الكشف عن السموم فمن المهم أن نفكر في نوع العينة .المطلوبة والحاويات الخاصة لجمع العينات وقد انتقلت معظم المختبرات أيضا من أنابيب الزجاج للبالستيك ألسباب تتعلق .بالسالمة من المستحسن، في تحليالت بعد الوفاة استخدام البالستيك الصلب القابل .للتصرف (البوليسترين) أنابيب CONTAINERS All organ and tissue samples, and any tablet bottles or scene residues, should be placed in separate containers to avoid any chance of cross contamination. If blood has been collected into a syringe, it is essential that the syringe needle is removed and the blood allowed to flow gently into the collection tube in order to prevent haemolysis. وأي، كل األعضاء واألنسجة والعينات يجب أن،زجاجات أقراص أو بقايا المشهد توضع في حاويات منفصلة لتجنب أي .فرصة من التلوث المتبادل فمن، إذا تم جمع الدم في حقنة الضروري أن يتم إزالة إبرة حقنة ويسمح بتدفق الدم برفق في أنبوب الجمع من .أجل منع انحالل الدم CONTAINERS Some laboratories prefer to collect blood for these in gel-barrier tubes gel- بعض المختبرات تفضل لجمع الدم جل barrier tubes Gel-barrier and other materials used in these tubes were found to adsorb many commonly monitored drugs in an unpredictable manner. و غيرها من المواد التيgel-barrier تستخدم في هذة األنابيب وجد انها قد تمتص على سطحها بعض األدوية المراد . قياسها Investigators found the degree of adsorption varied with the amount of drug present, the amount of blood in the tube, the environmental temperature, and the duration of exposure. وجد بالدراسات درجة االمتصاص تختلف مع وكمية الدم في،كمية الدواء الموجودة ومدة، ودرجة الحرارة البيئية،األنبوب .التعرض Because of these observations and studies, most TDM laboratories adopted the use of plain evacuated tubes containing no additives. ، بسبب هذه المالحظات والدراسات اعتمدت معظم المختبرات مراقبة األدوية العالجية و الكشف عن السموم استخدام األنابيب المفرغة العادية التي التحتوي على .أي إضافات CONTAINERS It may seem to be a fairly obvious statement, but lithium heparin should not be used to collect samples for lithium determinations. Heparin too has been known to interfere in drug analysis For example tricyclic antidepressants and paraquat, and aluminium bind to glass. ال ينبغي أن تستخدم الليثيوم هيبارين .لجمع عينات لقرارات الليثيوم الهيبارين أيضا كان معروفا للتدخل في تحليل المخدرات و على سبيل المثال مضادات االكتئاب يجب ربط،ثالثية الحلقات والباراكوات .األلومنيوم على الزجاج CONTAINERS Plastic tubes are thus preferred and are also less likely to shatter than glass, especially if frozen. و يفضل األنابيب البالستيكية وأيضا أقل وخاصة إذا،عرضة للكسر من الزجاج .كانت ستجمد On the other hand, if volatile solvents or anaesthetic gases, for example, are to be analyzed then glass is preferred if available. إذا المذيبات الطيارة أو، من ناحية أخرى هي، على سبيل المثال،غازات التخدير التي سيتم تحليلها يفضل الزجاجية إذا .كانت متوفرة This should be followed by gentle mixing to ensure contact with the anticoagulant if one is being used. وينبغي أن يتبع طريق خلط لطيف لضمان اتصال مع مضادات التخثر في حالة .استخدام واحد PROCESSING AND STORAGE Serum, plasma, and whole blood are complex matrices. We tend to forget that after collection and subsequent processing, the samples are far from static. As the samples are allowed to sit, carbon dioxide is lost and the pH changes. Enzymes present may lose activity or gain activity. Chemical interactions between various endogenous and exogenous chemicals occur between and amongst each other. Recognizing the potential for these and understanding how they impact the stability of a given drug is important. .المصل والبالزما والدم عبنات معقدة الى حد ما والعينات،غالبا بنسى أنه بعد جمع ومعالجة الحقة .هي بعيدة كل البعد عن الثبات يتم فقدان ثاني أكسيد،كما يسمح للعينات للجلوس .الكربون والتغييرات الرقم الهيدروجيني اإلنزيمات الموجودة قد تفقد النشاط أو اكتساب .النشاط التفاعالت الكيميائية بين المواد الكيميائية المختلفة .الداخلية والخارجية تحدث بين بعضها البعض من المهم فهم و ادراك كيفية توفير بيئة الثبات للدواء .المراد قياسه PROCESSING AND STORAGE Biological specimens should be stored at 4 ◦C before transport to the laboratory in general. بشكل عام يجب أن يتم تخزين العينات قبل نقلها إلى4 ◦C البيولوجية في .المختبر Any residual specimen should be kept at −20◦C or below until investigation of the incident has been concluded. يجب أن تبقى أية عينة متبقية في أو أقل حتى يتم االنتهاء من−20◦C .التحقيق في الحادث Exceptions to this include hair and nail, which are stable at room temperature. ، االستثناءات لهذه تشمل الشعر واألظافر والتي هي مستقرة في درجة حرارة .الغرفة PROCESSING AND STORAGE One of the best examples comes from toxicology when cocaine needs to be measured in blood. واحد من أفضل األمثلة في تحليالت السموم عندما يحتاج الكوكايين التي يتم .قياسها في الدم The metabolism of this drug by circulating cholinesterases continues unless fluoride is used to inhibit the process. يواصل عملية التمثيل الغذائي لهذا الدواء ما لم يتمcholinesterases من خالل .استخدام الفلورايد لمنع هذه العملية Solid sodium fluoride (2 %, w/v) may be added to inhibit microbial and some other degradative enzymes. Similarly, interactions between two drugs administered may continue after sample collection. (يضاف لمنع2 %, w/v) فلوريد الصوديوم الجراثيم وبعض االنزيمات التي تساعد على .التحلل قد تستمر التفاعالت بين عقارين، وبالمثل .