Uploaded by silaw66774

تحليل كروموتغرافى

advertisement
‫ءا‬
‫ا‬
Prof. Entsar I. Rabea
Department of Plant Protection
Faculty of Agriculture,
Damanhour University,
E-mail: entsar_ibrahim@yahoo.com
‫ا‬
‫ءا‬
Colorimetric Methods 9, ‫ ق ا‬V 7 2 3 ‫ س ا‬0
‫ا‬
‫ا‬
‫ط قا‬
Visual Colorimetric Methods
Standard Series Method !
8K9, ‫رن‬
56 T ‫وى‬
?H ً‫ا‬F G D = ‫م و‬, BC ?@) 5 ‫=<; ا‬4‫و‬
‫ل ا‬,
‫"ا‬
9 7,89‫ أ‬56 ‫ه‬2 3 4 ‫ س‬0 ‫اد‬
‫ا‬
‫ل ا‬,
!
‫ط‬-
‫* ا‬+, ( )
‫ ا‬Q R ً ‫ و‬C ‫ل‬,K@ ‫ ا‬2 3 ‫ ا‬8 B ‫ و‬2 3 ‫ ا‬C, BC ‫ن‬, ‫ ا‬O<P < = ‫ ت ا‬6 N ‫ ا‬LC
. ‫ن‬, ‫ ا‬6 N3
25 ml
50 ml
100 ml
‫ط قا‬
‫ا‬
‫ا‬
‫‪Visual Colorimetric Methods‬‬
‫‪Duplication Method‬‬
‫ا‬
‫ط‬‫‪ #‬ة أو‬
‫وى ا ان !‬
‫و‬
‫ل ا‬
‫ا‬
‫ھ ه ا‬
‫وھ ا (' أ*) ‪ - &+',‬وى ‪ . /‬ا ان ن‬
‫لا‬
‫‪ %& %‬ا‬
‫‪#‬‬
‫&‪ -‬و ن ‪ - 4 5‬وى‬
‫ل ا‬
‫‪ . /‬ا دة ا ‪ ، 23‬و ‪ . /‬ا‬
‫ً‬
‫* > ا @ وف‬
‫ا‪ -! 6 7-&8‬وى ‪ 9 ,‬ا ان ‪ +',‬و ‪ :‬ا * ! ; رأ‬
‫ا‪. A B‬‬
‫‪Dilution Method‬‬
‫ا‬
‫ط‬‫أ*‪ -& % -! D‬و ‪%‬‬
‫ل ا‬
‫وا‬
‫‪ :‬ا ( ' ا ‪23‬‬
‫‪45‬‬
‫أن ‪9! -‬‬
‫ا ن ا ‪+‬ا‪ %/‬ا‬
‫‪ G‬و ‪H-‬‬
‫ً &‪ %‬ا‬
‫و ‪ E5F‬ا ن أ‬
‫ا‬
‫‪ . / + + %I‬ا ‪ 23‬ل‪.‬‬
‫ا * ن – و!‪ * # 9 D -‬ن !‬
Visual Colorimetric Methods
‫ا‬
‫ا‬
‫ط قا‬
Balancing Method ‫ان‬24[‫ا‬
:!(,-‫ ان و‬+‫ا‬
