Antioksidan adalah senyawa yang dapat menghambat spesies oksigen reaktif, spesies nitrogen reaktif, dan radikal bebas lainnya untuk mencegah kerusakan sel normal. Tubuh manusia secara berkala menghasilkan senyawa radikal sehingga penangkal radikal bebas pun akan dihasilkan melalui peristiwa metabolisme sel normal dan peradangan. HPTLC Finger Print Profile and in vitro Antioxidant Activity of Gomphrena globosa L. Flowers Aktivitas antioksidan ekstrak tumbuhan ditentukan oleh berbagai in vitro model seperti aktivitas antioksidan total19, Mengurangi uji daya20, dan aktivitas pemulungan radikal bebas DPPH. Dalam penelitian ini, fitokonstituen ekstrak metanol dari Gomphrena globosa dianalisis secara kualitatif dan hasilnya menunjukkan adanya karbohidrat, tanin, saponin, flavonoid, kuinon, glikosida, terpenoid, fenol, kumarin, steroid dan fitosteroid dan tidak adanya alkaloid, phlobatannin dan antrakuinon. Diusulkan bahwa aktivitas antioksidan ekstrak tumbuhan mungkin berhubungan dengan flavonoid. Aktivitas Antioksidan Total Tabel 5 menunjukkan aktivitas antioksidan total dari tiga konsentrasi berbeda (100, 200 dan 300 g /ml) ekstrak metanol dari Gomphrena globosa bunga-bunga. Persentase aktivitas antioksidan ekstrak tumbuhan adalah 30,6, 35,9 dan 40,7 masing-masing untuk 100, 200 dan 300 g /ml. Untuk konsentrasi standar yang sama asam askorbat, persentase aktivitas adalah 45,68, 51,69 dan 54.53. IC50 nilai untuk ekstrak tumbuhan dan obat standar adalah 200 g/ml. Kapasitas antioksidan total dengan metode uji Fosfo molibdenum telah digunakan secara rutin dan didasarkan pada reduksi Mo (VI) menjadi Mo (V) oleh analis sampel dan pembentukan kompleks fosfat/Mo (V) hijau selanjutnya pada pH asam. Metode fosfor molibdenum bersifat kuantitatif karena aktivitas antioksidan total dinyatakan sebagai jumlah ekuivalen asam askorbat.36. Temuan penelitian kami menunjukkan bahwa ekstrak tumbuhan menunjukkan aktivitas antioksidan yang kurang dari standar. Mengurangi Uji Daya Kemampuan pereduksi ekstrak berfungsi sebagai indikator signifikan dari aktivitas antioksidan potensial. Untuk uji daya reduksi, ekstrak tumbuhan dan asam askorbat standar digunakan pada kisaran dosis 100-300μg/ml (Tabel 6). Persentase daya reduksi ekstrak meningkat dari 100 g/ml (23,07%) diikuti oleh 200 g/ml (41,17%) dan 300μg/ml (58,81±0,90) dan untuk asam askorbat standar, persentasenya adalah 38,68, 47,22 dan 62,80 masing-masing untuk 100, 200 dan 300 g/ml. IC50 nilai ekstrak tumbuhan adalah 200 g/ml dan obat standar adalah 230 g/ml. Kapasitas pereduksi suatu senyawa dapat berfungsi sebagai indikator signifikan dari aktivitas antioksidan potensialnya. Kemampuan mereduksi umumnya dikaitkan dengan adanya redukton, yang memutus rantai radikal bebas dengan menyumbangkan atom hidrogen.37. Aktivitas daya reduksi sering digunakan untuk mengevaluasi kemampuan antioksidan alami dalam mendonorkan elektron38,39. Banyak laporan telah mengungkapkan bahwa ada korelasi langsung antara aktivitas antioksidan dan daya reduksi ekstrak tumbuhan tertentu40,41,38. Dalam penelitian ini, daya reduksi ekstrak bungaGomphrena globosa meningkat secara konsisten dengan peningkatan volume ekstrak dari 100μg menjadi 300μg dan ekstrak menunjukkan daya reduksi sedang bila dibandingkan dengan asam askorbat standar. Kegiatan Pemulungan DPPH Tabel 7 