بعد جمع العينات PROCESSING AND STORAGE With regard to drugs, some compounds such as clonazepam, cocaine, nifedipine, nitrazepam, thiol drugs, and many phenothiazines and their metabolites are unstable in biological samples at room temperature. Exposure to sunlight can cause up to 99% loss of clonazepam in serum after 1 h at room temperature. Covering the outside of the sample tube in aluminum foil is a simple precaution in such cases. وبعض المركبات مثل، فيما يتعلق بالمخدرات ، نترازيبام، نيفيديبين، الكوكايين،كلونازيبام والعديد من الفينوثيازين ونواتج تفاعالتها غير مستقرة في العينات البيولوجية في درجة .حرارة الغرفة التعرض ألشعة الشمس يمكن أن يسبب ما خسارة كلونازيبام في مصل٪99 يصل الى . ساعة في درجة حرارة الغرفة1 الدم بعد تغطية السطح الخارجي ألنبوب العينة برقائق األلومنيوم هو التصرف الوقائي .البسيط في مثل هذه الحاالت PROCESSING AND STORAGE Guidance on freezer storage of samples Do not freeze whole blood if plasma or serum is to be analyzed Ensure that labelling is waterproof Ensure tubes are tightly sealed and well filled, but do not overfill tubes, especially glass tubes Keep a record of freezer contents Keep a continuous record of freezer temperature. Fit an alarm in case of freezer failure توجيهات بشأن التخزين المجمد للعينات إذا كان البالزما أوwhole blood ال تجمد المصل سيتم تحليلها ضمان وضع العالمات مقاومة للماء ضمان األنابيب و هي مغلقة بإحكام ، ولكن ليست مليئة بافراطا،ومليئة جيدا وخاصة األنابيب زجاجية االحتفاظ بسجل لمحتويات الثالجة االحتفاظ بسجل المستمر لدرجة حرارة .الثالجة مع التسجيل المستمر تجهيز إنذار في حال توقف الفريزر Clinical sample types Clinical samples can be divided into: blood and related fluids body fluids other than blood :ويمكن تقسيم العينات السريرية إلى الدم وسوائل ذات الصلة سوائل الجسم األخرى غير الدم excretory fluids/residues البقايا/ االفرازات السائلة other clinical specimens العينات السريرية األخرى Clinical sample types When death has occurred in hospital and poisoning is suspected, any residual antemortem specimens should be obtained as a matter of urgency from the hospital pathology laboratory (not only chemical pathology and haematology, but also immunology, transfusion medicine, and virology departments may be a source of such specimens) and submitted for toxicological analysis in addition to postmortem specimens. Note that the availability of ante- or perimortem specimens does not negate the need to collect postmortem specimens عندما حدوث الموت في المستشفى ويشتبه ينبغي الحصول على أي عينات ما فبل،التسمم الوفاة المتبقية كمسألة مهمة من مختبر علم األمراض في المستشفى (وليس فقط الباثولوجيا ولكن أيضا علم المناعة،الكيميائية وأمراض الدم ويمكن أن تكون أقسام علم،والطب نقل الدم الفيروسات مصدر هذه العينات) وتقدم لتحاليل .السموم باإلضافة إلى عينات ما بعد الوفاة الحظ أن توافر العينات قبل الوفاة ال ينفي تماما .الحاجة لجمع العينات بعد الوفاة Clinical sample types 1. Blood and related fluids Arterial blood Venous blood Serum Plasma Blood cells Clinical sample types Blood and related fluids In analytical toxicology, plasma or serum is normally used for quantitative assays. يتم استخدام البالزما، في علم السموم التحليلي .أو مصل عادة الفحوصات الكمية However, some poisons such as carbon monoxide, cyanide and many other volatile organic compounds, lead and other heavy metals, and some drugs, such as chlortalidone, are found primarily in or associated with erythrocytes and thus haemolyzed whole blood should be used for such measurements. بعض السموم مثل أول أكسيد الكربون، ومع ذلك والسيانيد والعديد من المركبات العضوية المتطايرة وبعض،األخرى والرصاص والمعادن الثقيلة األخرى يتم العثور عليها،chlortalidone مثل،األدوية وبالتالي،في المقام األول في كريات الدم الحمراء ينبغي أنhaemolyzed whole blood . تستخدم لمثل هذه القياسات The space above the blood in the tube (‘headspace’) should be minimized if carbon monoxide, solvents, or other volatiles are suspected. وينبغي التقليل من المساحة فوق الدم في األنبوب ('فراغ الرأس') إذا اشتبه أول أكسيد . أو المواد المتطايرة األخرى، والمذيبات،الكربون Clinical sample types Blood and related fluids The immunosuppressives ciclosporin, sirolimus, and tacrolimus are special cases because redistribution between plasma and erythrocytes begins once the sample has been collected and so the use of haemolyzed whole blood is indicated for the measurement of these compounds. ، مثبطات المناعة سيكلوسبورين وتاكروليموس حاالت خاصة،وsirolimus إلعادة توزيعها بين البالزما وكرات الدم الحمراء يبدأ بعد تم جمع العينة وذلك haemolyzed whole يشار استخدام .لقياس هذه المركباتblood Clinical sample types Blood and related fluids Post mortem blood sample In order to maximize the reliability of measurements performed on postmortem blood, it is recommended that: The interval between death and the postmortem examination is minimized. The body/samples are stored at 4 ◦C before the examination/after collection. Blood is collected from two distinct peripheral sites, preferably the femoral veins, after tying off the vein proximally to the site of sampling. Preservative [about 2% (w/v) fluoride is added to a portion of the blood sample/the sample from one vein, and to urine. The exact site of blood sampling should be recorded, as should the time of sampling and (approximate) time of death if known. من أجل تحقيق أقصى قدر من االعتماد على القياسات التي تجرى على الدم : فمن المستحسن أن،بعد الوفاة يتم التقليل من الفترة الفاصلة بين .الموت والفحص بعد الوفاة قبلC ◦ 4 يتم تخزين العينات في . بعد جمع/ الفحص ،يتم جمع الدم من موقعين طرفيين بعد ريط،femoral veins ويفضل .الوريد قريب من موقع أخذ العينات (w/v) ٪2 للحفظ يضاف [حوالي / فلوريد إلى جزء من عينة الدم . والبول،العينة من وريد واحد يجب أن تسجل الموقع الدقيق كما ينبغي،الخذ عينات من الدم )تسجبل وقت أخذ العينات و(تقريبا .