‫ أ)('ة‬$% ‫أ"!س‬
‫لو‬
‫ا‬
‫ط‬
‫وھ ط‬
Dubosque Colorimeter Q!,8 ‫ ز د‬KG
C 1 L1 = C 2 L2
Hehner Cylinders
‫ھ‬
5d,e ‫ة ا س ا‬2KGc7 59, ‫" ا‬
‫ط قا‬
Photometric Instruments
‫ى‬FC ‫ر‬F
‫ى‬R ‫ن وا‬, ‫س‬
Photoelectric cell
‫ ف ا‬i ‫" ا‬N 4 5 ‫ ا @ دة وا‬L B ‫ال ا‬F8 !‫ة ? ا‬2KGg‫ه ا‬R‫ ھ‬56‫و‬
7 K3 d,+
=7 5l=i ‫ ا‬cV= ‫ وا‬kB ‫* ا) [ت ا‬C L 9, ‫ة‬Fj ‫ وى‬4
monochromator
sample cell
slit
diffraction grating
.‫ ة‬j 8C ‫ء‬,e ‫ة ا‬Fj ‫ س‬7 m
light source
4( 7
detector
‫ا‬
‫و)!ة‬
‫‪234‬‬
‫و)!ة‬
‫‪ 1‬س‬
‫ط‪1‬‬
‫ا‪#$%‬‬
‫‪ 9,‬ت ا‪2KGg ! !g‬ة ا‬
‫و)!ة و‪./‬‬
‫ا‪#‬‬
‫‪+‬‬
‫س ا ‪5d,e‬‬
‫و)!ة ا‬
‫ا‪%‬ط ال ا‬
‫'&‬
‫‪,‬‬
‫ا ‪ 6!#‬ت‬
‫"!ر‬
‫ا‪#$%‬‬
5d,e ‫س ا‬
‫ة ا‬2KGg ! !g‫ ت ا‬9,
‫ا‬
Light Source :od,+ ‫ر‬FlC -1
Wave Length Selector :oG, ‫ل ا‬,V ‫د ا‬F C -2
Cuvette : P B ‫ ا‬7,89‫ أ‬-3
Detector :R6 P ‫ء ا‬,e ‫ ا‬5 w ‫ ف‬B ‫ة ا‬F)‫ و‬-4
Recorder :" @ ‫ة ا‬F)‫ و‬-5
5d,e ‫س ا‬
‫ة ا‬2KGg ! !g‫ ت ا‬9,
‫ا‬
Light Source :‫ء‬,e ‫ر ا‬FlC
.(5d
‫)ا‬
.(UV)
‫ أو‬Globar
, ‫ ح‬A" ‫!م‬
3
C,9 9 900 5 ‫ إ‬340 LC ‫اه‬FC oG,C ‫ل‬,‫ ط‬K Bj‫ر ا‬Fl4 L @P ‫ دة ا‬C LC 8 •
C,9 9 400 5 ‫ إ‬200 LC ‫اه‬FC oG,C ‫ل‬,‫ ط‬K Bj‫ر ا‬Fl4 ‫م‬,
‫دة‬
‫ ن‬+ ‫' ون‬
15-2 9 ‫اء‬
‫ا‬7 4
Nernest Glower 73
Deuterium Lamp for UV
Spectrophotometer