menunjukkan hasil aktivitas penangkap radikal DPPH pada konsentrasi yang berbeda (100, 200 dan 300 g/ml) ekstrak metanol dari Gomphrena globosa bunga-bunga. Di antara tiga konsentrasi, % penghambatan tertinggi (70,3%) ditemukan pada 300 g. Aktivitas sedang ditemukan pada 200 g(60,3%) dan aktivitas paling sedikit diamati pada 100 g (45,7%). Demikian pula, aktivitas penangkapan radikal asam askorbat juga diamati untuk 100 g/ml (53,06%), 200 g/ml (69,36%) dan 300 g/ml (79,30%). Dari hasil tersebut didapatkan respon dose dependent, yaitu konsentrasi ekstrak meningkat, aktivitas scavenging juga meningkat. IC 50 nilai ekstrak tumbuhan adalah 140 g/ml dan obat standar adalah 190 g/ml. Stabilitas yang baik, sensitivitas yang kredibel, kesederhanaan, dan kelayakan adalah keuntungan dari pengujian DPPH42-44. Tes ini sering digunakan untuk mengevaluasi kemampuan antioksidan untuk mengais radikal bebas dari sampel yang disediakan, dimana radikal bebas karena kerusakan biologis melalui stres oksidatif dan proses tersebut menyebabkan banyak gangguan seperti gangguan neurodegeneratif, kanker dan AIDS.45. Oleh karena itu, uji DPPH merupakan metode yang efektif untuk mengukur daya scavenging mereka. Prinsip DPPH didasarkan pada perubahan warna dari ungu (larutan DPPH) menjadi kuning46. Perubahan warna dapat diukur secara kuantitatif pada absorbansi 517nm. Dalam penelitian ini, ekstrak bunga metanol menunjukkan aktivitas pendinginan radikal tergantung dosis yang lebih tinggi. Konsentrasi 100 g/ml menunjukkan aktivitas penangkap radikal sedang (45,70%) dibandingkan asam askorbat (53,06%) dan pola tersebut berlanjut hingga 300 g/ml. Hasil penelitian ini menyimpulkan bahwa ekstrak tumbuhan menunjukkan sifat antioksidan yang kuat dalam dosis tergantung pada semua model yang konsisten dengan pengamatan sebelumnya.47,48. Flavonoid tanaman diklasifikasikan sebagai metabolit sekunder yang paling melimpah, dengan sifat antioksidan tinggi, yang dapat berkontribusi untuk mengurangi stres oksidatif49-51. Penelitian sebelumnya telah melaporkan bahwa ekstrak dibuat dari seluruh tanamanG.globosa memiliki potensi antioksidan dan sitotoksik52. Sakia dan Upadhayaya, (2011) juga menyarankan bahwa daun G. globosa memiliki fenol dan flavonoid dan menunjukkan aktivitas antioksidan. KESIMPULAN Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak bunga Gomphrena globosa menunjukkan aktivitas antioksidan terbesar. Kehadiran quercetin meningkatkan potensi antioksidan yang efektif dari tanaman. Hasilnya mendukung Gomphrena globosa dapat digunakan sebagai sumber senyawa antioksidan yang aman dan alami untuk mengobati penyakit kronis. Antioxidant potential and cytotoxic assay of ethanol extract of Gomphrena globosa L. flower Antioksidan secara luas dapat didefinisikan sebagai zat yang menghambat kerusakan oksidatif pada molekul target. Antioksidan dapat menghambat oksidasi substrat sehingga dapat mencegah kerusakan sel ketika terjadi reaksi kimia yang melibatkan radikal bebas. Karakteristik antioksidan adalah kemampuannya untuk menjebak radikal bebas. Antioksidan berperan penting dalam menetralkan spesies radikal bebas [3]. Antioksidan alami dianggap aman dan mengandung senyawa bioaktif. Antioksidan dari sumber alam merupakan alternatif antioksidan sintetik yang dapat menetralisir radikal bebas. Dalam beberapa tahun