T.C. ONDOKUZ MAYIS ÜNİVERSİTESİ FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ KOMBU ÇAYI (KOMBUCHA) VE KOMBU ÇAYI ÜRETİM ARTIĞI KARIŞIK MİKROORGANİZMA KÜLTÜRÜNÜN TARIMDA MİKROBİYAL GÜBRE OLARAK KULLANILMA OLANAKLARININ ARAŞTIRILMASI YÜKSEK LİSANS Murat DURMUŞ Toprak Bilimi ve Bitki Besleme Anabilim Dalı Anabilim Dalı : Herhangi Mühendislik, Bilim Programı : Herhangi Program OCAK 2013 SAMSUN T.C. ONDOKUZ MAYIS ÜNİVERSİTESİ FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ TOPRAK BİLİMİ VE BİTKİ BESLEME ANABİLİM DALI KOMBU ÇAYI (KOMBUCHA) VE KOMBU ÇAYI ÜRETİM ARTIĞI KARIŞIK MİKROORGANİZMA KÜLTÜRÜNÜN TARIMDA MİKROBİYAL GÜBRE OLARAK KULLANILMA OLANAKLARININ ARAŞTIRILMASI YÜKSEK LİSANS Murat DURMUŞ (09210254) Tezin Savuma Tarihi : 14 Ocak 2013 Tez Danışmanı : Doç.Dr.Rıdvan KIZILKAYA Ondokuz Mayıs Üniversitesi Fen Bilimleri Enstitüsü Toprak Bilimi ve Bitki Besleme Anabilim Dalında Murat DURMUŞ Tarafından Hazırlanan KOMBU ÇAYI (KOMBUCHA) VE KOMBU ÇAYI ÜRETİM ARTIĞI KARIŞIK MİKROORGANİZMA KÜLTÜRÜNÜN TARIMDA MİKROBİYAL GÜBRE OLARAK KULLANILMA OLANAKLARININ ARAŞTIRILMASI başlıklı bu çalışma jürimiz tarafından 14/01/2013 tarihinde yapılan sınav ile YÜKSEK LİSANS tezi olarak kabul edilmiştir. Başkan : Jüri Üyeleri : Prof. Dr. Nutullah ÖZDEMİR Ondokuz Mayıs Üniversitesi .............................. Prof. Dr. Bilal CEMEK Ondokuz Mayıs Üniversitesi ............................. Doç. Dr. Rıdvan KIZILKAYA Ondokuz Mayıs Üniversitesi ............................. 14/01/2013 Prof. Dr. Recep TAPRAMAZ Enstitü Müdürü iii iv ÖNSÖZ Yüksek lisans öğrenimim boyunca engin bilgi birikimini ve tecrübelerini benden esirgemeyen, çalışmalarımda her zaman yanımda olan ve yakından ilgilenen, tüm sabır, hoşgörü ve yön verici fikirleri ile daima yanımda hissettiğim çok değerli danışmanım sayın Doç. Dr. Rıdvan KIZILKAYA’ ya sonsuz teşekkürleri bir borç bilirim. Öğrenim hayatımda bana sürekli yardımcı olan ve desteğini benden esirgemeyen sayın hocamların Doç. Dr. Orhan DENGİZ’e, Prof.Dr. Nutullah ÖZDEMİR’e, Prof.Dr. Coşkun GÜLSER’e teşekkürlerimi sunarım. Üniversite öğrenimimin en başından beri bana arkadaşça yaklaşan, kendisinden çok şeyler öğrendiğim sayın hocam Yrd. Doç. Dr. Tuğrul YAKUPOĞLU ve Yrd. Doç. Dr. F. Şüheda HEPŞEN TÜRKAY’ a teşekkürlerimi sunarım. Labaratuvar ortamında beraber çalıştığımız değerli arkadaşlarım Aylin ERKOÇAK, Tuba TOPRAK, Vildan IŞILDAK’ a ve hocam Araş. Gör. Elif ÖZTÜRK’e teşekkür ederim. Benim bu günlere gelmemi borçlu olduğum, haklarını ödeyemeyeceğim, tüm imkanlarını seferber eden canım aile üyelerim babam Rufat DURMUŞ, annem Sevinç DURMUŞ, ablalarım Ayşe BERBER ve Nazife YILDIZ’a teşekkürü bir borç bilirm. Tanıştığımız günden beri varlığını her zaman yanımda hissettiğim, sevgi, saygı ve hoşgörüsü ile her daim gülümsememi sağlayan biricik nişanlım Gökçe BAYRAM’ a çok teşekkür ederim. Şubat 2013 Arş. Gör. Murat DURMUŞ v vi İÇİNDEKİLER ÖNSÖZ………………………………………………………………………….. İÇİNDEKİLER………………………………………………………………… ÇİZELGELER LİSTESİ ……………………………………………………... ŞEKİLLER LİSTESİ …………………………………………………………. KISALTMALAR ……………………………………………………………… ÖZET……………………………………………………………………………. SUMMARY…………………………………………………………………….. 1. GİRİŞ ……………………………………………………………………… 1.1 Tezin Amacı…………………………………………………………….. 2. GENEL BİLGİLER ………………………………………………………. 2.1. Kombu Çayı…………………………………………………………….. 2.2. Mikroorganizmaların Tarımda Verimlilik Amaçlı Kullanımı………….. 3. 4. 5. 6. 7. 8. MATERYAL VE YÖNTEMLER….…………………………………….. 3.1 Materyal ……………………………………………………………….. 3.2 Yöntemler …………………………………………………………….. 3.2.1 Sera denemesi………………………………………………….. 3.2.2 Toprakların biyolojik özellikleri…………………….................. 3.2.2.1 Toprak solunumu …………………………………... 3.2.2.2 Mikrobiyal biyomas karbon………………………... 3.2.2.3 Dehidrogenaz aktivitesi……………………………. 3.2.2.4 Katalaz aktivitesi…………………………………... 3.2.3 İstatistiksel analizler…………………………………………… BULGULAR VE TARTIŞMA…………………………………………… 4.1 Deneme Topraklarının Özellikleri……………………………………. 4.2 Denemede Kullanılan Kombu Çayın Özellikleri……………………… 4.3 Kombu Çayı Uygulamasının Buğday bitkisinin verimi üzerine etkisi…………………………………………………………………… 4.4 Kombu Çayı Uygulamasının Toprakların Biyolojik Özellikleri Üzerine Etkisi………………………………………………………..... 4.4.1 Toprak Solunumu……………………………………………. 4.4.2 Mikrobiyal Biyomas Karbon…………………………………. 4.4.3 Dehidrogenaz Aktivitesi……………………………………… 4.4.4 Katalaz Aktivitesi…………………………………………….. SONUÇLAR VE ÖNERİLER …………………………………………….. KAYNAKLAR …………………………………………………………….. EKLER ……….…………………………………………………………….. ÖZGEÇMİŞ …………….………………………………………………… vii Sayfa v vii ix xi xiii xv xvii 1 2 3 4 5 11 11 12 13 14 14 14 14 15 15 17 17 17 19 28 28 30 31 32 35 37 41 59 . viii ÇİZELGE LİSTESİ Sayfa Çizelge 3.1: Toprak Örneklerinin Bazı Özelliklerinin Belirlenmesinde Uygulanan Yöntemler. ............................................................................................ 12 Çizelge 4.1: Sera Denemesinde Kullanılan Toprakların Bazı Fiziksel Özellikleri. .......................................................Hata! Yer işareti tanımlanmamış.7 Çizelge 4.2: Denemede Kullanılan Kombu Çayının Mineral Madde İçeriği. ..... Hata! Yer işareti tanımlanmamış.8 Çizelge 4.3: Kombu Çayında Bulunan Çeşitli Organik Asitler. ....... Hata! Yer işareti tanımlanmamış.23 Çizelge 4.4: Kombu Çayında Bulunan Çeşitli Aminoasitler ............ Hata! Yer işareti tanımlanmamış.4 Çizelge 4.5: Kombu Çayında Bulunan Çeşitli Vitaminler ............... Hata! Yer işareti tanımlanmamış. Çizelge 4.6: Kombu Çayında Bulunan Çeşitl, Çay Polifenolleri .............................. 26 Çizelge C.1: Topraktan Kombuçay Uygulamsına Ait Sonuçlar. .............................. 49 Çizelge C.2: Topraktan liyofilize Atık Mikroorganizmaların Uygulanmasına Ait Sonuçlar ............................................................................................... 50 ix x ŞEKİLLER LİSTESİ Sayfa Şekil 2.1: Mikrobiyal Kültürü İçeren Kombu Çayı (A), Kombu Çayındaki Maya Ve Bakteriler(X400) (B), Ticari Mamül Olarak Kombu Çayı (C)…..…………………………………………………………….. Şekil 4.1: Toprakların Kombu Çayı Uygulamasının Buğday Bitkisinin Verimi Üzerine Etkisi………………………………………………….. Şekil 4.2: Liyofilize Edilen Atık Mikroorganizma Kültürünün Topraktan Uygulanmasının Buğday Bitkisinin Verimi Üzerine Etkisi……………. Şekil 4.3: Topraktan Kombu Çayı Ve Liyofilize Edilmiş Atık Kombu Çayı Kültürü Uygulanmasının Toprak Solunumu Üzerine Etkisi …………. Şekil 4.4: Topraktan Kombu Çayı Ve Liyofilize Edilmiş Atık Kombu Çayı Kültürü Uygulanmasının Toprakların Mikrobiyal Biyomas Karbon İçeriği Üzerine Etkisi…………………………………………………. Şekil 4.5: Topraktan Kombu Çayı Ve Liyofilize Edilmiş Atık Kombu Çayı Kültürü Uygulanmasının Toprakların Dehidrogenaz Aktivitesi Üzerine Etkisi…………………………………………………………………… Şekil 4.6: Topraktan Kombu Çayı Ve Liyofilize Edilmiş Atık Kombu Çayı Kültürü Uygulanmasının Toprakların Katalaz Aktivitesi Üzerine Etkisi………………………………………………………………….. xi 4 19 20 28 30 32 33 xii KISALTMALAR TS MBC KA DHA : Toprak Solunumu : Mikrobiyal Biyomas Karbon : Katalaz Aktivitesi : Dehidrogenaz Aktivitesi xiii xiv KOMBU ÇAYI (KOMBUCHA) VE KOMBU ÇAYI ÜRETİM ARTIĞI KARIŞIK MİKROORGANİZMA KÜLTÜRÜNÜN TARIMDA MİKROBİYAL GÜBRE OLARAK KULLANILMA OLANAKLARININ ARAŞTIRILMASI ÖZET Bu tez çalışmasında, birbirinden farklı fiziksel ve kimyasal özelliklere sahip 2 farklı toprakta sera şartlarında Kombu çayı ve liyofilize atık Kombu çayı kültürü uygulamasının buğday bitkisinin verimi ve topraklardaki biyolojik özelliklerin değişimine etkisinin belirlenmesi amaçlanmıştır. Denemede kullanılan toprak örnekleri; Tekirdağ ilinin Çorlu ilçesinden (Kumlu tın bünyeli toprak) ve Samsun ilinin Bafra ilçesinden (Tın bünyeli toprak) alınmıştır. Denemede organik materyal olarak kullanılan Kombu Çayı, piyasada mamül olarak satılan ürün ve Kombu çayı kültürü ise Samsun ilinde bulunan üretim fabrikasından temin edilmiş, liyofilize edilerek kullanılmıştır. Serada saksı denemesi olarak yürütülen çalışmada her bir saksıya 4 kg toprak konulmuş, topraklara Kombu çayının 0, 10, 20, 30 ml/saksı düzeyindeki dozları ile liyofilize atık Kombu çayı kültürünün ise 0.25, 0.50 ve 0.75 gr/saksı dozları uygulanmıştır. Daha sonra saksılara pandas buğday çeşidi tohumları ekilmiş ve toplam 138 gün süren sera denemesi şeklinde deneme yürütülmüştür. 138. günün sonunda hasat edilen buğday bitkisinin verim durumları belirlenerek her bir saksıdan alınan toprak örneğinde biyolojik analizler (dehidrogenaz aktivitesi, katalaz aktivitesi, toprak solunumu ve mikrobiyal biyomas karbon) yapılarak Kombu çayı ve atık liyofilize Kombu çayının buğday bitkisinin verimi ve toprakların biyolojik özellikleri üzerine olan etkileri belirlenmiştir. Sera denemesi sonunda topraklara uygulanan mamül Kombu çayı ve atık liyofilize Kombu çayı kültürünün buğday bitkisinin verimini artan dozlara bağlı olarak artırdığı, bununla beraber, toprak tekstürüne bağlı olarak değişmekle beraber toprakların biyolojik özelliklerinde de artışların olduğu belirlenmiştir. Kumlu tın bünyeli toprağa yapılan uygulamalarda tın bünyeli toprağa göre toprakların biyolojik özelliklerinde meydana gelen değişmelerin daha belirgin olduğu saptanmıştır. Anahtar kelimeler: toprak, buğday, kombu çayı, enzim aktivitesi, toprak solunumu, mikrobiyal biyomas karbon xv xvi AN INVESTIGATION ON THE POSSIBILITIES OF USING KOMBU TEA (KOMBUCHA) AND MIX MICROORGANISMS CULTURE WHICH ARE KOMBU TEA PRODUCTION WASTE IN AGRICULTURE AS MICROBIAL FERTILIZER SUMMARY This study aimed to investigate effects of the kombucha and lyophilized waste of culture of kombucha on variation of biological characteristics of soil and yield of wheat vegetable by performing two greenhouse experiment on two different soil type which have distinctive physical and chemical properties. The soil samples used for experiment were taken from Çorlu in