F ‫ دة ا‬C LC 8 •
#$%‫ ل ا‬2 •
C‫ھ‬
Tungsten Lamp
‫!م‬
3
5d,e ‫س ا‬
‫ة ا‬2KGg ! !g‫ ت ا‬9,
‫ا‬
Wave Length Selector :oG, ‫ل ا‬,V ‫د ا‬F C
o ,‫ ط‬ƒj T7 2G ) 8w ‫ر‬
?4 ، < =C G,C ‫ال‬,‫ اط‬5 ‫ء إ‬,e ‫" ا‬
oG G2 ‫ر ا‬,iP ‫م ا‬F=
.D0 ‫ء ا‬,e ‫ ر ا‬C F F
‫ا‬
‫‪ 9,‬ت ا‪2KGg ! !g‬ة ا‬
‫أ‪ 7,89‬ا ‪Sample Cuvette : P B‬‬
‫ازي ‪F G 3‬ت‬
‫‪'$‬‬
‫‪! 34‬م أ ‪A‬‬
‫ل‬
‫)‪L 4 (&64x &61x &61‬‬
‫ا‪#‬د ‪H‬‬
‫‪9‬‬
‫ا‪#‬‬
‫اد ‪O P 4 + #‬ه؛ و‪ . "4‬أ ‪A‬‬
‫ا‬
‫‪U‬‬
‫ا ' ار‪ O4‬أو ا ‪ ,O‬ج أو ا ‪ R 6FA‬ا ‪ T‬ف‬
‫وة‪.‬‬
‫ا‬
‫ــ‪ 9‬ا ' ـ ار‪(SiO2) O4‬‬
‫‪ 34‬ـ !م ا ‪ F‬ـ ا " ـ‬
‫وا‪ + #$%‬ق ا ‪، 23 A‬‬
‫ءا‬
‫‪2‬لا‬
‫‪+‬‬
‫‪Y‬‬
‫‪ 9‬ا‪F %‬ح ا "‬
‫‪! 34‬م ا ‪ F‬ا '‬
‫‪ +‬ر ـــ! ا "ـــ د م ‪ + ،‬ر ـــ! ا ' ‪3‬ـــ م‪ ،‬و ـــ!‬
‫ـــ‬
‫ا "ـــ د م‪ ،‬و ـــ! ا ‪6 4 A‬ـــ م ‪+‬ـــ ا‬
‫اء‪،‬‬
‫‪! 6‬ام ا‪ 7 4 #$%‬ا‬
‫و‪ +‬ا‪O ,%‬ة ر[ " ا ‪! 34 9 Y‬م أ) ً أ \‬
‫‪ #‬ت‪.‬‬
‫ا‪ A [%‬ر ا ‪ #‬د ‪F P‬‬
‫س ا ‪5d,e‬‬
5d,e ‫س ا‬
‫ة ا‬2KGg ! !g‫ ت ا‬9,
‫ا‬
Detector :R6 P ‫ء ا‬,e ‫ ا‬5 w ‫ ف‬B ‫ة ا‬F)‫و‬
L
5 ) ، d 7 K3 0 ‫ ط‬5 ‫ت إ‬R<9 o ‫ ا‬Bjg‫ ت ا‬9,4,6 " , 7 ‫م‬, 4 d,+‫ و‬K3 † Lw ‫ رة‬8w
.R6 P ‫ء ا‬,e ‫ ا‬3 F 4
Photomultiplier tube
(PMT)
Metal base plate
Selenium Layer
Theoretical barrier layer
Transparent metal layer
Collective ring