terakhir, berbagai jenis tumbuhan telah digunakan dalam sediaan obat dan dikonsumsi sebagai makanan karena kemampuannya sebagai antioksidan. Antioksidan yang mampu menangkap radikal bebas memiliki relevansi yang besar untuk terapi dan pencegahan penyakit. Gomphrena globosa merupakan tanaman tahunan yang tumbuh baik di daerah tropis, dapat berbunga terus menerus sepanjang musim dan tumbuh baik pada sinar matahari penuh dengan kelembaban sedang [7,8]. Tanaman ini memiliki daya adaptasi yang baik, tahan panas, kekeringan, dan gizi buruk. G. globosa dapat hidup pada kisaran suhu yang luas sehingga dapat hidup pada suhu rendah hingga daerah kering [9]. SemuaG. globosa tanaman memiliki aktivitas analgesik dan sitotoksik [10]. Bagian udara tanaman menunjukkan aktivitas antikanker. Bunga dewasa memiliki aktivitas antimikroba dan antioksidan [7,11]. Deteksi fitokimia bagian daunG. globosa mengandung saponin, alkaloid, gula pereduksi, dan kumarin G. globosa bunga menunjukkan kandungan karbohidrat, tanin, saponin, flavonoid, kuinon, glikosida, terpenoid, fenol, kumarin, steroid, dan fitosteroid [7,11]. Metabolit sekunder fenol, tanin, galotanin, flavonoid, kumarin, alkaloid, saponin, steroid, terpenoid, dan minyak atsiri berpotensi untuk digunakan sebagai antioksidan alami. Uji 2,2-Difenil-1-Pikrilhidrazil (DPPH) Aktivitas antioksidan ekstrak ditentukan dengan menggunakan DPPH radikal bebas scavenging assay. Satu mililiter 0,3 mM DPPH (1 mg DPPH/10 ml metanol) ditambahkan ke berbagai pengenceran ekstrak etanol G.globosa (10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55 g/ml). Larutan blanko merupakan campuran 1 ml metanol dengan 1 ml larutan DPPH. Percobaan dilakukan dalam rangkap tiga. Campuran reaksi diinkubasi selama 30 menit kemudian dibaca dengan panjang gelombang 517 nm. Ekstraksi dan Senyawa Fitokimia Ekstraksi 200 g G. globosa bunga dengan pelarut etanol 96% menghasilkan ekstrak pekat, lengket, berwarna coklat kekuningan dengan berat padat 12,97 g. Rendemen ekstrak yang diperoleh sebesar 6,49%. Metode maserasi digunakan untuk mengekstrak fitokimia yang ada padaG. globosa, karena memiliki beberapa keunggulan dibandingkan dengan metode lain yaitu sederhana dan dapat digunakan untuk mengekstrak senyawa yang tidak tahan panas atau termo-labil [14]. Pelarut yang digunakan untuk ekstraksi adalah etanol karena merupakan senyawa semi polar dengan indeks polaritas 5,2. Senyawa polar akan lebih mudah larut dengan pelarut polar dan senyawa non polar akan lebih mudah larut dalam pelarut nonpolar. Oleh karena itu, penggunaan etanol semipolar sebagai ekstraksi pelarut diharapkan dapat menarik senyawa-senyawa polar, semi-polar, dan nonpolar dalamG. globosa bunga [15,16]. Rendemen merupakan perbandingan jumlah ekstrak dengan berat simplisia yang dinyatakan dalam satuan %. Semakin tinggi nilai rendemen yang dihasilkan menunjukkan semakin banyak pula nilai ekstrak yang dihasilkan. Nilai rendemen terkait dengan jumlah kandungan bioaktif dalamG. globosa sampel bunga. Semakin besar rendemen yang dihasilkan, semakin efisien perlakuan yang diterapkan dan semakin banyak komponen bioaktif yang terkandung dalam ekstrak Senyawa seperti flavonoid, alkaloid asam fenolat, asam arakidik, karotenoid, dan saponin memiliki potensi antioksidan yang melindungi sel dari kerusakan oksidatif [21,22]. pateldkk. (2015) telah