وقت الوفاة إن كان معروفا Clinical sample types Blood and related fluids If sufficient sample is obtained, this should be divided between unpreserved and preserved (fluoride) tubes, otherwise the entire sample should be preserved unless there is a possibility of poisoning with fluoride or compounds giving rise to fluoride in vivo, such as fluoroacetate. If only heart or cavity blood is available this should be clearly stated. The value of giving as full a clinical, occupational, or circumstantial history as possible, together with a copy of the postmortem report, if available, when submitting samples for analysis cannot be overemphasized. ، إذا تم الحصول عينة كافية ينبغي أن تكون مقسمة بين أنابيب محفوظةبال (الفلورايد) و ،أنابيب بدون إذا كان المتاح هو القلب أو تجويف دموي ينبغي أن يكون .واضحا ومثبت و مدون الحصول على كامل القصة و الظروف،السريرية والمهنية مع نسخة من،المحيطة ممكن ، إن وجدت،تقرير ما بعد الوفاة عند تقديم العينات للتحليل .ًمهم جدا Clinical sample types Blood and related fluids Not only might this help target the analysis to likely poisons, but also the interpretation of any analytical results may be greatly simplified. Postmortem blood (about 20 mL) for qualitative analysis only should be taken from the heart (preferably right atrium), inferior vena cava, or another convenient large vessel. The precise sampling site must be recorded on the sample tube. The blood should be free-flowing. ليس فقط قد يساعد هذا التحليل ولكن أيضا،الستهداف السموم المرجحة تفسير أي نتائج التحليل يمكن تبسيطها .إلى حد كبير مل) للتحليل20 الدم بعد الوفاة (حوالي النوعي فقط ينبغي أن تؤخذ من القلب الوريد األجوف،)(األذين األيمن ويفضل يجب أن. أو اورده كبيرة أخرى،السفلي تسجل موقع أخذ العينات بدقة على أنبوب .العينة . يجب أن يكون الدم حر التدفق Clinical sample types Anticoagulants for in vitro use Anticoagulant Concentration (mL−1 blood) Comment Lithium heparin 10–20 units General biochemistry Sodium heparin 10–20 units General biochemistry Sodium fluoride (with either EDTA or oxalate) 1–2 mg Glucose (inhibits glycolysis) 6–10 mg General anticoagulant Sodium citrate 3 mg Clotting studies – not recommended for other purposes as the aqueous solution dilutes the specimen EDTA 2 mg Haematology (stabilizes readily oxidized compounds) Clinical sample types Serum When whole blood is allowed to stand (15 min, room temperature) in a plain tube (no anticoagulant) a clot forms that will retract sufficiently to allow serum to be collected. For many analyses serum is preferred to plasma because it produces less precipitate (of fibrin) on freezing and thawing. ، دقيقة15( عندما يسمح للدم أن يترك درجة حرارة الغرفة) في أنبوب عادي (ال للتخثر) وأشكال جلطة من شأنها أن يتراجع بما فيه الكفاية للسماح المصل .التي يتعين جمعها بالنسبة للكثيرين من المخبريين يفضلوا المصل على البالزما ألنها تنتج أقل راسب .) عند التجميد والذوبانfibrin( Clinical sample types Plasma The use of such tubes will invalidate many trace element analyses and may impair analyses for solvents and other volatiles Blood cells To collect erythrocytes, heparinized blood should be centrifuged (2000 g, 10 min), the plasma, buffy coat and top 10% of erythrocytes (mainly reticulocytes) removed, and the remaining erythrocytes carefully washed with isotonic, buffered saline to remove trapped plasma. بالزما استخدام مثل هذه األنابيب الخاصة بالبالزما سوف يبطل العديد من العناصر النزرة ويحلل وربما يضعف تحليالت المذيبات والمواد المتطايرة األخرى خاليا الدم وينبغي طرد الدم، لجمع كريات الدم الحمراء buffy ، والبالزما، دقيقة10 ،heparinized من الكريات الحمراء٪10 وأعلىcoat وكريات،) إزالتهاmainly reticulocytes( الدم الحمراء المتبقية غسلها بعناية مع مخزنة المالحة إلزالة،متساوي التوتر .البالزما المحاصرين Clinical sample types Clinical sample types 2. Urine Urine is useful for ‘poisons screening’ as it is often available in large volumes and may contain higher concentrations of drugs or other poisons, or metabolites, than blood. The presence of metabolites may sometimes assist identification of a poison if chromatographic techniques are used A 50mL specimen from an adult, collected in a sealed, sterile container, is sufficient for most purposes. البول مفيد للتحاليل'السموم الفحصية "كما هو الحال في كثير من األحيان لتوفره بكميات كبيرة وربما تحتوي على تركيزات ،أعلى من المخدرات أو غيرها من السموم .أو تمثيل الغذائي اكثر من الدم وجود نواتج األيض (التمثيل الغذائي) قد يساعد في بعض األحيان تحديد السم إذا chromatographic استخدام تم techniques يتم جمعها في حاوية، مل من البالغين50 و،معقمة محكمة الغلق لمنع التسريب .هي كافية بالنسبة لمعظم األغراض Clinical sample types urine No preservative should be added. The sample should be obtained as soon as poisoning is suspected, ideally before any drug therapy has been initiated. However, some drugs, such as the tricyclic antidepressants (amitriptyline, imipramine, etc.), cause urinary retention, and a very early specimen may contain insignificant amounts of drug. . ال يجب إضافة أي مواد حافظة مثالياً يجب الحصول على عينة بمجرد و ذلك قبل تم البدء،االشتباه بالتسمم .بأي عالج دوائي مثل مضادات، بعض األدوية، ومع ذلك ،االكتئاب ثالثية الحلقات (أميتريبتيلين يسبب،) وما إلى ذلك،إيميبرامين ويمكن أن تحتوي على،احتباس البول مبكرة جدا عينة كميات ضئيلة من .المخدرات Clinical sample types urine Different urine specimens, for example random, early morning, end-of-shift, 24 hour, may be collected in the course of metabolic or other studies. in metabolic studies, it is important to note the time of the beginning and the end of the collection period so that the rate of urine production can be calculated. A random urine sample is a midstream specimen. على سبيل المثال، عينات البول مختلفة نهاية، في الصباح الباكر،عشوائي يمكن جمعها في، ساعة24 ،التحول .