Light-Sensitive Devices ‫ء‬
P 1‫ط‬
‫ا‬
‫ ا‬1G‫ا‬
‫م‬
63
‫ة ا‬O ,%‫ا‬
4 ^ ) :Photocells
Barrier-layer Cell ‫زة‬
‫ا‬
‫ ا‬F
‫اط‬
‫ا‬
`A$ ‫ دة‬9 ً‫!ا‬,
1‫ر‬
A‫ط‬
\6 ! ! ‫ ا‬9
!# aG3 9
‫ ' نا‬4
ً‫!ا‬,
AG A6
‫ه ا دة ا‬b‫ ھ‬Gc4 &H Selenium ‫م‬
3 ‫ ا‬9 ‫دة‬
‫ وھ‬Semiconductor
`AT ‫ا‬
AG ‫ل ا‬F[ ‫ ' و ت ا رة‬d‫ ا‬. ,
#4 ^
‫ر‬
_ Silver
‫ا‬9
+ $‫و‬
\G P ! ! ‫ا‬
A‫ط‬
#4 P ،Cathode) Collector electrode) . , ‫ ' ود‬P
#4 ‫_ أى‬
‫سا ر‬
f ‫ ط‬9 ‫ول‬%‫\ ا‬G
_ (Anode)
H
_
1‫ر‬
Photoemissive Cell
‫و‬
‫ثا‬
‫ا‬
Spectrophotometers
< ‫ء ط‬,e ‫ة ا‬2KG‫أ‬
Single Beam Instruments d,e ‫ ا‬C2 ‫ة أ) د ا‬2KGg‫ ا‬-‫ا‬
,K@ ‫ ا‬P B ‫* ا‬+,4
‫ه ا‬R‫ ھ‬56‫ و‬، 7 H ‫ة‬Fj ‫ة ذات‬F)‫ وا‬d,+ C2) ‫ة‬2KGg‫ه ا‬R‫ ھ‬56 ‫م‬F= 4
.5 ‫ا‬, ‫ ا‬5 w G, ‫ء أ) د ا‬,e ‫ ا‬C2) ‫ ر‬C 56 (k R ‫ )ا‬9‫ر‬
‫ ا‬P w‫ و‬K! 0 ‫اد‬
‫ا‬
Double Beam Instruments d,e ‫ ا‬C2 ‫ ا‬G‫دو‬2C ‫ة‬2KGg‫ ا‬-‫ب‬
‫ل‬‰† ‫اھ‬F)‫ا‬
( 7 ‫ة‬Fi ‫ ا‬56 L ‫و‬
C L w Bj 5 ‫ا‬
. 9‫ر‬
d,e ‫ ا‬C2 ‫ ? ا‬4 ‫ة‬2KGg‫ه ا‬R‫ ھ‬56‫و‬
‫ ا‬P w ‫ل‬‰† †Š‫ا‬
‫ و‬,K@ ‫ ا‬P B ‫ا‬
Spectrophotometers
< ‫ء ط‬,e ‫ة ا‬2KG‫أ‬
Single Beam Spectrophotometer
Double Beam Spectrophotometer
‫ﺘﻌﻴﻴن ﺘرﻜﻴز ﻤﺎدة ﻤﺠﻬوﻝﺔ ﺒﺎﻝطرﻴﻘﺔ اﻝﻠوﻨﻴﺔ‪:‬‬
‫• اﻷﺴﺎس ﻓﻰ ﻋﻤﻠﻴﺔ اﻝﺘﻘدﻴر اﻝﻠوﻨﻰ ﻫو طرﻴﻘﺔ اﻝﻤﻨﺤﻨﻰ اﻝﻘﻴﺎﺴﻰ ‪ Calibration curve method‬ﺤﻴث ﻴﺴﺘﺨدم ﻫذا اﻝﻤﻨﺤﻨﻰ ﻋﻨد‬