Tekirdağ (Sandy loamy soil) and Bafra in Samsun (Loamed soil). In the experiment, kombucha was used as an organic material, and culture of kombucha available in the market as a product obtained from a manufacturing plant in Samsun was used by utilizing lyophilization. In the flowerpot experiment performing in the greenhouse, each flowerpot were filled by the weight of 4 kg soil, and the amount of 0, 10, 20, 30 ml/pot of kombucha and 0.25, 0.50, and 0.75ml/pot of lyophilized waste of culture of kombucha were put into the each flowerpot. Then, pandas type of wheat seeds were planted to the pot and were performed as greenhouse experiment lasting totally 138 days. After the 138th day, the effects of kombucha and lyophilized waste of culture of kombucha on the crop of wheat vegetable were analyzed by evaluating yield performance of cropped wheat vegetable. Furthermore, the changes of the biological characteristics of soil resulted in adding kombucha and lyophilized waste of culture of kombucha to the soil were investigated by performing biological analysis (dehydrogenized and catalase activities, microbial biomass carbon and soil respiration) to the soil samples taken from the each flowerpot. As a conclusion of the experiment, it is observed that an increase of the amount of kombucha and lyophilized waste of culture of kombucha resulted in a development of yield of wheat vegetable, and also caused an improvement of biological characteristics of soil which varies depending on the soil texture. Moreover, it is concluded that the improvements of the biological characteristics of soil is more significant for sandy loamy soil than the loamy soil. Key words: soil, wheat, kombucha, enzyme activities, soil respiration, microbial biomass carbon xvii xviii xix xx 1. GİRİŞ Yüksek verim için fazla girdi kullanan tarım sistemleri çevresel problemlere ve doğal kaynakların tükenmesine yol açmaktadır. Entansif tarımın yaygın uygulamalarının zararlı etkilerini azaltmak için, son yıllarda sürdürülebilir tarım ya da organik tarım uygulama olan ilgi artmıştır. Bu sistemlerde üretim, sürdürülebilirliği imkanlı kılan doğayla uyum esasına dayanır. Sentetik kimyasal girdilerin zararlı etkileri belirgin olsa da aynı zamanda sürdürülebilir üretim sistemlerini mümkün kılan toprak sağlığı ve canlılığını korumaya da ihtiyacımız vardır. Toprak çevresi, doğal kaynaklardan besin elementlerinin sağlanmasından sorumlu mikrobiyal populasyonun canlılığı için uygun olmalıdır. Sürdürülebilir tarım uygulamaları açısından giderek önem kazanan alternatiflerden biri de bazı mikroorganizmaların kullanımıdır. Mikroorganizmalar mümkün olduğu kadar kimyasal gübreleme gereksinimini azaltıp, bitki besin elementleri sirkülasyonunu sağlayarak tarımda büyük önem taşır. Bu amaçla kullanılan mikroorganizmalardan olan, bitki gelişimini teşvik eden mikroorganizmalar gelişime faydalı etkileri nedeniyle tarımda mikrobiyal gübre olarak kullanılmaktadır. Mikrobiyal gübreler sürdürülebilir tarım için büyük öneme sahiptir. Bitki gelişimini teşvik eden mikroorganizmalar azot fiksasyonu ve fosfat çözebilme yeteneğine ilave olarak, bitkisel hormon ve vitamin sentezi, etilen sentezinin engellenmesi, besin alımının ve stres koşullarına dayanıklılığın artırılması ve organik maddenin mineralizasyonu yoluyla bitki gelişimini teşvik etmektedir. Dolaylı olarak antibiyotik ve fungusidal bileşiklerin senteziyle patojenlerin zararlı etkilerini azaltmakta ve önleyebilmekte ayrıca diğer faydalı mikroorganizmalarla etkileşimle bitki gelişimini etkilemektedir. Bu yüzden mikrobiyal gübrelerin kullanımı sürdürülebilir tarım için büyük öneme sahiptir. Organik tarımın önemli bileşeni olan mikrobiyal gübreler, bitkiler tarafından kolayca asimile edilebilen, besinlerin yarayışlılığını artıran bu mikrobiyal işlemleri hızlandırma ve birçok mikroorganizmaları arttırmayı amaçlayarak kompost bölgesine, toprağa veya tohuma. uygulama için kullanılan sellülotik mikroorganizmalardır. Bunlar, bitkisel ürün üzerine olumlu etkileri bulunan mikrobiyal ırkların gelişmemiş veya canlı 1 hücrelerini içeren preparatlar olup aynı zamanda toprak verimliliğinin artırılmasında önemli bir rol oynar ve toprakta bitki gelişimini teşvik ederler. 1.1 Tezin Amacı Bu çalışma ile, Kombu çayı (Kombucha) ve Kombu çayı üretim artığı karışık mikroorganizma kültürünün tarımda mikrobiyal gübre olarak kullanılma olanaklarının araştırılması amacıyla, buğday bitkisinin verim ve verim unsurlarına etkisi ile toprakların biyolojik özelliklerinde meydana getirdiği etkiler sera koşullarında araştırılmıştır. Bu amaçla, kumlu tın ve tın bünyeli 2 ayrı toprakta, doğrudan Kombu çayı uygulaması ile liyofilize edilen atık karışık mikroorganizma kültürlerinin topraktan uygulanması sonucu buğday bitkisinin (Triticum aestivum) verimi ile toprakların dehidrogenaz ve katalaz aktivitesi ile mikrobiyal biyomas C ve toprak solunumu üzerindeki etkisi belirlenmiştir. 2 2. GENEL BİLGİLER Dünya nüfusunun gıda ihtiyacını karşılamak amacıyla tarım alanlarında birim alandan daha fazla verim elde etmek amacıyla, daha fazla girdi kullanılmaktadır. Tarımın tüm kollarında kaliteli tohumluk, mekanizasyon, bitki ıslahı gibi etkili uygulamaların yanında sulama ve gübrelemede yapmak gereklidir. Gübre uygulamasıyla artan bitkisel ürün, hayvancılık ve tarıma dayalı endüstrinin de temelini oluşturmaktadır. Buna karşın, Kimyasal gübreler az gelişmiş toplumlarda, çok daha fazla verim alabilmek düşüncesi ile rast gele zamanlarda ölçü tanımaz miktarlarda ve bilimsel olmayan yol ve metotlarla araziye uygulanmaktadır. Bu şekilde bilinçsizce kullanılan gübrelerin bir kısmı bitkilere yararlı olabilmekte geri kalan kısmı ise toprak sisteminden yıkanma, yüzey akışları ve buharlaşama ile uzaklaşmakta veya toprakta sıkı bir şekilde tutulabilmektedir. Bu şekilde topraktan uzaklaşan gübreler toprak, hava ve su ortamlarında çeşitli olumsuz etkilere neden olabilmektedir. Azotlu gübreler gibi bir kısmı topraktan uzaklaşan N ile fosforlu gübreler gibi toprakta adsorbe olabilen P ve K’un toprak sistemi üzerindeki olumsuz etkileri toprağın kuvvetli bir tamponlama gücüne sahip olmasından dolayı hemen fark edilmemektedir. Ancak uzun vadede, bilimsel esaslara uygun olmayan gübreleme toprakların fizikokimyasal ve biyolojik dinamiklerini olumsuz yönde etkilemekte ve sonuçta önemli çevre kirliliği oluşturmaktadır. Son yıllarda sıklıkla telafuz edilen ve kimyasal gübrelerinde içerisinde olduğu tarımsal kimyasalların toprak ve çevre sağlığındaki olumsuz etkilerin önüne geçebilmek ve daha sağlıklı gıdalar üretmek - tüketmek amacıyla uygulanır hale gelen organik tarımda, bitkisel üretimde gübreleme materyali olarak içerisinde N fiksasyonunu veya topraktaki P’un çözünürlüğünü artıran mikroorganizmaları (Azotobacter chroococcum, Bacillus megaterium var. phosphaticum gibi) içeren biyolojik gübreler önerilmekte ve kullanılmaktadır. Bu biyolojik gübrelerin doğaya ve insan sağlığına herhangi bir olumsuz etkisi mevcut bilgiler ile henüz ortaya konulmamasına karşın, özellikle ülkemizde dahil olmak üzere bir çok ülkedeki biyolojik gübreleme materyalleri büyük ölçüde yurtdışından ithal edilerek üreticilerin 3 kullanımına sunulmaktadır. Buna karşın, ülkemizde özellikle insan sağlığı üzerine olumlu etkilerinin varlığından bahsedilen mikrobiyal kültürler de bulunmaktadır. Bunlar içerisinde ise, gerek ülkemize ithal yollar ile girişi ve gerekse, Kombu çayını üreten yerli işletmelerin ülkemizde faaliyet göstermesi de dikkat çekicidir. Kombu çayının ürün olarak ve bu ürünün eldesinde atık olarak çevrede özellikle toprak üzerinde depolanan atık mikroorganizmaların tarımda gübreleme materyali olarak kullanılma olanaklarının araştırılmasına ait bilimsel araştırmalar ise yok denecek kadar azdır. 2.1. Kombu Çayı Kombu Çayı (Kombucha), ilaç olarak kullanılan fermente edilmiş çay olarak adlandırılmaktadır. Bakteri ve mayalardan oluşan çayın önemli içeriği Kombucha denilen çay mantarıdır. Doğu Asya'da ortaya çıkmış, Almanya'ya 19.yüzyılın başlarında Rusya üzerinden ulaşmıştır. Mantar, düz bir diske benzer, jelatine benzer bir zardan oluşmaktadır. Kombucha mantarı çay ve şekerden oluşan besleyici bir solüsyonun içinde yaşamakta ve bu sıvı içinde sürekli olarak üremektedir. Mantarımsı tabaka çayın bütün yüzeyine yayılmakta ve daha sonra kalınlaşmaktadır. Mantar sürekli üreme eğilimi içerisindedir. (a) (b) (c) Şekil 2.1: (a) Mikrobiyal kültürü içeren Kombu çayı (b) Kombu çayındaki maya ve bakteriler x400 (c) Ticari mamül olarak Kombu çayı 4 2.2. Mikroorganizmaların Tarımda Verimlilik Amaçlı Kullanımı Tarımda mikroorganizmaların toprak verimliliğini artırıcı etkileri, buna bağlı olarak bitkisel üretime sağladığı katkılar çok uzun süredir bilim çevreleri tarafından araştırılan konulardan olmuştur. Bununla beraber, toprak mikroorganizmalarının toprak verimliliği üzerindeki olumlu etkilerinin yanı sıra, pek çok mikroorganizma gurubunun bitkisel üretimi artırdığına dair çok fazla sayıda araştırma da bulunmaktadır. Ancak, Kombu çayı’nın direkt olarak tarımda kullanılabilme olanaklarının araştırıldığı ve Kombu çayının üretim atığı olan karışık mikroorganizma kültürünün tarımsal değeri konusunda yapılmış bilimsel çalışma ise bulunmamaktadır. Bu nedenle, aşağıdaki literatür çalışmalarında Kombu çayı kültürünün değil, diğer mikroorganizmaların tarımsal üretim üzerine etkilerine ait araştırma sonuçları verilmiştir. Allison ve diğ. (1947) Azotobacter chrococcum aşılaması ile baklagil olmayan çeşitli bitkilerin gerek veriminde ve gerekse azot kapsamında bir artış olup olmadığını tespit amacı ile yaptıkları araştırmada iki ayrı toprak kullanmışlar ve değişik düzeylerde azot ve karbon uygulamışlardır. Aşılamada Azotobacterin saf kültürü ve Rusya’da hazırlanmış Azotogen (A.chrococcum+organik toprak+CaCO3) kullanılmıştır. Arpa, sudan