سياق التمثيل الغذائي أو دراسات أخرى ، في الدراسات الخاصة بالتمثيل الغذائي من المهم أن نالحظ وقت بداية ونهاية فترة الجمع ذلك و ايضا حساب معدل إنتاج .البول عينة البول العشوائية هي العينة من midstream (التبول عملية منتصف .)specimen Clinical sample types urine Fresh urine is yellow/yellow-green in colour, but on storage in acidic solution the colour changes to yellow/brown and even to dark brown due to oxidation of urobilinogen to urobilin. Crystals, particularly of uric acid and calcium oxalate, may form causing turbidity. Strong smelling poisons such as camphor, ethchlorvynol, and methylsalicylate can sometimes be recognized in urine because they are excreted, in part, unchanged. األصفر/ البول في األصل هو األصفر ولكن عند التخزين في،واألخضر في اللون / المحاليل الحمضية يتغير لون إلى األصفر اللون البني وحتى البني الداكن بسبب .أكسدة يوروبيلينوجين إلى اليوربلين وخاصة حمض اليوريك والكالسيوم، البلورات . قد يسبب عكارة،أوكساالت يمكن في بعض األحيان السموم قوية ،الرائحة مثل إيثكلورفاينول يتم االتعرف عليها فيmethylsalicylate و ، كما هي،البول من خالل الرائحة ألنها تفرز .بدون تغيير Clinical sample types urine Characteristic colorless crystals of calcium oxalate may form at neutral pH after ingestion of ethylene glycol, oxalic acid, or water-soluble oxalates. بلورات عديمة اللون مميزة من أكساالت الكالسيوم قد تشكل محايدة في الرقم حمض،الهيدروجيني بعد تناول جاليكول اإلثيلين . أو االوكساالت الذائبة في الماء،األكساليك The concentrations of many drugs and metabolites, and of some endogenous constituents, will remain the same in acidified urine for over a week at room temperature, and for up to a month at 2–8 ◦C. وبعض، تركيزات العديد من األدوية واأليض سيبقى على حاله في البول،المكونات الداخلية الحمضي ألكثر من أسبوع عند درجة حرارة درجة8-2 ولمدة تصل الى شهر في،الغرفة .مئوية For long-term storage acidified urine can be frozen (−20 ◦C), but it may be necessary to centrifuge the sample to remove any precipitate formed during storage prior to any analysis. على المدى الطويل تخزين البول الحمضي يمكن ) درجة مئوية ولكن قد يكون من20-( تجميده في الضروري تدوير العينة في جهاز الطرد المركزي ا إلزالة أي رواسب تشكلت أثناء التخزين وذلك قبل .أي تحليل Clinical sample types urine Postmortem considerations العينة بعد الوفاة For postmortemwork, if possible, 2×25 mL urine samples should be collected in sterile plastic containers, one with preservative (2 %, w/v fluoride). ينبغي، إذا كان ذلك ممكنا، لعينة ما بعد الوفاة عينة البول مل في حاويات25 × 2 جمع 2 %, ( واحدة مضاف اليها،بالستيكية معقمة .)الفلوريدw/v f only a small amount of urine is available, all should be preserved with fluoride (but see note on fluoride poisoning) in a plain 5 mL plastic or glass tube. وينبغي، و فقط كمية صغيرة من البول هو متاح الحفاظ عليها مع كل الفلوريد (ولكن انظر مل5 المالحظة اال يكون التسمم بالفلورايد) في . من البالستيك أو الزجاج Urine specimens collected postmortem are valuable in screening for drugs or poisons, particularly illicit drugs, and are often used for quantitative ethanol analysis to corroborate the results of a blood analysis. عينات البول التي جمعت بعد الوفاة هي قيمة في الكشف عن األدوية أو السموم والمخدرات وغالبا ما تستخدم للتحليل، غير المشروعة .الكمي لإليثانول لتأكيد نتائج تحليل الدم Clinical sample types 3. Stomach contents This specimen encompasses: Vomit Gastric aspirate Gastric lavage fluid The contents of the stomach at postmortem Stomach wash-out (gastric lavage) is rarely performed nowadays in treating acute poisoning. محتويات المعدة :هذه عينة من الممكن ان تشتمل على قيء شفط من المعدة السائل عند غسيل المعدة محتويات المعدة في تشريح الجثة قليال ما يتم تنفيذ غسيل المعدة في .الوقت الحاضر في عالج التسمم الحاد Clinical sample types Stomach contents However, if a sample of stomach contents is obtained soon after a poisoning episode, large amounts of poison may be present while metabolites are usually absent. When investigating possible poisoning, it is important to obtain the first sample of any lavage fluid because later samples may be very dilute. A representative portion (about 50 mL) without preservative should be taken for analysis. However, all stomach contents should be retained and the volume noted. إذا تم الحصول على عينة من محتويات، ومع ذلك كمية،المعدة بعد وقت قصير من حلقة التسمم كبيرة من السم قد يكون موجودا في حين األيض .عادة ما يكون لم يحدث بعد من، عند التحقيق في احتمال حدوث تسمم المهم الحصول على العينة األولى من الغسيل .ألن العينات الالحقة قد تكون مخففة جدا مل) من50 وينبغي اتخاذ جزء نموذجي (حوالي .دون مواد حافظة للتحليل ينبغي اإلبقاء على جميع محتويات، ومع ذلك .المعدة و تسجيل كميتها Clinical sample types Stomach contents If the blood concentration is difficult to interpret, most notably in postmortem work, it can be helpful to measure the amount of poison present in the stomach. The nature of this sample can be very variable and additional procedures such as homogenization followed by filtration and/or centrifugation may be required to produce a liquid amenable to analysis. Stomach contents are especially useful if poison(s) which are not easy to measure reliably in blood, such as cyanide, have been taken orally. ، إذا كان تركيز الدم من الصعب تفسيره ،وعلى األخص في التحليل بعد الوفاة يمكن أن تكون مفيدة لقياس كمية من .السم الموجود في المعدة طبيعة هذه العينة يمكن أن تكون مختلفة وتحضير إضافي لها مثل التجانس تليها أو الطرد المركزي قد تكون/ الترشيح و .