menunjukkan bahwa tanaman obat yang kaya akan kandungan fenol, flavonoid, dan terpenoid memiliki aktivitas antioksidan yang tinggi [23]. Sebagian besar flavonoid memiliki gugus hidroksil fenolik dalam struktur molekulnya dan memiliki kemampuan untuk menangkap radikal bebas [24]. Menurut Gutteridge dan Halliwel (1999), antioksidan dari golongan flavonoid merupakan donor ion hidrogen, sehingga dapat menetralisir efek toksik radikal bebas dan memiliki kemampuan untuk mengkhelat logam dengan mendelokalisasi elektron tidak berpasangan yang mengarah pada pembentukan fenoksil yang stabil. 25,26,27]. Terpenoid tersusun dari gugus isoprena (isoprenoid). Diterpen (asam karsinat), monoterpen fenolik (karvanol dan timol), monoterpen non-fenolik (terpinolin dan terpinenes) dan seskuiterpen yang merupakan terpenoid dalam rosemary menunjukkan aktivitas antioksidan primer [28,29,30,31]. Grabman [32] menunjukkan bahwa terpenoid, terutama monoterpen dan diterpen, dapat digunakan sebagai antioksidan karena dapat menangkap radikal dengan menyumbangkan hidrogen dan efektivitasnya dalam menghambat peroksidasi lipid Tingkat aktivitas antioksidan berdasarkan nilai IC50 menggunakan metode DPPH terdiri dari beberapa kategori, 1) antioksidan sangat kuat dengan nilai IC50 150 g/ml. Nilai IC50 yang lebih kecil menunjukkan aktivitas antioksidan yang lebih kuat [36]. Aktivitas antioksidan ekstrak etanolG. globosa bunga sangat kuat karena menunjukkan nilai IC50 sebesar 49,9 g/ml dibandingkan dengan penelitian yang dilakukan oleh Arthi dan Prasanna (2016) dengan ekstrak metanol G. globosa bunga menunjukkan radikal DPPH IC50 pada 140 g/ml. Berdasarkan penelitian Huliselan dkk., (2015) menunjukkan bahwa aktivitas antioksidan yang tinggi diperoleh dari Sesewanua ekstrak daun diekstraksi dengan pelarut etanol. Oleh karena itu ekstrak etanol mampu menyerap senyawa yang berpotensi sebagai antioksidan [37]. Antioksidan bereaksi dengan DPPH, mengurangi jumlah radikal bebas DPPH yang bereaksi dengan gugus hidroksil yang ada. Aktivitas antioksidan ekstrak diarahkan oleh berbagai mekanisme yang berbeda, seperti mencegah inisiasi reaksi berantai, dekomposisi peroksida, mencegah abstraksi hidrogen terus menerus, menangkap radikal bebas, mengurangi kapasitas, dan mengikat katalis transisi ion logam. ekstrak etanol dariG. globosa bunga dapat mengurangi konsentrasi NO dalam sel Vero yang diinduksi LPS. Mekanisme LPS dalam menginduksi syok septik melalui interaksi reseptor untuk membentuk monomer endotoksin (kompleks MD2) akan mengikat dan mengaktifkan TLR4. TLR4 berperan penting dalam menginisiasi sinyal kaskade intraseluler yang bertanggung jawab atas aktivasi jalur MAPK dan kemudian diteruskan ke jalur pensinyalan NF-kβ. TLR merupakan reseptor utama yang berinteraksi dengan protein intraseluler dan ekstraseluler yang berperan dalam pertahanan tubuh. NF-kβ (P65 dan P50) akan ditransplantasikan ke dalam nukleus untuk mengaktifkan transkrip gen pro-inflamasi seperti peningkatan sitokin pro-inflamasi (TNF-α, IL-1, IL-6) dan up-regulation mediator inflamasi seperti iNOS dan COX-2. Produksi NO dikendalikan oleh ekspresi iNOS [54,55,56,57,58,59]. Temuan ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol dari G. globosa bunga dapat mengurangi radikal NO dalam sel yang mengalami stres oksidatif dan kemudian