otu, lahana, kolza ve çavdarın gerek ürün miktarında gerekse azot kapsamında önemli bir artış elde edememişlerdir. Bu araştırmada birçok araştırıcının bulgularına aykırı bir sonuç elde etmiştir. Lyon ve Buckman (1950) hemen kullanılabilir enerji kaynağı olarak karbon kapsamı yüksek organik maddenin azot tespitini büyük ölçüde teşvik ettiğini belirlemişlerdir. Bu nedenle şeker ve diğer kolaylıkla yarayışlı duruma geçebilen karbonhidratların, toprağa ilave edilmesinin nitrifikasyonu geçici bir zaman için azaltmasına rağmen azot fiksasyonunu teşvik ettiğini saptamışlardır. İsmailçelebioğlu (1969) laboratuarda yaptığı bir inkübasyon denemesinde iki ayrı topraktan izole edilmiş olan A.chroococcum kültürlerinin, gerek izole edildikleri topraklarda gerekse farklı orijinli topraklarda meydana getirdikleri azot fiksasyonunu incelemiş, fiks edilen azot miktarını her iki koşulda da birbirine yakın olduğunu saptamıştır. Aynı araştırmada, 3, 8 ve 14 günlük A.chroococcum kültürlerinin azot fiks etme yetenekleri araştırılmış 3 ve 8 günlük kültürlerin daha etkili şekilde azot fiks ettiği belirlenmiştir. Araştırıcı, serada yaptığı denemede A.chroococcum’la 5 aşılamanın buğday ve patatesin ürün verimi üzerine etkisini araştırmış; buğdayın dane verimi artışını %47.08, saman verimini %4.60 ve patates verimini ise %9.87 olarak artırdığını saptamıştır. Araştırmada, tohumu, kök veya toprak aşılaması arasında ürün verimi açısından önemli farklılıklar saptanmamıştır. Brown ve diğ. (1964) buğday, arpa, maydanoz, havuç, ıspanak, turp bitkileriyle Azotobacter spp. ile aşılamışlar ve ürün miktarının arttığını gözlemişlerdir. Ayrıca tarlada ve serada 3 yıl süreyle yaptıkları bir denemede, Azotobacter aşılaması ile birlikte mineral gübrelerin ürün verimi üzerine etkisini araştırmışlardır. Aşılama için her ml’sinde 109 hücre bulunan saf ve canlı A.chrooccoccum kültürünü kullanmışlar; tohum, kök ve toprak aşılamasını tatbik etmişlerdir. Serada yapılan denemede ürün ağırlığında ortalama %11, yaprak ağırlığında %8, kök ağırlığında ise %5 lik bir artış sağlanmıştır. Brown ve diğ. (1968) Azotobacter’le aşılandığı taktirde ketende solmanın, yazlık tahılda yatmanın, patateste yumru uyuzu ve patates mildiyösü hastalıklarının daha az görüldüğünü ifade etmişler ve yine aşılama ile patateste bakteriyal çürüklüğün ve lahanadaki boğaz uru hastalıklarının daha az meydana geldiğini belirtmişlerdir. Bazı araştırıcılar, fosforlu gübrelerin Azotobacter’in etkinliğini artırdığını ortaya koymuşlardır. Obrastsova (1950, 1955) fosforca yetersiz olan topraklara Azotobacter’in verilmemesi gerektiğini bildirmiştir (Gür, 2000). Organik madde bakımından yetersiz olan topraklara organik madde verilmesi Azotobacterin üremesi için uygun ortam yaratmaktadır. Malek (1971), organik maddenin bir defada verilmesi yerine birkaç defada verilmesinin azot fiksasyonunu artıracağını bildirmektedir. Organik madde toprakta sadece Azotobacter için besin kaynağı vazifesini görmemekte, aynı zamanda bazı toprak mantarları ve bakteriler tarafından meydana getirilen antagonistik etkiyi azaltarak dolaylı yoldan Azotobacter’in gelişmesini artırmaktadır. Bazı organik maddelerin toprak toksinlerinin Azotobacter üzerine etkisini azaltmaya çalıştığı tespit edilmiştir. Troitskii (1931) Azotobacter’le aşılanan toprakta yulaf veriminin %56 arttığını göstermiştir. Ayrıca, karışık Azotobacter ve aerobik selüloz bakterilerinin toprağa verilmesiyle yapılan diğer bir denemede, yulafın veriminin %157 arttığını tespit etmişlerdir (Bartholomew and Clarck, 1965). 6 Alexander ve Wilson (1954) Azotobacter vinelandii tarafından tespit edilen moleküler N’un toplam miktarının, besiyerindeki şeker konsantrasyonuna bağlı olduğunu bulmuşlardır. Her bir gram sakkaroz’a karşılık, takriben 12.6 mgr. Azotobacter’ler tarafından N2 assimile edildiğini belirlemişlerdir (İsmailçelebioğlu, 1969). Rubenchik (1960) Azotobacter kültürü içinde buğday tohumunun bırakılma süresinin tohumun çimlenmesi üzerine etkisini araştırmış, en iyi sonucun tohumların Azotobacter kültürü içinde 6 saat bekletilmesi ile elde edildiğini belirtmiştir. Narula ve diğ. (2000) Sera koşulları altında farklı buğday genotiplerine Azotobacter choroococcum ile aşılamanın topraktalki fosfor çözünürlüğü ile bitkinin N, P ve K kaldırımı üzerine etkisini araştırdıkları çalışmada Azotobacter choroococcum ile aşılamanın kontrole göre bitki tarafından kaldırılan N, P ve K’u tüm buğday genotiplerinde artırdığı ve M15 ile M37 olarak adlandırılan Azotobacter choroococcum izolatlarının diğerlerine göre daha etkin suşlar olduğu saptanmıştır. Kumar ve diğ. (2001) Azotobacter choroococcum ve buna ait standart türlerin topraklara aşılanması ile genetiği değiştirilmiş buğday bitkisinin verimi üzerine etkilerini araştırdıkları sera denemesinde, yerli ırkların standart türlere oranla verimi daha fazla artırdığı, kontrole göre bu artışın ise, buğday bitkisinin danesinde %12.6, samanda ise %11.4 düzeylerinde bulunduğu saptanmıştır. Araştırıcılar ayrıca, yerli ırklar tarafından gerçekleştirilen bu artışın sebebinin N fiksasyonunun yanı sıra toprakta P’un çözünürlüğünün artırılması ve bakteriler tarafından çeşitli hormonların sentezlenmesinden kaynaklanabileceğini bildirmişlerdir. Öztürk ve diğ. (2003) Erzurum’da tarla koşulları altında 3 farklı azotlu gübrelemenin (0,4 ve 8kg/da) ve Azospirillum brasilense Sp246 ile Bacillus sp OSU142 ile aşılamanın buğday (kırık) ve tütün (tokak157/137) bitkisinin verimi üzerine etkilerini araştırdıkları çalışmada, Azospirillum brasilense Sp246 ile tohum aşılamasının hem buğday hem de tütünde verim ve verim unsurlarını büyük oranda artırdığı saptanmıştır. Ayrıca Azospirillum brasilense Sp246 ile aşılamanın metre karedeki başak sayısı, başaktaki dane sayısı, metrekaredeki dane sayısı ve ham protein kapsamında buğday bitkisi için kontrole göre sırasıyla %7.2, 5.9, 14.7 ve %4.1 oranında artırdığı saptanmıştır. Buna karşın, Bacillus sp OSU-142 ile aşılamanın ise buğdayda her bir başaktaki dane sayısını artırmasına karşın diğer verim unsurlarını etkilemediği belirlenmiştir. Dane verimi ve verim bileşenleri kontrol ile karşılaştırıldığı zaman tüm azotlu gübre uygulamalarında artış gösterdiği 7 ve en yüksek artışın yüksek azotlu gübre dozlarında elde edildiği belirlenmiştir. Çalışma sonunda Azospirillum brasilense Sp246’nın organik ve düşük azot girdili tarım uygulamalarında yazlık buğday ve tütün tarımında biyolojik gübre olarak kullanılabilme özelliği olduğu saptanmıştır. Behl ve diğ. (2003) buğday bitkisinde mikoriza (Glomus fasciculatum)’nın verim ve kök karakteristikleri üzerine etkisini araştırdıkları çalışmada farklı buğday çeşitleri kullanılmıştır. Elde edilen sonuçlar sadece kimyasal gübreleme yapılmış (6 kg N 3kg P2O5 1,25kg Zn-sülfat/da) kontrol parselleri ile karşılaştırılmıştır. Çalışma sonunda mikoriza ile beraber uygulanan Azotobacter chroococcum’un köklerde mantar hifleri tarafından gerçekleştirilen enfeksiyonun daha yüksek olduğu ve buğday çeşitlerine göre değişiklik göstermekle beraber daha yüksek olduğu saptanmıştır. Buğday bitkisinin veriminde Azotobacter chroococcum’un etkisinin ise mikoriza ile beraber aşılamada daha fazla olduğu ve maksimum Azotobacter chroococcum sayılarının ise bu uygulamalarda 80 ve 120 gün sonra ortaya çıktığı saptanmıştır. Emtiazi ve diğ. (2004) farklı patates bitkisine ait türlerde (Agria, Marphona, Concord, White ve Cosima) yumru gelişiminde Azotobacter ile aşılamanın etkisini araştırdıkları sera denemesinde, vermikulit içerisinde geliştirilen ve her 1 gramında 107 adet canlı hücre bulunan Azotobacter kültürleri ile aşılama yapılmıştır. Denemeler sonunda, aşılamanın tüm patates türlerinde yumru verimini artırmakla beraber, en yüksek verimin %33’lük oranda white çeşidinde olduğunu saptamışlardır. Buna karşın Azotobacter ile beraber uygulanan Rhizobium’un patates çeşitlerinde yumru verimlerini yalnızca Azotobacter ile aşılanmış saksılara oranla daha fazla artırdığını belirlemişlerdir. Wu ve diğ. (2005) azot fiske eden (Azotobacter chroococcum), fosfor (Bacillus megaterium) ve potasyum (Bacillus mucilaginous) çözen bakterileri içeren biyolojik gübrelerin mikorizal mantarlarla (Glomus mosseae ve Glomus intraradices ve Glomus intrardices) beraber uygulanması durumunda sera koşullarında yetiştirilen mısır bitkisinin gelişimi üzerine etkisini araştırdıkları çalışmada; biyolojik gübrenin Glomus mosseae ile beraber kullanımı sonunda en yüksek biyomas ve dane ağırlığı elde edildiği saptanmıştır. Çalışmada biyolojik gübre, kimyasal ve organik gübreler ile de karşılaştırılmıştır. Elde edilen sonuçlara göre sera koşullarında biyolojik gübre uygulamasının kontrole göre organik ve kimyasal gübre uygulamasının meydana getirdiği artışa benzer etkiye sahip olduğu belirlenmiştir. Bununla beraber biyolojik 8 gübrelerin kapsadığı mikrobiyel aşılara ilave olarak çeşitli toprak özelliklerini de düzenlediği saptanmıştır. Öğüt ve Er (2006) Azosprillum ve Trichoderma ile aşılamanın buğday ve kurufasülyenin mikroelement kapsamları üzerine etkisinin saptanması amacıyla Tokat koşullarında yürütülen çalışmada; Azosprillum brasilence ve Tricoderma harzianum’un tek başına veya karışık kültürlerinin fosforlu gübreler ile beraber etkisi araştırılmıştır. Çalışma sonunda Azosprillum’un fosforlu gübreler ile beraberce uygulaması durumunda danenin Mn, Zn ve Cu kapsamını artırdığı belirlenmiştir. Tricoderma’nın tek başına aşılanması durumunda ise 45 günlük fasülye bitkisinin Fe, Mn, Zn ve Cu kapsamını ve kümülatif olarak Fe ve Zn alımını azalttığı belirlenmiştir. Buna karşın fasülye bitkisinin önemli oranda Cu akümüle ettiği ve danenin Cu kapsamının büyük oranda arttığı belirlenmiştir. Buğday bitkisinde ise, Tricoderma aşılamasının etkisinin çok az olduğu da belirlenmiştir. Çakmakçı ve diğ. (2007) Sera koşullarında yetiştirilen tütün bitkisine 5 faklı azot fiske eden (Bacillus licheniformis RC02, Rhodobacter capsulatus RC04, Paenibacillus polymyxa RC05, Pseudomonas putida RC06 ve Bacillus OSU-142) ve 2 faklı fosfor çözünürlüğünü sağlayan (Bacillus megaterium RC01 ve Bacillus M-13) bakterisinin kontrol ve mineral gübre uygulamaları ile karşılaştırıldığı çalışmada bütün azot fiske eden suşların tütün gelişimini önemli oranda artırdığı saptanmıştır. Toprakların nitrat kapsamını ise en fazla azot fikse eden Bacillus OSU-142 aşılamasında elde edilmiştir. Tütünde tohum aşılaması ile meydana gelen artışın kök ağırlığında kontrole göre %17.9 ile 32.1, toprak üstü aksamında ise %28.8 ile 54.2 oranında artış sağladığı belirlenmiştir. Çalışmada tütünün toprak altı ve toprak üstü biyomaslarında meydana gelen artışın mikrobiyal aşı türlerine bağlı olarak değişiklikler gösterdiği saptanmıştır. Aynı zamanda azot fikse eden bakteri aşılamasının tütün bitkisi tarafından N, Fe, Mn ve Zn alımınıda artırdığı belirlenmiştir. Bu artışlarda mikroorganizmalar tarafından sentezlenen hormonlarında (indolasetikasit) önemli etkiye sahip olduğu saptanmıştır. Çalışma sonunda etkili Bacillus türlerinden OSU-142, RC07, M-13 ile P.polymyxa RC05, P.putida RC06 ve R.capsulatus RC04’ün tarımda kullanılabileceği saptanmıştır. 