هناك حاجة إلنتاج السائل قابل للتحليل محتويات المعدة هي مفيدة بشكل خاص إذا كان السم او السموم ليست من مثل،السهل قياس درجتها في الدم . اتخذت بالفم،السيانيد Clinical sample types Stomach contents However, great care is needed if cyanide salts or phosphides, for example aluminium phosphide, are thought to have been ingested, particularly on an empty stomach, because highly toxic hydrogen cyanide or phosphine gas may be released due to reaction with stomach acid. Additionally, the presence of these and other volatile materials can lead to cross contamination of other biological specimens unless due precautions are taken. Examination using a polarizing microscope may reveal the presence of tablet or capsule debris. هناك حاجة إلى حذر شديد إذا أمالح، ومع ذلك على سبيل المثال،السيانيد أو الفوسفيدات ، ويعتقد أنه قد تم تناولها،فوسفيد األلمنيوم ألن سيانيد الهيدروجين سام،وخاصة على الريق جدا أو غاز الفوسفين قد ينتج بسبب التفاعل مع .حامض المعدة فإن وجود هذه المواد المتطايرة، باإلضافة إلى ذلك و مواد أخرى ويمكن أن يؤدي إلى التلوث عبر العينات البيولوجية األخرى ما لم تتخذ االحتياطات .الواجبة الفحص باستخدام المجهر قد تكشف عن وجود .أقراص أو كبسوالت او بقاياها Clinical sample types Stomach contents if distinct tablets or capsules are observed, these should be placed in individual containers (e.g. Sterilin tubes). Such items and any plant remains or specimens of plants thought to have been ingested, should be examined separately. The local poisons information service or pharmacy will normally have access to publications or other aids to the identification of legitimate and sometimes illicit tablets/capsules by weight, markings, colour, shape, and possibly other physical characteristics. Identification of such material by reference to a computerized product database may be possible. ينبغي أن، إذا لوحظ أقراص أو كبسوالت متميزة توضع هذه في حاويات فردية (مثل أنابيب Sterilin. يجب فحص هذه البنود و بواقي أي نبات أو عينات من النباتات يعتقد أنه قد تم تناولها بشكل .منفصل التواصل مع خدمة معلومات السموم المحلية أو كبسوالت من حيث/ الصيدلية لتحديد األقراص والخصائص، وعالمات واللون والشكل،الوزن تحديد هذه المواد بالرجوع.الفيزيائية ربما غيرها .إلى قاعدة بيانات قد يكون ممكنا Clinical sample types Stomach contents Sterilin tubes Smells associated with particular poisons in stomach Smell Possible Cause Almonds Cyanide Fruity Alcohols (including ethanol), esters Garlic Arsenic, phosphine Mothballs Camphor or naphthalene Nail-polish remover Acetone, butanone Pears Chloral Sweet Chloroform and other halogenated Shoe polish Nitrobenzene Phenolic (carbolic soap) Disinfectants, cresols, phenols Cloves Oil of cloves Clinical sample types 4. Saliva/oral fluids Whilst not normally considered in emergency clinical or postmortem work, there is much interest in the collection of saliva or oral fluid from live individuals because collection is non-invasive and reflects current drug or alcohol usage. Some drugs, medical conditions, or anxiety, for example, can inhibit saliva secretion and so the specimen may not be available from all individuals at all times. Because saliva is a viscous fluid it is less easily poured or pipetted than plasma or urine – routine dilution with aqueous collection buffer is advocated by some authors to minimize this problem (Cozart collector). Saliva/oral fluids ال يعتبر تحليلها عادة في العمل السريري أو وهناك الكثير،بعد الوفاة في حاالت الطوارئ من االهتمام في جمع اللعاب أو السائل الفموي بشكل فردي حيث يعكس استخدام .المخدرات أو الكحول الحالي على، أو القلق، و ظروف طبية ما، بعض األدوية يمكن أن تمنع إفراز اللعاب وربما،سبيل المثال ال تكون العينة متاحة من جميع األفراد في .جميع األوقات ألن اللعاب هو سائل لزج فسكبة أو سحبة بالطرق العادية أقل سهولة من البالزما أو البول للحدbuffer و ينصح بالتخفيف الروتيني مع .من هذه المشكلة Clinical sample types Saliva/oral fluids If dilution with buffer is performed the dilution must be factored into any quantitative report. يجب أنbuffer إذا تم إجراء التخفيف مع تؤخذ في اإلعتبار التخفيف إلى أي درجة .ويحسب بعد ذلك بضرب الناتج في معامل In healthy subjects, gingival crevicular fluid may constitute up to 0.5% of the volume of mixed saliva: this proportion may be markedly increased in patients with gingivitis. قد يشكل سائل، في االشخاص االصحاء من حجم٪0.5 عنقي اللثة ما يصل إلى هذه النسبة ترتفع بشكل:اللعاب المختلط ملحوظ في المرضى الذين يعانون من .التهاب اللثة Plasma exudate from minor mouth abrasions may also contribute. Therefore, subjects should not brush their teeth or practice other methods of oral hygiene for several hours before saliva is collected. افرازات البالزما من سحجات طفيفة في .الفم تساهم أيضا يجب للمريض ان ال ينظف أسنانه، ولذلك بالفرشاة أو ممارسة أساليب أخرى لنظافة .الفم لعدة ساعات قبل أن يتم جمع اللعاب Clinical sample types Saliva/oral fluids Collection devices for saliva/oral fluids In the Salivette (Sarstedt) a dental-cotton (polyester) roll is chewed for 30–45 s with or without further stimulation. The device is available with or without citrate. The saliva-soaked roll is placed in a container and closed with a plastic stopper. The container is centrifuged (3 min, 1000 g) inside a polystyrene tube. During centrifugation the saliva passes from the dental-cotton roll into the lower part of the tube from whence it is collected. Cellular and other debris are retained at the bottom of the tube in a small sink. السوائل الفموية/ طريقة جمع اللعاب ويمضغ على األسنانSalivette (SARSTEDT) في ثانية مع أو بدون مزيد45-30من القطن (البوليستر) ل .