ISOLASI PROTEIN
PROSEDUR ISOLASI PROTEIN DENGAN PROBE 0,6:
1. Potongan jaringan dengan berat sekitar 0,5gr ditaruh dalam microtube volume 1,5ml
yang berisi PBS 500 µL
2. Dimasukkan dalam freezer -20˚C, dibiarkan selama 24 jam
3. Disiapkan tabung valcon dengan volume 50ml, dipotong pada ukuran 25ml
4. Disiapkan es serut
5. Diambil PBS dari kulkas dan sampel dari frezzer, ditaruh dalam cool box yang telah
berisi es serut
6. Becker glass volume 250ml diisi es serut dan disemprot alcohol 96%
7. Diambil sampel dan ditaruh dalam tabung valcon , ditambah 500µL PBS dingin
8. Tabung valcon ditaruh ditengah es serut dalam becker glass
9. Becker glass ditaruh pada meja didalam alat ultrasonic
10. Disesuaikan dengan kedalaman dan probe agar bisa menyentuh jaringan tapi tidak terlalu
di dasar tabung valcon
11. Alat disetting selama 2 menit, probe bekerja 9 detik, istirahat 1 detik
12. Lanjut OK
13. Alat akan berbunyi bertanda probe bersentuhan dengan jaringan
14. Setelah selesai alat akan berhenti dan berbunyi
15. Disiapkan microtube yang baru dan diberi kode
16. Dikeluarkan tabung valcon dan diambil cairan keruh dengan micropipet dengan volume
500µL
17. Dimasukkan dalam microtube volume 1,5mL dan ditaruh dalam cool box yang berisi es
serut
18. Setelah semua sampel dikerjakan seperti langkah No.6-17, dilanjutkan centrifuge selama
10 menit 12000rpm
19. Disiapkan microtube yang baru dan diberi kode
20. Supernatan diambil dan dimasukkan dalam microtube yang telah disiapkan
21. Ditaruh dalam cool box
22. Sampel disimpan dalam freezer -20˚C sebelum dilakukan pemeriksaan selanjutnya
ISOLASI PROTEIN
PROSEDUR ISOLASI PROTEIN DENGAN PROBE 0,1:
1. Potongan jaringan dengan berat sekitar 250mgr ditaruh dalam microtube volume 1,5ml
yang berisi PBS 500 µL
2. Dimasukkan dalam freezer -20˚C, dibiarkan selama 24 jam
3. Disiapkan es serut
4. Diambil PBS dari kulkas dan sampel dari frezzer, ditaruh dalam cool box yang telah
berisi es serut
5. Becker glass volume 250ml diisi es serut dan disemprot alcohol 96%
6. Diambil microtube yang berisi sampel ditaruh ditengah es serut dalam becker glass
7. Becker glass ditaruh pada meja didalam alat ultrasonic
8. Disesuaikan dengan kedalaman dan probe agar bisa menyentuh jaringan tapi tidak terlalu
di dasar microtube
9. Alat disetting selama 1 menit, probe bekerja 9 detik, istirahat 1 detik
10. Lanjut OK
11. Alat akan berbunyi bertanda probe bersentuhan dengan jaringan
12. Setelah selesai alat akan berhenti dan berbunyi
13. Disiapkan microtube yang baru dan diberi kode
14. Dikeluarkan tabung valcon dan diambil cairan keruh dengan micropipet dengan volume
500µL
15. Dimasukkan dalam microtube volume 1,5mL dan ditaruh dalam cool box yang berisi es
serut
16. Setelah semua sampel dikerjakan seperti langkah No.6-16, dilanjutkan centrifuge selama
10 menit 12000rpm
17. Disiapkan microtube yang baru dan diberi kode
18. Supernatan diambil dan dimasukkan dalam microtube yang telah disiapkan
19. Ditaruh dalam cool box
20. Sampel disimpan dalam freezer -20˚C sebelum dilakukan pemeriksaan selanjutnya