9 10 3. MATERYAL VE YÖNTEMLER 3.1. Materyal Denemede materyal olarak, piyasada ticari ürün olarak bulunan ve insanlar tarafından tüketilen ve Kombu çayı olarak bilinen ürün ile Kombu çayı üretimi sonunda açığa çıkan artık mikroorganizmalar kullanılmıştır. Kombu çayı’nın üretimindeki fermantasyon sürecinde aşağıdaki patojen olmayan bakteri ve mayalar kullanılmaktadır (Mayser ve diğ., 1995; Mo ve diğ., 2008; Jayabalan, 2010). Bakteriler: Acetobacter xylinus (sinonim: Gluconacetobacter xylinus) Acetobacter aceti Acetobacter pasteurianus Mayalar: Schizosaccharomyces pombe (sinonim: Schizosaccharomyces malidevorans) Saccharomycodes ludwigii Saccharomyces cerevisiae (sinonim: Saccharomyces aceti, Saccharomyces capensis, Saccharomyces chevalieri, Saccharomyces hienipiensis, Saccharomyces italicus, Saccharomyces norbensis, Saccharomyces ole) Kloeckera apiculata (sinonim: Hanseniaspora uvarum) Zygosaccharomyces rouxii (sinonim: Kluyveromyces osmophilus, Saccharomyces rouxii) Zygosaccharomyces bailii (sinonim: Saccharomyces bailii, Saccharomyces elegans) Brettanomyces bruxellensis (sinonim: Brettanomyces abstinens, Brettanomyces bruxellensis, Brettanomyces custersii, Brettanomyces intermedius, Brettanomyces lambicus, Dekkera intermedia, Dekkera bruxellensis) Pichia membranaefaciens (sinonim: Candida valida, Pichia alcoholophila) Candida kefyr (sinonim: Candida macedoniensis, Candida pseudotropicalis, Kluyveromyces cicerisporus, Kluyveromyces fragilis, Saccharomyces marxianus) 11 Candida krusei (sinonim: Endomyces krusei, Saccharomyces krusei, Issatchenkia orientalis) Denemelerde kullanılan “Kombu çayı”, üretici firma tarafından piyasaya arz edilen şekli ile, atık ve karışık mikroorganizma kültürleri ile sıvı azot içerisinde dondurulduktan sonra 3 gün süre ile -800C’de liyofilize edilerek hücre suyu uzaklaştırılmış ve su ile birleştiğinde aktivite gösteren kültürleri kullanılmıştır. 3.2. Yöntemler Kombu çayı ve Kombu çayı üretim atığı mikroorganizma kültürlerinin tarımda mikrobiyal gübre olarak kullanılma olanaklarının araştırılabilmesi amacıyla 2 ayrı toprak kullanılmıştır. Denemede materyal olan kullanılan toprakların birisi Tekirdağ ili Çorlu ilçesinden (A toprağı), diğeri ise Samsun ili Bafra ilçesinden (B toprağı) alınmıştır. Denemede kullanılan toprak örnekleri 0-20 cm’den alınmış, gölgede kurutulmuş, topraklar içerisindeki taş, bitki kök artıkları el ile temizlendikten sonra tahta tokmak ile dövülerek 2 mm’lik elekten geçirilmiştir. Denemelerde kullanılan toprakların bazı özelliklerinin belirlenmesinde Çizelge 3.1’de verilen yöntemler uygulanmıştır. Çizelge 3.1. Denemede kullanılan toprak örneklerinin bazı özelliklerinin belirlenmesinde uygulanan analizler (Rowell, 1996) Analiz Yöntem Tekstür (% kum, silt, kil) Hidrometre yöntemi ile Toprak reaksiyonu (pH) 1:1 (w/v) toprak:saf su karışımında Elektriksel İletkenlik (EC) 1:1 (w/v) toprak:saf su karışımında Kireç kapsamı (CaCO3) Scheibler kalsimetresi ile Organik madde Walkey-Black yöntemi ile Toplam Azot Kjeldahl yöntemi ile Alınabilir Fosfor 0.5 N NaHCO3 ekstraksiyonu ile Değişebilir Potasyum 1 N NH4OAc ekstraksiyonu ile 12 Denemelerde kullanılan Kombu çayı’nın mineral içerikleri ise Acmelabs (Acme Analytical Laboratories (Vancouver) Ltd. 1020 Cordova St. East Vancouver BC V6A 4A3 Canada) tarafından ICP-MS’de belirlenmiş, AcmeLabs’a ait sertifika ise EK ’de verilmiştir. 3.2.1. Sera denemesi Kombu çayı ve Kombu çayı üretim atığı mikroorganizma kültürlerinin tarımda mikrobiyal gübre olarak kullanılma olanaklarının araştırılabilmesi amacıyla; kumlu tın ve tın bünyeli 2 ayrı toprakta, topraktan uygulanan Kombu çayı ile liyofilize edilen atık karışık mikroorganizma kültürlerinin topraktan uygulanması sonucu buğday bitkisinin (Triticum aestivum) verimi üzerindeki etkisi ile toprakların biyolojik özelliklerindeki değişimler sera koşullarında araştırılmıştır. Deneme, Ondokuz Mayıs Üniversitesi Ziraat Fakültesi seralarında tamamen kontrollü koşullarda ve 250C’de yürütülmüştür. Deneme 15 Ocak 2011 tarihinde kurulmuş ve toplam 138 gün sürmüştür. Deneme 3 konu ile 3 paralelli olarak tesadüf parselleri deneme desenine göre kurulmuş, yürütülmüş ve tamamlanmıştır. Denemeler toplam 48 saksıdan oluşmuştur. Deneme desenleri EK B ’de verilmiştir. Denemenin kurulması amacıyla, kuru ağırlık üzerinden 3.5 kg’lık kurutulmuş, dövülmüş ve 2 mm’lik elekten elenmiş topraklar saksılara konulmuştur. Her bir saksıya 20 adet tohum olacak şekilde buğday bitkisinin (Pandas çeşidi) ekimi gerçekleştirilmiştir. Her bir saksıya toprağın tarla kapasitesi seviyesinin %60’ı oranında su kapsayacak şekilde steril saf su ilave edilerek sulama gerçekleştirilmiştir. Deneme süresince, saksılar her gün tartılarak eksilen su miktarı tamamlanarak toprakların nem içeriği steril saf su ile eşit seviyede tutulmuştur. Deneme konuları; i) Topraktan Kombu çayı uygulanması: Bu amaçla 3.5 kg toprak bulunduran saksılara buğday ekimini takiben 0, 10 ml, 20 ml ve 30 ml olmak üzere 4 doz Kombu çayı uygulaması 3 paralelli olarak 2 farklı toprağa uygulanmıştır. Deneme toplam 24 saksıdan oluşmuştur. (2 toprak x 4 doz x 3 paralel = 24 saksı) ii) Topraktan Liyofilize edilmiş atık karışık mikroorganizmaların uygulanması: Bu amaçla 3.5 kg toprak bulunduran saksılara buğday ekimini takiben 0, 0.25 gr, 0.50 gr ve 0.75 gr olmak üzere 4 doz liyofilize edilmiş atık karışık 13 mikroorganizmalar 3 paralelli olarak 2 farklı toprağa uygulanmıştır. Deneme toplam 24 saksıdan oluşmuştur. (2 toprak x 4 doz x 3 paralel = 24 saksı) Sera denemesi sonunda hasat edilen bitkilerin verim Jones, Jr. (2001) tarafından bildirildiği şekilde belirlenmiş, hasat sonunda saksılardan alınan toprak örneklerinde ise toprakların biyolojik özellikleri belirlenmiştir. 3.2.2. Toprakların biyolojik özellikleri Sera denemesi sonunda saksılardan alınan toprak örneklerinde bazı biyolojik analizler 3 paralelli olarak yapılmış ve sonuçlar kuru ağırlık olarak ifade edilmiştir. 3.2.2.1. Toprak solunumu (TS) Toprak örneklerinin solunum (karbondioksit üretim miktarları) Anderson (1982) tarafından bildirildiği şekli ile belirlenmiştir. Bu amaçla, 24 saatlik inkübasyon boyunca 250C’de inkübasyona bırakılan toprak örneklerinden üretilen CO2, bir alkali tarafından (Ba(OH)2.8H2O+BaCl2) tutulmuş ve arta kalan OH- kesin konsantrasyonu bilinen HCl ile fenol ftaleyn indikatörü eşliğinde titrasyona tabi tutulmuş ve elde edilen sonuçlar µg CO2 g-1 kuru toprak cinsinden ifade edilmiştir. 3.2.2.2. Mikrobiyal biyomas karbon (MBC) Toprak örneklerinin toplam mikrobiyal biyomas C içerikleri Anderson ve Domsch (1978) tarafından bildirilen substrat indirgenme yöntemine göre belirlenmiştir. Bu amaçla, toprak örnekleri üzerine glikoz’un belirli miktarları ilave edilerek belirli zaman sonunda üretilen CO2 miktarından biyomas C hesaplanmıştır. Elde edilen sonuçlar µg CO2 –C g-1 kuru toprak cinsinden ifade edilmiştir. 3.2.2.3. Dehidrogenaz aktivitesi (DHA) Toprak örneklerinin dehidrogenaz aktiviteleri Pepper ve diğ. (1995) tarafından bildirildiği şekli ile belirlenmiştir. Bu amaçla, toprak örneği üzerine glikoz ve %3’lük TTC (2,3,5-triphenyltetrazolium chlorid) çözeltisinden ilave edilmiş ve 250C’de 24 saat inkübasyona bırakılmıştır. İnkübasyon sonunda oluşan TPF (triphenylformazan) methanol ile ekstrakte edilmiş ve oluşan kırmızı rengin intensitesi standart TPF serisine karşılık 485 nm de spektrofotometrede belirlenmiştir. Elde edilen sonuçlar µg TPF g-1 kuru toprak cinsinden ifade edilmiştir. 14 3.2.2.4. Katalaz aktivitesi (KA) Toprak örneklerinin katalaz aktivitesi Beck (1971) tarafından bildirildiği sekli ile volumetrik olarak belirlenmiştir. Bu amaçla, 5 gr toprak örneği üzerine 10 ml fosfat tampon (pH 7) ve 5 ml %3’lük 10 substrat (H2O2) çözeltisi ilave edilmiştir. 3 dakika sonunda laboratuar sıcaklığında (20°C) açığa çıkan O2 miktarı volumetrik olarak belirlenmiştir. Her analiz 3 paralelli yapılmış ve elde edilen bulgular ml O2 g-1 kuru toprak olarak ifade edilmiştir. 3.2.3. İstatistiksel analizler Denemede elde edilen toprak örneklerinin analizleri 3 paralelli olarak yapılmış, sera denemesi sonunda Varyans analizi (ANOVA) ile LSD analizleri SPSS 11.0 paket programında yapılmış, elde edilen bulgular Düzgüneş (1963) tarafından bildirildiği şekilde değerlendirilmiştir. 