menstabilkannya. Radikal bebas adalah molekul yang orbital terluarnya tidak berpasangan [60]. Radikal bebas seperti ROS dan RNS sangat reaktif dan tidak stabil sehingga akan bereaksi dengan molekul sel sekitarnya untuk memperoleh pasangan elektron sehingga menjadi lebih stabil, tetapi molekul sel yang diambil elektron akan berubah menjadi radikal bebas. Reaksi ini berlangsung terus menerus di dalam tubuh dan jika tidak dihentikan akan menyebabkan stres oksidatif yang menyebabkan peradangan, kerusakan DNA atau sel yang menyebabkan berbagai penyakit seperti penyakit jantung, kanker, dan penuaan dini, termasuk cedera ginjal akut. Hal ini disebabkan adanya kandungan terpenoid, saponin, dan flavonoid sebagai antioksidan dalamG. globosa ekstrak etanol bunga. Senyawa antioksidan mampu menangkap dan menetralisir radikal bebas untuk menghentikan stres oksidatif dan kerusakan sel dapat dihindari atau induksi penyakit dapat dihentikan Qualitative Phytochemical Analysis of Gomphrena globosa Linn. and Gomphrena decumbens Jacq Analisis fitokimia kualitatif dari seluruh bagian tanaman etanol dan ekstrak air dari Gomphrena globosa Air terjun. dan Gomphrena decumbens Jacq. Analisis fitokimia kualitatif dari seluruh bagian tanaman dari Gomphrena globosa terungkap adanya beberapa fitokonsituen penting seperti tanin, saponin, steroid, terpenoid, alkaloid dan fenol. Pada saat yang sama konstituen fitokimia seperti flavonoid, kuinon, terpenoid, kardioglikosida tidak ada. Hasil ekstrak etanol dan air dari Gomphrena globosa hadir. Senyawa kimia seperti tanin, saponin dan fenol hadir dalam ekstrak etanol dan air. Fitokonstituen flavanoid, kuinon, terpenoid, kardioglikosida tidak ada pada kedua ekstrak. Ekstrak etanol menunjukkan hasil positif terhadap alkaloid, protein dan steroid. Seperti itu G. globosa ekstrak etanolik G. decumbens juga menunjukkan hasil positif untuk tanin, saponin, alkaloid, protein, steroid dan fenol dan hasil negatif untuk flavonoid, kuinon, terpenoid dan kardioglikosida. Dalam ekstrak air tanin, saponin, protein dan fenol hadir. Tapi senyawa kimia seperti flavonoid, alkaloid, steroid, kuinon, terpenoid dan fenol sama sekali tidak ada. Ada atau tidak adanya konstituen dinyatakan dalam simbol (+) dan (-). In vitro Antidiabetic, Antioxidant and Antiglycation Activity of Ethanolic Leaf Extract of Gomphrena globosa (Linn.) G. globosa L. merupakan tanaman tahunan tropis abadi yang dilaporkan memiliki beberapa aktivitas biologis untuk menyembuhkan penyakit seperti arthritis, diabetes, asma, bronkitis dan juga dikenal memiliki aktivitas anti tussive, anti oksidan, anti asma dan anti kanker. Bunganya dilaporkan mengandung betacyanin yang dapat digunakan sebagai pewarna makanan dan antioksidan Hasil Analisis fitokimia awal mengungkapkan adanya alkaloid, flavonoid, saponin, kumarin, permen karet dan lendir Tabel 3. In vitro aktivitas antioksidan dari Gomphrena globosa ekstrak daun dianalisis dengan uji DPPH dan aktivitas penangkapan radikal hidroksil. Daya reduksi keseluruhan dari elektron yang menyumbangkan antioksidan dalam campuran reaksi berbanding lurus dengan perubahan absorbansi. Scavenging tertinggi diamati pada konsentrasi 500 g dan persen penghambatan ditemukan 50,80%, di mana standar menunjukkan 62,37% pada konsentrasi 500 g/ml (Gambar 3).G. globosa ekstrak etanol menunjukkan aktivitas pemulungan 57,24% bila dibandingkan dengan standar yang menunjukkan 67,93% pada konsentrasi tertinggi (Gambar 4). aktivitas dengan aktivitas antioksidan dan sitotoksik yang signifikan.