‫اﻝﺸروع ﻓﻰ ﺘﻘدﻴر ﻋدد ﻜﺒﻴر ﻤن اﻝﻌﻴﻨﺎت ﺒواﺴطﺔ اﻷﺠﻬزة اﻝﻀوﺌﻴﺔ وﻴوﻀﺢ ﻫذا اﻝﻤﻨﺤﻨﻰ اﻝﻌﻼﻗﺔ ﺒﻴن ﺘرﻜﻴز اﻝﻤﺤﺎﻝﻴل اﻝﻘﻴﺎﺴﻴﺔ ﻤن اﻝﻤﺎدة‬
‫ﻤوﻀﻊ اﻝﺘﻘدﻴر ودرﺠﺔ اﻻﻤﺘﺼﺎص ‪ (Absorbance (A‬أو اﻝﻨﺴﺒﺔ اﻝﻤﺌوﻴﺔ ﻝﻠﻨﻔﺎذﻴﺔ ‪ ،(Transimittance percentage (%T‬ﺤﻴث ﻴﺘم‬
‫رﺴم اﻝﻌﻼﻗﺔ ﺒﻴﺎﻨﻴﺎً ﻜﻤﺎ ﻫو ﻤوﻀﺢ ﺒﺎﻝﺸﻜل )‪.(17-7‬‬
‫ﺸﻜل )‪ :(17-7‬ﻤﻨﺤﻨﻰ ﻗﻴﺎﺴﻰ ﻴوﻀﺢ اﻝﻌﻼﻗﺔ ﺒﻴن اﻝﺘرﻜﻴز واﻻﻤﺘﺼﺎص وﻜذﻝك ﺒﻴن اﻝﺘرﻜﻴز و ‪ %‬ﻝﻠﻨﻔﺎذﻴﺔ‬
‫وﻫﻨﺎ ﻴﺠب ﺘﺤﻀﻴر اﻝﻤﺤﺎﻝﻴل اﻝﻘﻴﺎﺴﻴﺔ ﺒﻨﻔس طرﻴﻘﺔ ﺘﺤﻀﻴر اﻝﻌﻴﻨﺎت اﻝﻤﺠﻬوﻝﺔ اﻝﺘرﻜﻴز‪ ،‬أى ﻴﺠب أن ﺘﻀﺎف ﺠﻤﻴﻊ اﻝﻤﺤﺎﻝﻴل‬
‫اﻝﻤﺴﺘﺨدﻤﺔ ﻓﻰ ﺘﺤﻀﻴر اﻝﻌﻴﻨﺎت اﻝﻤﺠﻬوﻝﺔ ﺜم ﺘؤﺨذ ﻝﻬﺎ ﻗراءات درﺠﺎت اﻻﻤﺘﺼﺎص أو اﻝﻨﻔﺎذﻴﺔ واﻝﺘﻰ ﺘوﻗﻊ ﻤﻘﺎﺒل اﻝﺘرﻜﻴز ﻋﻠﻰ‬
‫ورق رﺴم ﺒﻴﺎﻨﻰ‪ ،‬وﻴﻤﻜن ﻤن ﺨﻼل ﻫذا اﻝرﺴم اﻝﺒﻴﺎﻨﻰ اﻴﺠﺎد ﻤﻴل اﻝﺨط ‪ Slope‬ﺤﻴث أن اﻝﻤﻴل ﻴﺴﺎوى ﻗﻴﻤﺔ اﻝﺜﺎﺒت ‪ K‬ﻓﻰ‬
‫ﻗﺎﻨون ﺒﻴﻴر )اﻝطرﻴﻘﺔ اﻝﺒﻴﺎﻨﻴﺔ ‪ (Graphical method‬أو ﻴﻤﻜن اﻴﺠﺎد اﻝﺜﺎﺒت ﺒﺎﻝطرﻴﻘﺔ اﻝﺤﺴﺎﺒﻴﺔ ‪Calculation method‬‬
‫ﻋن طرﻴﻘﺔ ﺤﺴﺎب ﻗﻴﻤﺔ اﻝﺜﺎﺒت ﻝﻜل ﺘرﻜﻴز ﻤن اﻝﻤﺤﺎﻝﻴل اﻝﻘﻴﺎﺴﻴﺔ اﻝﻤﺤﻀرة ﻝﻌﻤل اﻝﻤﻨﺤﻨﻰ اﻝﻘﻴﺎﺴﻰ ﺜم اﻴﺠﺎد ﻗﻴﻤﺔ اﻝﻤﺘوﺴط‬
‫ﻝﻠﺜﺎﺒت ‪.K‬‬
‫أو ﺒﺎﻝطرﻴﻘﺔ اﻻﺤﺼﺎﺌﻴﺔ ‪ Statistical method‬ﻋن طرﻴق اﻝﻤﻌﺎدﻝﺔ اﻝﺘﺎﻝﻴﺔ‪:‬‬
‫‪n∑X∑Y − ∑X∑Y‬‬
‫‪2‬‬
‫) ‪n ∑ X 2 − (∑ X‬‬
‫ﺤﻴث‬
‫‪ = n‬ﻋدد اﻝﻤﻜررات‬
‫‪ =X‬اﻝﺘرﻜﻴز‬
‫‪ =Y‬اﻻﻤﺘﺼﺎﺼﻴﺔ أو اﻝﻜﺜﺎﻓﺔ اﻝﻀوﺌﻴﺔ‬
‫=‪k‬‬
Download