15 16 4. BULGULAR VE TARTIŞMA 4.1. Deneme Topraklarının Özellikleri Sera denemesinde kullanılan toprakların genel özelliklerini belirlemek amacıyla yapılan analizlerin sonuçları Çizelge 4.1’de verilmiştir. Buna göre, deneme topraklarının birisi kumlu tın bünyeli ve asit reaksiyonlu olup, diğeri tın bünyeli ve alkalen reaksiyonludur. Çizelge 4.1: Sera denemesinde kullanılan toprakların özellikleri Tekstür Toprak Özellikleri A toprağı B toprağı Kum, % 63.03 42.15 Silt, % 21.14 42.35 Kil, % 15.83 15.00 Kumlu tın Tın Toprak Reaksiyonu (pH) 5.80 8.01 Elektriksel iletkenlik (EC), dS/m 0.13 0.10 Kireç kapsamı (CaCO3), % <%1 7.5 Organik madde, % 1.84 1.10 Toplam Azot, % 0.11 0.10 17.00 3.22 0.30 0.20 Sınıf Alınabilir P, mg kg-1 Değişebilir K, cmol.kg -1 4.2. Denemede Kullanılan Kombu Çayı ’nın Özellikleri Denemelerde kullanılan Kombu çayı’nın mineral içerikleri Acmelabs (Acme Analytical Laboratories (Vancouver) Ltd. 1020 Cordova St. East Vancouver BC V6A 4A3 Canada) tarafından ICP-MS’de belirlenmiş, Elde edilen bulgular Çizelge 4.2’de verilmiştir. Analiz sonuçlarına göre Kombu çayı başta P olmak üzere besin maddelerini içermekte olup, potansiyel toksik ağır metalleri (Cd, Pb…) ise çok eser şekilde içermektedir. 17 Çizelge 4.2: Denemede kullanılan Kombu çayı’nın mineral madde içeriği Ag < 0.5 ppb Er < 0.1 ppb Nb < 0.1 ppb Sn 2.4 ppb Al 5041 ppb Eu < 0.1 ppb Nd < 0.1 ppb Sr 282.1 ppb As < 5 ppb Fe 192 ppb Ni 55 ppb Ta < 0.2 ppb Au < 0.5 ppb Ga < 0.5 ppb P 3470 ppm Tb < 0.1 ppb B 1421 ppb Gd < 0.1 ppb Pb 4 ppb Te < 0.5 ppb Ba 70.8 ppb Ge < 0.5 ppb Pd < 2 ppb Th < 0.5 ppb Be < 0.5 ppb Hf 0.2 ppb Pr < 0.1 ppb Ti < 100 ppb Bi < 0.5 ppb Hg < 1 ppb Pt < 0.1 ppb Tl 0.3 ppb Br 68 ppb Ho < 0.1 ppb Rb 352.9 ppb Tm < 0.1 ppb Ca 46.6 ppb In < 0.1 ppb Re < 0.1 ppb U < 0.2 ppb Cd < 0.5 ppb K 128 ppm Rh < 0.1 ppb V 2 ppb Ce 0.3 ppb La 0.1 ppb Ru < 0.5 ppb W < 0.2 ppb Cl 11 ppm Li 9 ppb S 12 ppm Y 0.2 ppb Co 0.9 ppb Lu 0.1 ppb Sb 0.6 ppb Yb < 0.1 ppb Cr 275 ppb Mg 18.7 ppm Sc 18 ppb Zn 11 ppb Cs 1.0 ppb Mn 4828 ppb Se < 5 ppb Zr 15.2 ppb Cu 29 ppb Mo 2 ppb Si 19584 ppb Dy < 0.1 ppb Na 17.6 ppm Sm < 0.2 ppb 18 4.3. Kombu Çayı Uygulamasının Buğday Bitkisinin Verimi Üzerine Etkileri Kumlu tın ve tın bünyeli 2 ayrı toprakta, topraktan uygulanan Kombu çayı’nın buğday bitkisinin (Triticum aestivum) verimi üzerindeki etkisinin belirlenmesi amacıyla yürütülen sera denemesi sonun da elde edilen bulgular Şekil 4.1’de ve çizelge C.1’de verilmiştir. Deneme süresince görüntüler ise çizelge C.2’de verilmiştir. Elde edilen sonuçlara göre, topraktan artan seviyelerde uygulanan Kombu çayı’nın hem kumlu tın hem de tın bünyeli toprakta artan dozlara bağlı olarak buğday verimini artırdığı saptanmıştır. Topraktan Comboutea Uygulaması kontrol 10 ml/saksı 10 ml/saksı Tane verimi, kg/da Kontrol 20 ml/saksı 30 ml/saksı 20 ml/saksı 30 ml/saksı 350 300 250 200 150 100 50 0 Topraktan Comboutea Kumlu tın bünyeli toprak Uygulaması Tın bünyeli toprak Sap verimi, kg/da kontrol 10 ml/saksı Toprak 20 ml/saksı 30 ml/saksı 1600 1400 1200 1000 800 600 400 200 0 Kumlu tın bünyeli toprak Tın bünyeli toprak Toprak Şekil 4.1: Topraktan Kombu çayı uygulanmasının buğday bitkisinin verimi üzerine etkisi Kumlu tın ve tın bünyeli 2 ayrı toprakta, liyofilize edilen atık karışık mikroorganizma kültürlerinin topraktan uygulanması sonucu buğday bitkisinin (Triticum aestivum) verim ve verim unsurları üzerindeki etkisinin belirlenmesi amacıyla yürütülen sera denemesi sonun da elde edilen bulgular Şekil 4.2. ve EK C’ de verilmiştir. 19 Topraktan Atık Mikroorganizma Uygulaması kontrol 10 ml/saksı 0,25 gr/saksı Tane verimi, kg/da Kontrol 20 ml/saksı 30 ml/saksı 0,50 gr/saksı 0,75 gr/saksı 350 300 250 200 150 100 50 0 Topraktan Mikroorganizma Uygulaması Kumlu tın Atık bünyeli toprak Tın bünyeli toprak Sap verimi, kg/da kontrol 10 ml/saksıToprak 20 ml/saksı 30 ml/saksı 1600 1400 1200 1000 800 600 400 200 0 Kumlu tın bünyeli toprak Tın bünyeli toprak Toprak Şekil 4.2: Liyofilize edilen atık mikroorganizma kültürünün topraktan uygulanmasının buğday bitkisinin verimi üzerine etkisi Elde edilen sonuçlara göre, topraktan liyofilize edilerek uygulanan atık mikroorganizma kültürünün buğday bitkisinin tane ve sap verimini artırdığı, artışın ise dozlar arasında çok önemli farklar içermediği, artışların kumlu tın bünyeli toprakta daha belirgin olduğu belirlenmiştir. Gerek liyofilize edilerek uygulanan atık karışık mikroorganizma kültürleri ve gerekse topraktan sıvı formda uygulanan Kombu çayı’nın buğday bitkisinin verim ve verim unsurlarını artırıcı yönde etkilediği belirlenmiştir. Buğday bitkisinin verim ve verim unsurlarında meydana gelen artışların muhtemel sebepleri ise aşağıda verilmiştir. Kombu çayı’nın üretiminde kullanılan mikroorganizmalar (maya ve bakteriler), çeşitli organik asitleri, aminoasitleri ve vitaminleri sentezlemektedirler. Bunlar aynı zamanda son ürün olan Kombu çayında da bulunmaktadır. Kombu çayı’nın içeriğinde bulunan organik asitler Çizelge 4.3’de, aminoasitler Çizelge 4.4’te, vitaminler Çizelge 4.5’te ve çay polifenolleri ise Çizelge 4.6’da verilmiştir. Söz 20 konusu mikroorganizmalar tarafından sentezlenen bu fermente ürünler, özellikle bitki kök gelişimi olmak üzere bitkisel üretimi artırıcı yönde etkide bulunmuş olabilir. Bu fermente ürünler bitki büyümesini ve gelişmesini teşvik etmektedir. Bununla beraber, bu fermente ürünler hem doğrudan bitkiler tarafından alınmakta hem de toprakta bulunan diğer mikroorganizmalar için substrat kaynağı olduğu için bu mikrofloranın populasyonunun artmasına katkı sağlamaktadır. Kombu çayı içerisinde bulunan ve atık kültürdeki mayalar tarafından sentezlenen biyoaktif maddeler aktif olarak hücre ve kök büyümesini teşvik etmektedir. Kombu çayı üretiminde kullanılan mikroorganizmalar, pek çok patojen organizmalara karşı antibakteriyel etkiye sahip olup, antimikrobiyal etkiye sahip olduğu bakteriler aşağıda verilmiştir. (Greenwalt ve diğ., 1998; Sreeramulu ve diğ., 2000; Wu ve diğ., 2007; Mo ve diğ., 2008). Staphylococcus aureus Staphylococcus epidermidis Salmonella enteritidis Salmonella typhimurium (sinonim: Salmonella choleraesuis subsp. choleraesuis, Salmonella enteritidis, Salmonella typhi, Salmonella typhimurium, "Salmonella cholerae-suis subsp. choleraesuis") Salmonella typhimurium (sinonim: Salmonella choleraesuis subsp. choleraesuis, Salmonella enteritidis, Salmonella typhi, Salmonella typhimurium, "Salmonella cholerae-suis subsp. choleraesuis") Escherichia coli Helicobacter pylori (sinonim: Campylobacter pylori, Helicobacter nemestrinae, Campylobacter pylori subsp. pylori) Bacillus cereus (sinonim: Bacillus medusa) Shigella sonnei Aeromonas hydrophila Yersinia enterocolitica Pseudomonas aeruginosa Enterobacter cloacae Campylobacter jejuni Listeria monocytogenes 21 Kombu çayı’nın patojen mikroorganizmaları engelleyici etkisi (antimikrobiyal etki) Kombu çayı’nın ortam pH’sında meydana getirdiği düşüş, Kombu çayı’nın içerdiği çeşitli fermente ürünlerinin patojen mikroorganizmaların aktivitesini engellemesinden kaynaklanmaktadır (Sreeramulu ve diğ., 2000; Sreeramulu ve diğ., 2000, Mo ve diğ., 2008). Bu durum ise, çevre ve bitki sağlığını olumsuz yönde etkiyerek bitkisel ürün verimini azaltan olası patojen bakterilerin aktivitesini sınırlamaktadır. Aynı zamanda bitki kök bölgesinde generasyon süresi oldukça kısa olan bakteri populasyonunu kontrol altına alarak toprak mikrobiyal aktivitesinin dengelenmesine ve dengede kalmasına önemli katkılar sağlamaktadır. 22 Çizelge 4.3: Kombu çayında bulunan çeşitli organik asitler (Blanch, 1996; Srinivasan, 1997; Dufresne ve Farnworth, 2000; Sreeramulu ve ark. 2000; Jayabalan ve ark. 2007; Mo ve ark. 2008) Asetik asit Glukuronik asit Glukonik asit Glukonolakton Laktik asit Glukarik asit Usnik asit Sitrik asit Hyaluronik asit Tanin Chondroitin sülfat Heparin 23 Çizelge 4.4: Kombu çayında bulunan çeşitli aminoasitler (Jayabalan, 2010) Isoleucine Valine Glycine Tryptophan Proline Lysine Alanine Serine Methionine Arginine Tyrosine Leucine Phenylalanine Threonine Aspartic acid Cysteine 24 Glutamic acid Histidine Çizelge 4.5: Kombu çayında bulunan çeşitli vitaminler (Bauer-Petrovska ve PetrushevskaTozi, 2000) Vitamin B1 Vitamin B12 Vitamin B6 Vitamin C 25 Çizelge 4.6: Comboutea’de bulunan çeşitli çay polifenolleri (Jayabalan, 2010) (-)-epicatechin (EC) (-)-epigallocatechin (EGC) (-)-epicatechin gallate (ECG) (-)-epigallocatechin gallate (EGCG) theaflavin (TF) Kombu çayı içerisinde bulunan laktik asit ile, liyofilize edilerek kullanılan atık mikrobiyal karışık kültür tarafından sentezlenen laktik asit, çok kuvvetli sterilize edici özellik taşımakta olup, patojen bakterilerin populasyonunu baskılamakta ve toprak organik maddesinin mineralizasyonunu hızlandırmaktadır. Aynı zamanda laktik asit tarımda bitkisel verimliliği olumsuz yönde etkileyen Fusarium’un çoğalma ve yayılmasını da engellemektedir. Bu durum ise, bitkilerin patojenlere karşı direncini artırmaktadır. Gerek topraktan uygulanan Kombu çayı ve gerekse topraktan uygulanan liyofilize kültürleri sonunda, bitkisel ürün miktarında meydana gelen artışların diğer nedeni, Kombu çayı’nın içerdiği bitki besin maddelerinden (Çizelge 4.2) kaynaklanmaktadır. Kombu çayı, yapısındaki organik asitler, vitaminlerin yanı sıra, P ve K gibi besin maddelerini de içermektedir. Dolayısıyla bitki besin maddelerini içeren materyallerin toprak uygulanması sonucu bitkisel üretimde artışların meydana gelmesi beklenen bir sonuçtur. 