من التحفيز .يتوفر الجهاز مع أو بدون سترات يتم وضع قطعة القطن المتشبعة باللعاب في األنبوبة .وأغلق مع سدادة بالستيكية ) داخل أنبوبg1000 ، دقائق3( يتم طرد الحاوية .البوليسترين أثناء الطرد المركزي يمر اللعاب القطنة من الى الجزء .السفلي من األنبوب من ثم يتم جمعها يتم االحتفاظ بالبقايا وغيرها من الجزء السفلي في األنبوب في جفنة صغيرة Clinical sample types Saliva/oral fluids Clinical sample types Saliva/oral fluids Clinical sample types Saliva/oral fluids Clinical sample types 5. Exhaled air Measurement of concentrations of volatile substances in exhaled (expired) air by infrared or other devices is of course essential in roadside testing for ethanol and valuable in assessing exposure to poisons such as carbon monoxide. The use of these techniques is limited by the need to take breath directly from live subjects or patients. Similarly, collection of exhaled air into either an impervious plastic (Tedlar or Polytetrafluoroethylene (PTFE)bag, or via a special device can facilitate the analysis of a number of volatiles and metabolites via subsequent GC or GCMS analysis. هواء الزفير قياس تركيزات المواد الطيارة في الزفير عن طريق أجهزة األشعة تحت الحمراء أو غيرها هو بالطبع أساسي في االختبار التي تتم على جانب الطريق إلختبار اإليثانول وكذلك في تقييم التعرض .للسموم مثل أول أكسيد الكربون استخدام هذه التقنيات ال تزال محدودة بسبب الحاجة إلى اتخاذ التنفس مباشرة من االحياء يمكن جمع هواء الزفير إلى إما، وبالمثل البالستيك القوي المعالج لهذا الغرض كحقيبة أو عن طريق جهاز خاص يسهل تحليل،Tedlar) الحقةGC عدد من المواد المتطايرة واأليض عبر GC-MS. أو تحليل Clinical sample types Exhaled air special device can facilitate the analysis of a number of volatiles and metabolites via subsequent GC or GC-MS analysis Clinical sample types 6. Cerebrospinal fluid Cerebrospinal fluid Cerebrospinal fluid (CSF) collected via needle aspiration is sometimes used to assess exposure to centrally acting drugs. ) التي يتمCSF( يستخدم السائل النخاعي جمعه عن طريق إبرة أحيانا لتقييم التعرض لألدوية الي تعمل عل الجهاز العصبي .المركزي As with vitreous humour and synovial fluid, CSF is normally within a relatively protected environment, and thus may also provide a valuable sample for corroborative ethanol measurement, for example, in the event that other samples are not available. vitreous humour كما هو الحال مع السائل النخاعي عادة،والسائل الزليلي وبالتالي قد،يكون في بيئة محمية نسبيا ،توفر أيضا عينة قيمة لدعم لقياس اإليثانول في حالة أن عينات،على سبيل المثال .أخرى غير متوفرة Clinical sample types 7. Vitreous humour Samples should be collected from each eye separately, and sodium fluoride preservative (2 %, w/v) added. Care must be taken during sampling because use of excessive suction can cause a significant change in the concentration of several analytes. Vitreous samples may be replaced with isotonic sodium chloride for cosmetic reasons. 8. Synovial fluid Synovial fluid collected via needle aspiration has been used. As with CSF and vitreous humour, collection of synovial fluid may also be helpful in the event of traumatic death or extensive decomposition as it is a relatively protected environment. Vitreous humour والمواد،يجب جمع عينات من كل عين على حدة .٪2( الحافظة فلوريد الصوديوم يجب توخي الحذر أثناء أخذ العينات الستخدام الشفط المفرط يمكن أن يسبب تغييرا كبيرا في تركيز العديد من .التحاليل بكلوريدVitreous humour يمكن استبدال عينات .الصوديوم بحجم متساوي ألسباب تجميلية السائل الزليلي تستخدم األبرةلجمع السائل الزليلي عن طريق الرشف .باإلبرة Vitreous humour كما هو الحال مع السائل النخاعي و جمع السائل الزليلي قد يكون مفيد أيضا في حالة وفيات الحوادث المشوهه أو التحلل الواسع كما انه بيئة محمية .نسبيا Clinical sample types 9. Liver Liver is easily collected postmortem and readily homogenized. It may contain large amounts of drugs and metabolites, and may be the primary specimen submitted for analysis if blood is not available. A portion (10–20 g) of unfixed (unpreserved) wet tissue should be collected. Liver عينات الكبد يتم جمعها بسهولة بعد .الوفاة وهي متجانسة بطبيعتها قد تحتوي على كميات كبيرة من األدوية ويمكن أن تكون العينة األولية،واأليض .المقدمة لتحليل الدم إذا لم يتوفر جرام) من غير20-10( وينبغي جمع جزء .مادةحافظة او معالجة Clinical sample types Liver The sample should be taken from the right lobe if possible to reduce the risk of contamination with bile and because diffusion of poison from the stomach is less likely than in the left lobe. An analysis may, in some cases, help to establish whether acute or chronic exposure has occurred, but sometimes the analysis can do little more than establish exposure in the absence of reliable information to aid in the interpretation of quantitative results. ينبغي أن تؤخذ عينة من الفص األيمن إذا كان ذلك ممكنا للحد من مخاطر التلوث بالعصارة الصفراوية وتلوث العينة من المعدة .و هو في ذلك أقل احتماال من الفص األيسر يساعد على، في بعض الحاالت، التحليل ،تحديد ما إذا حدث التعرض الحاد أو المزمن ولكن في بعض األحيان التحليل و لكن يمكن أن يكون أكثر من مجرد تحديد التعرض من عدمه في غياب المعلومات الموثوقة .للمساعدة في تفسير النتائج الكمية Clinical sample types 10. Keratinaceous tissues (hair and nail) Many metal ions, drugs and their metabolites are sequestered in hair and nail as they are formed, and are not metabolized further. These samples may be useful if chronic exposure is suspected, for example in deaths related to drug abuse (particularly opiates and methadone) where establishing recent drug use is very important, and for poisons that may have been eliminated from other commonly sampled fluids and tissues before sample collection. الشعر واألظافر األدوية، العديد من ايونات المعادن ونواتج تفاعالتهاتعزل و تترسب في وال يتم، الشعر واألظافر كما هي .