26 Fermentasyon süreci sonunda elde edilen ve Kombu çayı olarak firma tarafından adlandırılan ürün asidik bir ortama (pH 5.0) sahiptir. Bu materyalin topraktan uygulanması sonucu ise, toprak pH’sının geçici bir süre dahi olsa düşmeler göstereceği açıktır. Bunun sonucunda ise, toprağın doğal yapısında bulunan bazı elementlerin (Fe, Cu, Zn, Mn gibi) çözünürlüğünün ve alınabilirliği artacak ve bikriler tarafından daha fazla alınarak bitkisel ürün miktarında artışlar sağlayabilecektir. Kombu çayı ve atık kültürlerin topraklara uygulanması sonucu buğday bitkisinin verim ve verim unsurlarında meydana getirdiği artışlar, toprak özelliklerine bağlı olarak değişiklikler göstermektedir. Toprak bünyesi, kumlu bünyeden tına doğru bir değişim göstermesi ile bitkisel biyomasın azaldığı saptanmıştır. Bu ise, Kombu çayı veya atık mikroorganizmaları ile yapılacak toprak uygulamalarında toprak özelliklerinin de dikkate alınarak uygulama yapılması gerektiği sonucunu ortaya çıkartmaktadır. Kombu çayı ve atık kültürde bulunan Acetobacter sp. (sinonim: Gluconacetobacter sp.) sadece selüloz üreten asetik asit bakterisi olmayıp aynı zamanda serbest olarak da Azot fiksasyonunu gerçekleştirmektedir (Dutta ve Gachhui, 2007). Bu durumda topraktan uygulanan Kombu çayı ve atık kültürlerin bitkinin Azot beslenmesini ve Azot bilançosunu olumlu yönde etkilemesi ve verim artışı sağlaması ile sonuçlanmaktadır (Saravanan ve diğ. 2008). 27 4.4. Kombu Çayı Uygulamasının Toprakların Biyolojik Özellikleri Üzerine Etkileri 4.4.1. Toprak solunumu (TS) Kumlu tın ve tın bünyeli 2 ayrı toprakta, topraktan uygulanan Kombu çayı ve liyofilize atık Kombu çayı kültürünün toprak solunumu üzerindeki etkisinin belirlenmesi amacıyla yürütülen sera denemesi sonunda elde edilen bulgular Şekil 4.3’de ve EK E’te verilmiştir. Elde edilen sonuçlara göre, topraklara artan seviyelerde uygulanan Kombu çayı’nın hem kumlu tın hem de tın bünyeli toprakta artan dozlara Kombu çayı ve liyofilize atık Kombu çayı kültürü dozuna bağlı olarak toprak solunumu miktarını artırdığı saptanmıştır. Şekil 4.3: Topraktan Kombu çayı ve liyofilize edilmiş atık Kombu çayı kültürü uygulanmasının toprak solunumu üzerine etkisi. 28 Kumlu tın bünyeli toprak ile tın bünyeli toprağa yapılan uygulamalar toprak solunumu üzerinde benzer sonuçlar verse dahi, kumlu tın bünyeli toprağa liyofilize edilerek verilen atık Kombu çayı kültürlerinin toprak solunumu üzerinde meydana getirdiği etkinin daha belirgin olduğu belirlenmiş, saksı başına 0,75 g atık Kombu çayı kültürünün kontrole göre toprak solunumunu %18,5 oranında artırdığı saptanmıştır. Oysa ki, Kombu çayı mamül olarak toprağa doğrudan uygulandığında en fazla etki tın bünyeli toprakta ve saksı başına 30 ml’lik uygulama dozunda elde edilmiş, bu uygulama dozunda toprak solunumunda kontrole göre meydana gelen artışın ise %15,8 olduğu belirlenmiştir. Topraklarda belirlenen CO2 üretimi toprak canlılarının solunumları sonucunda üretilen CO2 miktarını ifade etmekte olup, bu aynı zamanda toprak solunumu olarak da adlandırılmaktadır. Topraklardan üretilen CO2’in çok büyük miktarını (2/3’ünü) toprak canlıları (toprak faunası ve mikroflora) üretmekte olup, bir kısmı da (1/3’ü) bitki kökleri tarafından üretilmektedir (Haktanır ve Arcak, 1997). Bu nedenle CO2 üretiminin belirlenmesi aynı zamanda toprakların biyolojik aktivitesinin belirlenmesinde sıklıkla kullanılan bir değerlendirme şeklidir (Anderson, 1982). Topraklara gerek Kombu çayı’nın ve gerekse liyofilize edilmiş atık Kombu çayı kültürünün uygulanması sonucunda toprak solunumunda meydana gelen artışların toprak bünyesine göre değişiklikler gösterdiği belirlenmiştir. Ayrıca, yapılan uygulamalar ile toprak solunumunda meydana gelen artışların ise artan bitki gelişimine bağlı olarak kök solunumunun arttığı ve topraklara Kombu çayı veya atık liyofilize Kombu çayı kültürü ilavesi ile toprak mikroorganizma populasyonunun bir sonucu olarak mikrobiyal solunumunda kök solunumu gibi bir artış gösterdiği saptanmıştır. 29 4.4.2. Mikrobiyal biyomas karbon (MBC) Kumlu tın ve tın bünyeli 2 ayrı toprakta, topraktan uygulanan Kombu çayı ve liyofilize atık Kombu çayı kültürünün toprakların mikrobiyal biyomas karbon içeriği üzerindeki etkisinin belirlenmesi amacıyla yürütülen sera denemesi sonunda elde edilen bulgular Şekil 4.4’de ve EK F’te verilmiştir. Elde edilen sonuçlara göre, topraklara artan seviyelerde uygulanan Kombu çayı’nın hem kumlu tın hem de tın bünyeli toprakta artan dozlara Kombu çayı ve liyofilize atık Kombu çayı kültürü dozuna bağlı olarak toprakların mikrobiyal biyomas karbon içeriğini artırdığı saptanmıştır. Şekil 4.4: Topraktan Kombu çayı ve liyofilize edilmiş atık Kombu çayı kültürü uygulanmasının toprakların mikrobiyal biyomas karbon içeriği üzerine etkisi Kumlu tın bünyeli toprak ile tın bünyeli toprağa yapılan uygulamalar toprakların mikrobiyal biyomas karbon içeriği üzerinde benzer sonuçlar verse dahi, kumlu tın bünyeli toprağa doğrudan verilen Kombu çayı ve liyofilize edilerek verilen atık Kombu çayı kültürlerinin toprakların mikrobiyal biyomas karbon içeriği üzerinde 30 meydana getirdiği etkinin daha belirgin olduğu belirlenmiştir. Kumlu tın bünyeli toprakta saksı başına 0,75 g atık Kombu çayı kültürünün kontrole göre toprakların mikrobiyal biyomas karbon içeriği %33.9 oranında, kombu çayının doğrudan 30 ml/saksı düzeyinde uygulanmasında ise %55,4 kontrole göre toprakların mikrobiyal biyomas karbon içeriğini oranında artırdığı saptanmıştır. Toprak mikroorganizmalarının sayısal dağılımı toprakların fiziko-kimyasal özellikleri ile çok sıkı bir ilişki içerisinde olmasıyla birlikte topraklara yapılan organik madde ya da atık uygulamaları gibi kültürel faaliyetlerde bunların sayısal dağılımı üzerine etki edebilmektedir (Vekemans ve diğ. 1989). Toprak mikroorganizmalarının sayısal dağılımı aynı tip organizmalar birbirleri ile karşılaştırıldığı durumda yeterli olmasına karşın toprak mikroflorasının tamamı değerlendirildiği durumlarda sayısal dağılım çok fazla bir anlam ifade etmemektedir. Bu nedenle toprakların mikrobiyolojik özelliklerinde toplam mikrobiyal biyomas C gibi mikroorganizmaların biyomaslarının belirlenmesine ait değerlendirme şekilleri sıklıkla kullanılan parametrelerdendir (Rogers ve Li, 1985; Vekemans ve diğ. 1989; Nannipieri ve diğ. 1990). 4.4.3. Dehidrogenaz aktivitesi (DHA) Kumlu tın ve tın bünyeli 2 ayrı toprakta, topraktan uygulanan Kombu çayı ve liyofilize atık Kombu çayı kültürünün toprakların dehidrogenaz aktivitesi üzerindeki etkisinin belirlenmesi amacıyla yürütülen sera denemesi sonunda elde edilen bulgular Şekil 4.5’de ve EK G’de verilmiştir. Elde edilen sonuçlara göre, topraklara artan seviyelerde uygulanan Kombu çayı’nın hem kumlu tın hem de tın bünyeli toprakta artan dozlara Kombu çayı ve liyofilize atık Kombu çayı kültürü dozuna bağlı olarak toprakların dehidrogenaz içeriğini artırdığı saptanmıştır. Ancak, kumlu tın bünyeli toprakta Kombu çayınının 30 ml/ saksı uygulama dozunda kontrole göre toprakların dehidrogenaz aktivitesinin azaldığı belirlenmiştir. Buna karşın, tın bünyeli toprakta Kombu çayınının artan dozlarına bağlı olarak dehidrogenaz aktivitesinin de arttığı saptanmıştır. Topraklarda belirlenen dehidrogenaz aktivitesi (DHA), o toprağın mikrobiyolojik aktivitesinin değerlendirilmesinde sıklıkla kullanılan bir intraselüler bir enzim olup, toprak mikroflorasının oksidatif aktivitesinin toplam miktarını göstermektedir (Skujins 1973; Trevors 1984). Dolayısıyla, liyofilize edilerek verilen atık Kombu çayı kültürlerinin hem kumlu tın bünyeli hemde tın bünyeli toprakta dehidrogenaz aktivitesi üzerinde meydana getirdiği olumlu etkinin toprakların 31 mikrobiyolojik aktivitesini artırdığı, buna karşın mamül olan Kombu çayının 30 ml/saksı dozunun ise kumlu tın bünyeli toprakta mikrobiyolojik aktivitenin azalmasına sebep olduğu belirlenmiştir. Şekil 4.5: Topraktan Kombu çayı ve liyofilize edilmiş atık Kombu çayı kültürü uygulanmasının toprakların dehidrogenaz aktivitesi üzerine etkisi 4.4.4. Katalaz aktivitesi (KA) Kumlu tın ve tın bünyeli 2 ayrı toprakta, topraktan uygulanan Kombu çayı ve liyofilize atık Kombu çayı kültürünün toprakların katalaz aktivitesi üzerindeki etkisinin belirlenmesi amacıyla yürütülen sera denemesi sonunda elde edilen bulgular Şekil 4.6’da ve EK H’de verilmiştir. Elde edilen sonuçlara göre, topraklara artan seviyelerde uygulanan Kombu çayı’nın hem kumlu tın hem de tın bünyeli toprakta artan dozlara Kombu çayı ve liyofilize atık Kombu çayı kültürü dozuna bağlı olarak toprakların katalaz aktivitesini artırdığı saptanmıştır. 32 Katalaz enzimi, hidrojen peroksitin (H2O2), su ve moleküler oksijene parçalanma reaksiyonunu katalizlemektedir. H2O2, canlı organizmaların solunum süreçlerinde ve organik maddenin oksidasyona uğradığı çeşitli biyokimyasal süreçler sonunda oluşmaktadır. Canlı organizmalarda ve toprakta katalaz enziminin rolünün organizmaların hücre zehiri olan hidrojen peroksiti parçaladığı düşünülmektedir. Katalaz enzimi, canlı organizma hücrelerinde (mikroorganizmalarda ve bitkilerde) ve aynı zamanda yüksek miktarlarda toprakta bulunmakta olup, toprakta aerob mikrobiyal populasyonun değerlendirilmesinde kullanılan intrasellüler bir enzimdir (Kızılkaya ve diğ., 2004). Kumlu tın bünyeli toprak ile tın bünyeli toprağa yapılan uygulamalar toprak solunumu üzerinde benzer sonuçlar verse dahi, kumlu tın bünyeli toprağa Kombu çayı ve liyofilize edilerek verilen atık Kombu çayı kültürlerinin katalaz aktivitesi üzerinde meydana getirdiği etkinin daha belirgin olduğu belirlenmiş, topraklarda meydana gelen mikrobiyolojik artışın büyük kısmının ise aerobik nitelikteki organizmalardan oluştuğu saptanmıştır. Şekil 4.6: Topraktan Kombu çayı ve liyofilize edilmiş atık Kombu çayı kültürü uygulanmasının toprakların katalaz aktivitesi üzerine etkisi 33 34 5. SONUÇ VE ÖNERİLER Kombu çayı olarak bilinen ürün ile Kombu çayı üretimi sonunda açığa çıkan artık mikroorganizmaların liyofilize edilerek topraklara ve ürünün topraktan uygulanması sonucu buğday bitkisinin verim ve verim unsurlarında önemli artışların olduğu belirlenmiştir. Ancak bitkisel ürün veriminde meydana gelen artış, piyasada bulunan diğer mikrobiyal preparatlar ve kimyasal gübrelerle karşılaştırıldığı zaman düşük seviyelerde olduğu gözlemler sonucu anlaşılmıştır. Bu durumun önüne geçerek, gerek atık mikroorganizma kültürlerinin ve gerekse mamül Kombu