تمثيلها الغذائي أكثر من ذلك قد تكون هذه العينات مفيدا إذا يشتبه على سبيل المثال،التعرض المزمن في الوفيات المرتبطة بتعاطي المخدرات (وخاصة المواد األفيونية والسموم التي قد تم،)والميثادون القضاء عليها من السوائل واألنسجة .األخرى عينات عادة قبل جمع العينات Clinical sample types hair and nail Hair may also survive longer after burial than other tissues. Head hair (a bunch of hairs the thickness of a pencil, about 100–200 hairs) should be either plucked or tied at the root end with cotton thread and then cut approximately 2 mm from the scalp at the vertex posterior (crown) of the head. Make sure the scissors are level with the scalp and not at an angle. Tying with thread helps preserve the alignment necessary for segmental analysis. وقد يبقى الشعر فترة أطول بعد الدفن و .التحلل من األنسجة األخرى شعر الرأس (حفنة من الشعر سماكة ) الشعر200-100 حوالي،قلم رصاص ينبغي إما التقطه أو تربطه في نهاية الجذر مع خيط من القطن ثم قطع ما ملم من فروة الرأس في2 يقرب من .مؤخرة الرأس (تاج) من رأس تأكد المقص يتساوى مع فروة الرأس .وليس في زاوية الربط مع الحبل يساعد على الحفاظ على المحاذاة الالزمة للحزمة المراد تحليلها او .قطعها The sample should be laid aligned in aluminium foil, with the proximal end clearly identified. Pubic or axilliary hair may be substituted if no head hair remains, or if the head hair has been excessively bleached or permed. Nail clippings may be used to monitor uptake of antifungal drugs such as itraconazole. In postmortem work, whole nails should be lifted from the fingers or toes. ينبغي وضع العينة بمحازاة على رقائق . مع نهاية القريبة محددة بوضوح،األلومنيوم شعر العانة أو االبط قد يكون بديال إذا لم أو إذا كان شعر،يعد هناك شعر الرأس . الرأس قد يتم تبييضها بشكل مفرط ويمكن استخدام قصاصات األظافر لمراقبة امتصاص األدوية المضادة للفطريات مثل .االيتراكونازول ينبغي رفع، في تحليالت ما بعد الوفاة .األظافر كلها من أصابع اليدين أو القدمين This provides an even longer potential window for detecting exposure than hair. However, relatively little is known about the mechanisms of uptake and retention or drugs and metabolites in nail. In addition, the slower growth rate of nail, especially toe nail, as compared to hair makes segmental analysis, and hence interpretation, more difficult. وهذا يعبر حتى عن فترة أطول من الشعر .في الكشف عن التعرض للمادة فإن القليل نسبيا هو معروف، ومع ذلك عن آليات االمتصاص واالحتفاظ بها أو .التمثيل الغذائي لألدوية في األظافر فإن المعدل البطيئ، وباإلضافة إلى ذلك وخصوصا األظافر اصبع،لنمو األظافر بالمقارنة مع الشعر يجعل التحليل،القدم . أكثر صعوبة، وبالتالي التفسير،اقل دقة Protocol for collection of head hair for testing for illicit drugs The ideal sample is collected from the vertex (the crown) of the head by cutting approximately 2 mm from the scalp. Take a sample of hair about the thickness of a pencil (100–200 hairs) Pinch the hair tightly with the fingers and tie with cotton thread at the root end before cutting. جمع شعر الرأس لالختبار على المخدرات يتم جمع عينة مثالية من قمة الرأس (التاج) من الرأس عن طريق خفض . مم من فروة الرأس2 حوالي أخذ عينة من الشعر عن سمك قلم ) الشعر200-100( رصاص قرصة الشعر بإحكام مع األصابع وربطة عنق مع خيط القطن في نهاية الجذر قبل .القطع Cut the sample as close as possible to the scalp, making sure the scissors are level with the scalp. Still holding the sample tightly, align the cut root ends of the sample and carefully place flat on a piece of aluminium foil with the cut root ends projecting about 15 mm beyond the end of the foil. Mark the root end of the foil and fold the foil around the hair and pinch tightly to keep in place. ، قطع العينة أقرب وقت ممكن لفروة الرأس .والتأكد من مقص يتساوى مع فروة الرأس محاذاة، تستمر في مسك العينة بإحكام نهايات قطع الجذر من العينة وبعناية تضعها في مكان مسطح على قطعة من رقائق 15 األلومنيوم مع الجذر المقطوع يبرز حوالي .ملم إلى ما بعد نهاية رقائق األلمونيوم تحديد نهاية الجذر رقائق األلمونيوم ولف رقائق األلمونيوم حول الشعر وقرصة بإحكام .للحفاظ عليه في مكانه Fold the foil again in half lengthwise. Place the sample in a tamperproof envelope. Complete and sign the request form, make insure that the donor also signs if necessary. f there are special instructions that do not appear on the form, but are felt relevant, make a note on a separate sheet and enclose with the sample. طوى رقائق األلمونيوم مرة أخرى في .النصف بالطول . وضع العينة في ظرف غير قابل للتزوير و التأكد أن، تعبئة وتوقيع نموذج طلب .المتبرع قد وقع إذا لزم األمر إذا كانت هناك تعليمات خاصة التي ال ولكنك شعرت ذات،تظهر في النموذج دون المالحظة على ورقة منفصلة،الصلة .وأرفقها مع العينة 11.Bone and bone marrow Bone marrow may be useful in poison identification in exhumations where all soft tissue has degenerated. Bone itself may be useful if chronic poisoning by arsenic or lead, for example, is suspected. Bone and bone marrow قد يكون عينة نخاع العظام مفيدة في تحديد السم عند إعادة استخراج الجثث .حيث تحللت جميع األنسجة الرخوة العظام نفسها قد يكون مفيدا إذا كان مشتبهاً في التسمم المزمن بالزرنيخ أو . وعلى سبيل المثال،الرصاص 12. Tissues Histology specimens are usually collected into a preservative such as formalin (aqueous formaldehyde solution). Such pretreatment must be borne in mind if toxicological analyses are requested subsequently. Samples of tissue obtained postmortem are normally kept at 4◦C prior to analysis. Brain, subcutaneous fat, lung (apex), spleen, and kidney are the most useful; 10–20 g wet weight of unfixed tissue should be collected into separate containers. األنسجة وعادة ما تجمع عينات األنسجة على مواد حافظة .)