çayı’nın amaca yönelik olarak organik veya inorganik besin maddeleri ile zenginleştirilmesi, mikroorganizmalar için C kaynakları ile desteklenmesi gerekmektedir. Ancak bu durum ilave yoğun laboratuar çalışmaları ve elde edilecek mamülün bitkisel üretimdeki etkisinin ortaya konması için bitkili koşullarda denenmesi ile mümkün olacaktır. Dolayısı ile mamülün ve atığın tarımda mikrobiyal kökenli gübre veya organo-mineral gübre olarak kullanılma potansiyeli bulunmaktadır. Fakat, kesin sonuçlara ulaşmak için daha detaylı araştırmalara ihtiyaç bulunmaktadır. Topraklara uygulanan Kombu çayı ve liyofilize atık Kombu çayı kültürlerinin toprakların biyolojik özelliklerinde meydana getirdiği etkiler genellikle olumlu yöndedir. Ancak, meydana getirdiği bu olumlu etkiler genellikle Kumlu tın bünyeli toprakta daha belirgin olarak ortaya çıkmakta ve mamül olan Kombu çayının 30 ml/saksı uygulama dozlarında ise, yine kumlu tın bünyeli toprağın bazı mikromiyolojik özelliklerinde azalmaların da meydana geldiği saptanmıştır. Gerek kombu çayının ve gerekse atık liyofilize kültürün topraklara uygulanmasında mikrobiyolojik özelliklerde meydana gelen artışın temel kaynağı, doğrudan yollar ile topraklara mikroorganizma verilmesi ve mamül içerisinde bulunan bazı organik bileşikler ile besin maddelerinin topraklara girişi ile ilgilidir. Gerek kombu çayı olarak adlandırılan mamülün ve gerekse liyofilize edilen atık kültürün tarımsal değerinin arazi koşullarda etkisinin belirlenmesi için tarla denemeleri ile ortaya konulması ve detaylı mikrobiyolijik parametlerin de beraberce çalışılıp ortaya konulması gerekmektedir. Özetle, Kombu çayı ve atık mikroorganizma kültürleri tarımda bitkisel üretimi artırıcı yönde önemli bir girdi olarak kullanılabileceği bu ön çalışma ile belirlenmiş fakat uygulama dozu, uygulama şekli, verimi artırıcı yönde sağlayacağı katkının 35 artırılması gibi ilave bilgiler ancak daha detaylı çalışmalar ile ortaya konulması gerekmektedir. 36 6. KAYNAKLAR Alexander, M., Wilson, P.W., 1954. Large-scale production of the Azotobacter for enzymes. Applied Microbiology 2, 135-140. Allison, F. E. , 1947. Azotobacter inoculation of crops: I. Historical. Soil Science. 64, 413- 429. Anderson, J.P.E., 1982. Soil respiration. In: Methods of Soil Analysis, Part 2, Chemical and Microbiological Properties, (Page, A.L. (ed.), ASA-SSSA. Madison, Wisconsin, p. 831-871. Bartholomew, W. V., Clark, F.E. 1965. Soil Nitrogen, American Society of Agronomy, Inc., Publisher. Number 10. Chapter 12., pp.436-476. Madison, Wisconsin, U.S.A. Bauer-Petrovska, B., Petrushevska-Tozi, L., 2000. Mineral and water soluble vitamin content in the Kombucha drink, International Journal of Food Science and Technology 35, 201–205. Behl, R., K., Sharma, H., Kumar, V., Narula, N., 2003. Interactions amongst Mycorrhiza, Azotobacter chroococcum and Root Characteristics of Wheat Varieties. Journal of Agronomy and Crop Science 189, 151—155. Benton Jones, Jr. J.B. 2001. Laboratory Guide for Conducting Soil Tests and Plant Analysi,. CRC Press, USA. Blanch, P.J., 1996. Characterization of the tea fungus metabolites. Biotechnology Letters, 18(2), 139-142. Brown, M.E., Burlingham, S.K., Jackson, R.M., 1964. Studies on Azotobacter species in soil. II. Populations of Azotobacter in the rhizosphere and effects of artificial inoculation. Plant and Soil 17, 320-332. Brown, M.E., R.M. Jackson, S.K. Burlingham, 1968. Growth and effects of bacteria introduced into soil. The ecology of Soil bacteria, An International Symposium. 531-551. Chen, C., Liu, B. Y. 2000. Changes in major components of tea fungus metabolites during prolonged fermentation, Journal of Applied Microbiology, 89(5), 834839. Chu, S. C., Chen, C. S., 2006. Effects of origins and fermentation time on the antioxidant activities of Kombucha, Food Chemistry, 98(3), 502 – 507. Çakmakçı, R., Dönmez, M.F., Erdoğan, Ü., 2007. The Effect of Plant Growth Promoting Rhizobacteria on Barley Seedling Growth, Nutrient Uptake, Some Soil Properties, and Bacterial Counts. Turkish Journal of Agriculture and Forestry 31, 189-199. Diniz, R.O., Garla, L.K., Schneedorf, J.M., Carvalho, J.C.T., 2003. Study of antiinflammatory activity of Tibetan mushroom, a symbiotic culture of bacteria and fungi encapsulated into a polysaccharide matrix, Pharmacological Research 47, 49–52. Dufresne, C., Farnworth, E. 2000. Tea, Kombucha, and health: a review, Food Research International 33, 409 – 421. 37 Dutta, D., Gachhui, R,. 2007. Nitrogen-fixing and cellulose-producing Gluconacetobacter kombuchae sp. nov., isolated from Kombucha tea, International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology 57, 353–357. Düzgüneş, O., 1963. Bilimsel Araştırmalarda İstatistik Prensipleri ve Metodları. Ege Üniversitesi Matbaası, İzmir. Emtiazi, G., Naderi, A., Etemadifar, Z., 2004. Effect of Nitrogen Fixing Bacteria on Growth of Potato Tubers. Advances in Food Sciences 26, 56-58 Greenwalt, C. J., Ledford, R. A., Steinkraus, K. H., 1998. Determination and characterization of the antimicrobial activity of the fermented tea Kombucha, LWT - Food Science and Technology, 31(3), 291- 296. Gür, K., 2000. Toprak Biyolojisi. Selçuk Üniversitesi Ziraat Fakültesi yayınları No. 10, Konya. Haktanır, K., Arcak, S., 1997. Toprak Biyolojisi. Ankara Üniversitesi Ziraat Fakültesi Yayınları No. 1486. Ankara. İsmailçelebioğlu, N., 1969. Muhtelif bölgelerden izole edilen Azotobacter chroococcum ile aşılamanın, Erzurum Kan siltli kili ve Palandöken çakıllı tınında yetiştirilen buğday ve patates bitkilerinin verimi üzerine etkisi. Atatürk Üniversitesi yayınları No: 274 Erzurum. Jayabalan, R., Marimuthu, S., Swaminathan, K., 2007. Changes in content of organic acids and tea polyphenols during kombucha tea fermentation, Food Chemistry 102, 392–398. Jayabalan, R., Malini, K., Sathishkumar, M., Swaminathan, K., Yun, S.E. (2010). Biochemical Characteristics of Tea Fungus Produced During Kombucha Fermentation. Food Science and Biotechnology 19(3), 843-847. Jayabalan, R., Malini, K., Sathishkumar, M., Swaminathan, K., Yun, S.E., 2010. Biochemical Characteristics of Tea Fungus Produced During Kombucha Fermentation, Food Science and Biotechnology, 19(3), 843-847. Jones, J.B.Jr. 2001. Laboratory Guide for Conducting Soil Tests and Plant Analysis. CRC Press. 363p. Kizilkaya, R., Aşkın, T., Bayraklı, B., Sağlam, M., 2004. Microbiological characteristics of soils contaminated with heavy metals. European Journal of Soil Biology, 40, 95-102. Kumar, V., Behl, R. K., Narula, N., 2001. Establishment of phosphate-solubulizing strains of Azotobacter chroococcum in the rhizosphere and their effect on wheat cultivars under green house conditions. Microbiological Research 156, 87–93. Lyon, T.L. and Buckman, H.O. 1950. The nature and Properties of Soils. Fourth Edition. The Mac Millan Company, New York. Maghsoudi, H., Mohammadi, H.B., 2009. The effect of Kombucha on post-operative intra-abdominal adhesion formation in rats, Indian Journal of Surgery, 71, 73– 77. Malek Abd-El., 1971. Free-Living nitrogen-fixing bacteria in Egyptian soils and their possible contribution to soil fertility. Plant and Soil, special volume. 423-442. 38 Mayser, P., Fromme, S., Leitzmann, C., Gründer, K., 1995. The yeast spectrum of the 'tea fungus Kombucha, Mycoses, 38 (7-8), 289-295. Mayser, P., Fromme, S., Leitzmann, C., Gründer, K. (1995). The yeast spectrum of the 'tea fungus Kombucha’. Mycoses 38 (7-8), 289-295. Mo, H., Zhu,, Y., Chen, Z., 2008. Microbial fermented tea e a potential source of natural food preservatives, Trends in Food Science and Technology, 19, 124 – 130. Mo, H., Zhu,, Y., Chen, Z. (2008). Microbial fermented tea e a potential source of natural food preservatives. Trends in Food Science and Technology 19, 124 – 130. Nannipieri, P., Ceccanti, B., Grego, S., 1990. Ecological significance of the soil biological activity in soil. In: Soil Biochemistry,. Bollag, J.M. and Stotzky, G. (Eds.). New York: Marcel Dekker. pp. 415-471. Narula, N., Kumar, V., Behl, R.K., Deubel, A., Gransee, A., Merbach, W., 2000. Effect of P-solubilizing Azotobacter chroococcum on N, P, K uptake in Presponsive wheat genotypes grown under greenhouse conditions. Journal of Plant Nutrition and Soil Science 163, 393-398. Öğüt, M., Er, F., 2006. Micronutrient composition of field-grown dry bean and whwat inoculated with Azospirillum and Trichoderma. Journal of Plant Nutrition and Soil Science 169, 699-703. Öztürk, A., Çağlar, Ö., Şahin, F., 2003. Yield response of wheat and barley to inoculation of plant growth promoting rhizobacteria at various levels of nitrogen fertilization. Journal of Plant Nutrition and Soil Science 166, 262-266. Rogers, J.E., Li, S.W., 1985. Effect of heavy metal and other inorganic ions on soil microbial activity: soil dehydrogenase assay as a simple toxicity test, Bulletin of Environmental Contamination and Toxicology 34, 858-865. Rowell, D.L., 1996. Soil Science: Methods and Applications, Longman, UK. Rubenchik L.I. 1960. Azotobacter and its use in agriculture. (Translated from Russian) National Science Foundation, Washington D.C. US Dept of Commerce, Washington 25, D.C. USA. Oldbourne Press, 1-5 Portpool Lane, London, E.C.I. Saravanan, V.S., Madhaiyan, M., Osborne, J., Thangaraju M., Sa, T.M., 2008. Ecological Occurrence of Gluconacetobacter diazotrophicus and Nitrogen-fixing Acetobacteraceae Members: Their Possible Role in Plant Growth Promotion, Microbial Ecology, 55, 130–140. Skujins, J., 1973. Dehydrogenase: An indicator of biological activities in arid soil. Bulletin Ecological Communication (Stockholm) 17, 97-110. Sreeramulu, G., Zhu, Y., Knol, W., 2000. Kombucha fermentation and its antimicrobial activity, Journal of Agricultural and Food Chemistry, 48(6), 25892594. Srinivasan R.,1997. Probable gastrointestinal toxicity of Kombucha tea, Journal of General Internal Medicine, 12, 643-633. Teoh, A. L., Heard, G., & Cox, J., 2004. Yeast ecology of Kombucha fermentation, International Journal of Food Microbiology, 95(2), 119 – 126. 