مثل الفورمالين (محلول الفورمالديهايد المائي يجب أن تؤخذ هذه المعالجة في االعتبار إذا طلب .تحاليل السمية في وقت الحق يتم االحتفاظ عينات من األنسجة التي تم الحصول .قبل التحليلC ◦4 عليها بعد الوفاة عادة في ) الرئة (القمة، الدهون تحت الجلد، الدماغ وينبغي جمع. والكلى هي األكثر فائدة،والطحال غرام من الوزن الصافي أنسجة في حاويات20-10 .منفصلة The specimen should be placed in a specimen jar or nylon bag (volatile substance abuse- or anaesthetic-related deaths) and deep-frozen prior to transport to the laboratory, taking care not to overfill sample containers (overfilled tubes may break when frozen). Spleen is rich in erythrocytes and hence may provide a valuable alternative specimen in which to measure carboxyhaemoglobin saturation if blood is not available. يجب أن توضع العينة في وعاء العينة أو كيس من النايلون (حاالت الوفاة المتعلقة مواد متطايرة) وتحفظ- باستخدام المخدر أو مع عدم،مجمدة قبل نقلها إلى المختبر ملئ حاويات العينات الى اخرها (أنابيب .) مملوء قد تكسر عنددرجة التجمد ، الطحال هو غني في كريات الدم الحمراء وبالتالي يمكن أن توفر عينة بديلة القيمة التي لقياس تشبع إذا الدم غيرcarboxyhaemoglobin .متوفر Integrity Sample Precautions to ensure sample integrity include: Proper sample labeling. Use of tamper-proof containers. Collection of samples such as hair, nail, and femoral blood before opening the body. Proper accompanying documentation. Samples collected for clinical purposes (or even for the coroner) are often not of ‘evidential’ quality, but such samples may be all that is available. DNA testing may be used to establish the origin of samples where there has been concern over sample integrity. االحتياطات الالزمة لضمان سالمة عينة تشمل ما :يلي . وضع العالمات المناسبة للعينة . استخدام حاويات غير قابلة للتزوير والدم الفخذ، واألظافر، جمع العينات مثل الشعر .قبل فتح الجسم . التدوين المصاحب المناسب لكل الخطوات العينات التي تم جمعها ألغراض السريرية (أو حتى للطبيب الشرعي) وغالبا ما تكون ليست ولكن قد تكون هذه العينات،"من نوعية "الثبوتية .كل ما هو متاح ويمكن استخدام اختبار الحمض النووي لتحديد مصدر العينات لو كان هناك قلق على سالمة .العينة Adulterants of DOA The three means used by substance abusers in attempting to avoid giving a positive urine test are dilution, adulteration, and substitution. Chemicals may be added to urine in an attempt to mask a test result, or to destroy the analyte. The chief objective of adulteration is to produce a negative result, but even an invalid test may lead to a second collection, thereby ‘buying time’ for drug and/or metabolites to be eliminated before the second test. There is a large ‘underground’ sale of adulterants. وسائل الثالثة المستخدمة من قبل مدمني المخدرات في محاولة لتجنب اعطاء اختبار البول . والتبديل، والغش،إيجابي هو التخفيف ويمكن إضافة المواد الكيميائية إلى البول في . أو لتدمير تحليلها،محاولة إلخفاء نتيجة االختبار الهدف الرئيسي من الغش هو الحصول على ولكن حتى اختبار غير صالح قد،نتيجة سلبية وبالتالي "شراء،يؤدي إلى المجموعة الثانية أو األيض ليتم/ الوقت”للتخلص من المخدرات و .الجاهزية قبل االختبار الثاني . هناك بيع كبير لهذه المواد Commonly used compounds include household products, such as bleach, vinegar and ammonia, and chemicals that are commercially available via the Internet. Soap and bleach disrupt the screening process and are easily detectable. Nitrite is used to conceal THC metabolites, primarily in GC-MS confirmatory tests, although at low pH values it may also reduce the concentration to below cut-off values in screening tests. Another oxidizing agent, pyridinium chlorochromate, which can be detected by the presence of chromium or pyridine, has been shown to interfere with EMIT assays and in some case. وتشمل المركبات التي تستخدم عادة المنتجات والمواد، مثل المبيضات والخل واألمونيا،المنزلية .الكيميائية المتوفرة تجاريا عبر اإلنترنت الصابون ومواد التبييض تعطيل عملية التحليل .وقابلة للكشف بسهولة في،THC يتم استخدام النتريت إلخفاء األيض المقام األول على الرغم من انخفاض الرقم الهيدروجيني القيم التي قد تقلل من تركيز إلى .أقل من القيم الحدية في اختبارات الفحص pyridinium ، عامل آخر مؤكسد والتي يمكن الكشف عن،chlorochromate وقد تبين أن يتداخل،وجود الكروم أو البيريدين .ويتعارض مع التحاليل في بعض الحاالت mixture of peroxidase and peroxide, has been shown to reduce the concentrations of morphine and codeine in some. It is good practice to check routinely for evasive measures. There are test strips are available that will measure creatinine, nitrite, glutaraldehyde, pH, RD and two oxidants, including bleach and pyridinium chlorochromate, simultaneously. ،peroxidase and peroxide خليط من وقد تبين لنه يحد من تركيزات المورفين والكوديين في بعض الحال ومن الممارسات الجيدة للتحقق بشكل روتيني لكشف الغش في العينات وهناك شرائط االختبار المتاحة التي من ، والنتريت،شأنها قياس الكرياتينين RD ، ودرجة الحموضة،غلوتارالدهيد بما في ذلك مواد،واثنين من األكسدة pyridinium التبييض و . في وقت واحد،chlorochromate Greater supervision (i.e. invasion of privacy) during sample collection may overcome some of these measures, but it is difficult to see how one can defeat those prepared to use a catheter to inject drug-free urine into their bladders prior to testing. اإلشراف اللصيق (أي التعدي على الخصوصية) أثناء جمع العينات قد يتغلب ولكن من،على بعض هذه اإلجراءات الصعب أن نرى كيف يمكن للمرء أن هزيمة هؤالء باستخدام القسطرة لحقن البول خال من المخدرات إلى المثانة من .قبل االختبار Thank you