39 Trevors, J.T., 1984. Dehydrogenase activity in siol. A comparison between the INT and TTC assay. Soil Biology and Biochemistry 16, 673-674. Vekemans, X., Godden, B., Penninckx, M.J., 1989. Factor analysis of the relationships between several physico-chemical and microbiological characteristics of some Belgian agricultural soils. Soil Biology and Biochemistry 21, 53-57. Wu, S.C., Yen, G.C., Wang, B.S., Chiu, C.K., Yen, W.j., Chang, L.W., Duh, P.D., 2007. Antimutagenic and antimicrobial activities of pu-erh tea, LWT - Food Science and Technology, 40, 506–512. Wu, S.C., Cao, Z.H., Li, Z.G., Cheung, K.C., Wong, M.H., 2005. Effects of biofertilizer containing N-fixer, P and K solubilizers and AM fungi on maize growth: a greenhouse trial. Geoderma 125, 155–166. Yang, Z.W., Ji, B.P., Zhou, F., Li, B., Luo, Y., Yang, L., Li, T,. 2009. Hypocholesterolaemic and antioxidant effects of kombucha tea in highcholesterol fed mice, Journal of the Science of Food and Agriculture 89, 150– 156. 40 41 EK A: Kombu çay’ın AcmeLabs tarafından yapılan mineral içeriği ve sertifika EKLER 42 43 44 45 46 EK B: Deneme desenleri 47 48 EK C : Sera denemesi sonucu elde edilen bulgular Çizelge C.1 : Topraktan Kombuçay uygulanmasına ait sonuçlar * Kumlu Tın Bünyeli Toprak - Dozlar (ml/saksı) Sap verimi (gr/saksı) Tane verimi (gr/saksı) Tın Bünyeli Toprak - Dozlar (ml/saksı) Kontrol 14,08 10 15,10 20 16,52 30 1,76 Kontrol 15,08 10 16,73 20 18,71 30 20,11 3,12 3,35 3,68 3,83 3,18 3,75 4,18 4,43 1006,00 1078,83 1180,20 1260,04 1036,10 1195,16 1336,38 1436,58 223,56 239,47 262,99 273,67 233,56 267,67 298,30 316,20 Sap verimi (kg/da) Tane verimi (kg/da) * 3 tekerrürün ortalamasıdır. 49 Çizelge C.2: Topraktan Liyofilize edilmiş atık mikroorganizmaların uygulanmasına ait sonuçlar * Kumlu Tın Bünyeli Toprak - Dozlar (gr/saksı) Sap verimi (gr/saksı) Tın Bünyeli Toprak - Dozlar (gr/saksı) Kontrol 14,08 0.25 18,02 0.50 18,62 0.75 18,63 Kontrol 15,08 0.25 16,43 0.50 17,52 0.75 14,32 3,12 4,00 4,14 4,17 3,18 3,61 3,86 3,82 1006,00 1287,44 1330,30 1330,58 1036,10 1173,53 1251,40 1022,86 223,56 285,78 295,37 297,67 233,56 258,06 275,48 273,04 Tane verimi (gr/saksı) Sap verimi (kg/da) Tane verimi (kg/da) * 3 tekerrürün ortalamasıdır. 50 EK D Denemelerden görüntüler Denemenin Kurulduğu Yer (Ondokuz Mayıs Üniversitesi Ziraat Fakültesi Seraları) Deneme Kuruluş hazırlıklarından görüntüler Tohumların ekimi Sulamalardan görüntüler (Her gün tartılmak suretiyle) 51 Yabancı otlar ile mücadele (el ile temizlik ile) Seyreltme (her saksıda 10 adet bitki olacak şekilde el ile seyreltme) Kardeşlenmenin başlangıcı 52 Sapa kalkma dönemi Başaklanmanın başlangıcı Başaklanma Alt yaprakların sararmaya başlaması 53 Hasat öncesi Hasat 54 Ek E: Topraktan uygulanan Kombu çayı ve liyofilize atık Kombu çayı kültürünün toprak solunumu üzerindeki etkisi Kumlu tın bünyeli toprak 0 0,358 ± 0,033 Kombu çayı uygulaması 10 ml/saksı 0,366 ± 0,021 20 ml/saksı 0,351 ± 0,029 30 ml/saksı 0,365 ± 0,019 0 0,358 ± 0,033 Liyofilize atık Kombu çayı 0,25 gr/saksı 0,373 ± 0,025 kültürü uygulaması 0,50 gr/saksı 0,395 ± 0,010 0,75 gr/saksı 0,424 ± 0,011 Rakamlar 3 paralelin ortalaması olup, standart sapmalar ile beraber verilmiştir. Uygulamalar VARYANS ANALİZ TABLOSU VE LSD TESTİ SONUÇLARI Serbestlik Kareler Kareler F-değeri Derecesi Toplamı Ortalaması Tekerrür 2 0,001 0,001 1,676 öd Toprak tipi (T) 1 0,010 0,010 24,670 *** Uygulama şekli (U) 1 0,004 0,004 10,114 ** TxU 1 0,001 0,001 2,405 öd Uygulama dozu (D) 3 0,015 0,005 12,510 *** TxD 3 0,001 0,000 0,875 öd UxD 3 0,002 0,001 1,601 öd TxUxD 3 0,002 0,001 1,757 öd Hata 30 0,012 0,000 Genel 47 0,049 0,001 *** P<0,001, ** P<0,01, * P<0,05, öd: Önemli değil Varyasyon kaynağı 55 Tın bünyeli toprak 0,379 ± 0,006 0,383 ± 0,013 0,391 ± 0,013 0,439 ± 0,029 0,379 ± 0,006 0,403 ± 0,020 0,408 ± 0,006 0,441 ± 0,021 tipi Hata ihtimali 0,2028 0,0001 0,0037 0,1279 0,0001 0,4672 0,2089 0,1757 LSD (%1) 0,016 0,016 0,023 - Ek F: Topraktan uygulanan Kombu çayı ve liyofilize atık Kombu çayı kültürünün toprakların mikrobiyal biyomas karbon içeriği üzerindeki etkisi Kumlu tın bünyeli toprak 0 9,817 ± 1,491 Kombu çayı uygulaması 10 ml/saksı 11,550 ± 0,798 20 ml/saksı 14,905 ± 1,245 30 ml/saksı 15,253 ± 0,454 0 9,817 ± 1,491 Liyofilize atık Kombu çayı 0,25 gr/saksı 9,354 ± 0,539 kültürü uygulaması 0,50 gr/saksı 11,280 ± 1,034 0,75 gr/saksı 13,154 ± 0,770 Rakamlar 3 paralelin ortalaması olup, standart sapmalar ile beraber verilmiştir. Uygulamalar VARYANS ANALİZ TABLOSU VE LSD TESTİ SONUÇLARI Varyasyon kaynağı Serbestlik Kareler Kareler F-değeri Derecesi Toplamı Ortalaması Tekerrür 2 3,029 1,514 2,031 öd Toprak tipi (T) 1 0,0106 0,106 0,143 öd Uygulama şekli (U) 1 16,922 16,922 22,692 *** TxU 1 7,530 7,530 10,098 ** Uygulama dozu (D) 3 75,757 25,252 33,863 ** TxD 3 15,202 5,067 6,796 ** UxD 3 7,616 2,539 3,404 * TxUxD 3 3,146 1,049 1,406 öd Hata 30 22,371 0,746 Genel 47 151,679 3,227 *** P<0,001, ** P<0,01, * P<0,05, öd: Önemli değil 56 Tın bünyeli toprak 11,247 ± 0,947 11,483 ± 0,163 12,670 ± 1,166 13,308 ± 0,193 11,247 ± 0,947 11,369 ± 0,523 11,824 ± 0,565 12,711 ± 0,334 tipi Hata ihtimali 0,1472 0,7080 0,0001 0,0037 0,0000 0,0015 0,0297 0,2595 LSD (%1) 0,686 0,969 0,969 1,371 1,371 - Ek G: Topraktan uygulanan Kombu çayı ve liyofilize atık Kombu çayı kültürünün toprakların dehidrogenaz aktivitesi üzerindeki etkisi Kumlu tın bünyeli toprak 0 4,849 ± 0,524 10 ml/saksı 6,712 ± 0,363 20 ml/saksı 6,817 ± 1,211 30 ml/saksı 4,005 ± 1,162 Liyofilize atık Kombu çayı 0 4,849 ± 0,524 kültürü uygulaması 0,25 gr/saksı 9,277 ± 0,400 0,50 gr/saksı 12,087 ± 1,538 0,75 gr/saksı 13,533 ± 1,763 Rakamlar 3 paralelin ortalaması olup, standart sapmalar ile beraber verilmiştir. VARYANS ANALİZ TABLOSU VE LSD TESTİ SONUÇLARI Varyasyon kaynağı Serbestlik Kareler Kareler F-değeri Derecesi Toplamı Ortalaması Tekerrür 2 14,675 7,337 0,693 öd Toprak tipi (T) 1 2124,782 2124,782 200,585 *** Uygulama şekli (U) 1 807,175 807,175 76,200 *** TxU 1 178,842 178,842 16,883 *** Uygulama dozu (D) 3 2184,724 728,241 68,748 *** TxD 3 1220,633 406,878 38,410 *** UxD 3 698,258 232,753 21,973 *** TxUxD 3 237,766 79,255 7,482 *** Hata 30 317,787 10,593 Genel 47 7784,641 165,631 *** P<0,001, ** P<0,01, * P<0,05, öd: Önemli değil Uygulamalar Kombu çayı uygulaması 57 Tın bünyeli toprak 3,578 ± 1,163 14,127 ± 2,555 32,905 ± 10,912 9,558 ± 2,172 3,578 ± 1,163 24,120 ± 1,554 39,291 ± 4,280 41,426 ± 1,834 tipi Hata ihtimali 0,5123 0,0000 0,0000 0,0005 0,0000 0,0000 0,0000 0,0010 LSD (%1) 2,584 2,584 3,654 3,654 5,167 5,167 7,308 Ek H: Topraktan uygulanan Kombu çayı ve liyofilize atık Kombu çayı kültürünün toprakların katalaz aktivitesi üzerindeki etkisi Kumlu tın bünyeli toprak 0 4,452 ± 0,035 Kombu çayı uygulaması 10 ml/saksı 79,436 ± 14,024 20 ml/saksı 90,240 ± 9,024 30 ml/saksı 190,333 ± 11,361 0 4,452 ± 0,035 Liyofilize atık Kombu çayı 0,25 gr/saksı 53,869 ± 12,032 kültürü uygulaması 0,50 gr/saksı 71,818 ± 5,280 0,75 gr/saksı 190,203 ± 18,194 Rakamlar 3 paralelin ortalaması olup, standart sapmalar ile beraber verilmiştir. Uygulamalar VARYANS ANALİZ TABLOSU VE LSD TESTİ SONUÇLARI Varyasyon kaynağı Serbestlik Kareler Kareler F-değeri Derecesi Toplamı Ortalaması Tekerrür 2 1859,419 94,710 0,811 öd Toprak tipi (T) 1 131,775 131,755 1,129 öd Uygulama şekli (U) 1 3056,260 3056,260 26,180 *** TxU 1 8740,631 8740,631 74,872 *** Uygulama dozu (D) 3 101240,076 33746,692 289,075 *** TxD 3 21259,370 7086,457 60,703 *** UxD 3 4036,292 1345,431 11,525 *** TxUxD 3 3475,178 1158,393 9,233 *** Hata 30 3502,211 116,740 Genel 47 145631,212 3098,536 *** P<0,001, ** P<0,01, * P<0,05, öd: Önemli değil 58 Tın bünyeli toprak 49,774 ± 4,916 59,964 ± 6,733 60,559 ± 17,358 72,956 ± 9,470 49,774 ± 4,916 96,942 ± 10,548 101,275 ± 7,002 167,052 ± 17,030 tipi Hata ihtimali 0,4574 0,2969 0,0001 0,0000 0,0000 0,0000 0,0001 0,0002 LSD (%1) 8,577 12,130 12,130 17,155 17,155 24,260 ÖZGEÇMİŞ Adı Soyadı : Murat DURMUŞ Doğum Yeri ve Tarihi : GİRESUN / 07.11.1985 Adres : Ondokuz Mayıs Üniversitesi Ziraat Fakültesi Toprak Bilimi ve Bitki Besleme Bölümü Atakum / SAMSUN E posta : murat.durmus@omu.edu.tr Lisans : Ondokuz Mayıs Üniversitesi Ziraat Fakültesi Toprak Bilimi ve Bitki Besleme Bölümü (2009) Mesleki Deneyim ve Ödüller : Dizayn Grup AR-GE Araştırıcı Personel (2010-2012) Yayınlar : Dengiz O., Kizilkaya R., Erkoçak A., Durmuş M., Variables of microbial response in natural soil aggregates for soil characterization in different fluvial land shapes, Geomicrobiology Journal,2012. Dengiz O., Erel A., Erkoçak A., Durmuş M., Kuşkonağı Havzası Temel Toprak Özellikleri, Sınıflandırılması ve Haritalanması, Ege Univ. Ziraat Fak. Derg., 2012, 49 (1): 71-82, 2012. Durmuş M., Erkoçak A., Kizilkaya R., Dengiz O., Toprak ve Su Sempozyumu-2011. Kızılkaya R., Dengiz O., Alparslan T., Durmuş M., Işıldak V., Aksu S., Changes of soil microbial biomass C and basel soil respiration in different land use and land cover, İnternational soil science congress on ‘’ Management of natural resources to sustain soil health and quality’’,2010. Kizilkaya R., , Turkay H. F. Ş., Turkmen C., Durmus M., Vermicompost effects on wheat yield and nutrient contents in soiland plant,Journal of Archives of Agronomy and Soil Science, 2012. 59 Saygin F., Durmus M., Sarioglu F. E., Dengiz O., Kizilkaya R., Some physico chemical properties and catalase enyzme activity level of soils formed on two different parent material, International scientific- practical conference ‘’Rational use of soil resources and soil ecelogy’’ Almaty, Kazakhstan, 2012. 60