[7] Heuer[25] melaporkan bahwa G. globosa bunga memiliki betacyanin seperti gomphrenin I, II dan III. G. globosa telah dicatat menggunakan sulfida atmosfer untuk pertumbuhannya Metabolit sekunder tanaman yang berperan sebagai senyawa fitoaktif disintesis di seluruh bagian tanaman. Senyawa fitoaktif ini bekerja dengan nutrisi dan serat yang berperan sebagai sistem pertahanan terhadap berbagai penyakit dan kondisi stres. Aktivitas ini dimungkinkan karena adanya metabolit sekunder dan konstituen lain yang menunjukkan efek hipoglikemik, antioksidan, dan antiglikasi. Karena signifikansi tersebut, penelitian ini dilakukan untuk mempelajari potensi ekstrak etanol daunG. globosa terhadap antioksidan, Investigation of Pharmacognostical and Physical Parameters of Gomphrena Globosa Flowers Gomphrena globosa, umumnya dikenal sebagai globe amaranth atau Bachelor Button dalam bahasa Inggris, makhmali dalam bahasa Hindi, dan vadamalliin Sansekerta, adalah tanaman yang dapat dimakan dari keluarga Amaranthaceae. Daun dan bunga digunakan dalam obat tradisional untuk oliguria, panas dan empacho, hipertensi, antimikroba, antioksidan, batuk, diabetes, hipertensi, masalah ginjal, suara serak, batuk, bronkitis dan penyakit pernapasan lainnya, terutama sebagai ekspektoran, masalah reproduksi serta memiliki aktivitas sitotoksik dan estrogenik yang signifikan [2]. Studi fitokimia menunjukkan adanya senyawa fenolik, kaempferol-3-HAI-(6-rhamnosil) heksosida ditambah kaempferol-3-HAI-hexoside menjadi senyawa utama selain ini juga mengandung flavon dan flavonoid glikosida, gomphrenol. Ekstrak betacyanin yang kaya menunjukkan isogomphrenin III dan gomphrenin III sebagai metabolit utama [3]. Betacyanin hadir dalam tanaman ini telah dilaporkan untuk menampilkan karakter obat yang menarik sebagai antioksidan kuat dan senyawa kemopreventif dalam model in vitro dan in vivo.[4]. Gomphrena globosa telah diskrining untuk aktivitas farmakologis dan dilaporkan memiliki analgesik sentral dan perifer [5], antiinflamasi[3], hipoglikemik[6], antimikroba, antioksidan dan aktivitas sitotoksik[9]. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengevaluasi berbagai parameter farmakognostik seperti makroskopik, mikroskopis, fisikokimia, fluoresensi dan studi fitokimia dari Gomphrena globosa Metode DPPH (1,1- difenil-2-pikrildidrazil) merupakan suatu metode kolometri yang efektif dan cepat untuk memperkirakan aktivitas antiradikal. DPPH ini merupakan suatu radikal stabil yang mengandung nitrogen organik, mempunyai warna ungu gelap dan absorbansinya kuat pada λ maksimal 517 nm. Setelah bereaksi dengan antioksidan maka warna larutan akan berkurang dan akan berubah menjadi kuning dimana perubahan warna ini diukur menggunakan spektrofotometer (Prakash, Rigelhof, & Miller, 2001). Aktivitas antioksidan dapat didefinisikan sebagai kuantitas hidrogen dari senyawa antioksidan yang diikat oleh DPPH, dimana hasil ini dinyatakan dengan nilai persentase (%) inhibisi (Windono, Hendrajaya, Nurfatmawati, & Soraya, 2001). Persentase inhibisi dapat menunjukkan nilai IC50 (Inhibition Concentration 50%), ini merupakan konsentrasi larutan sampel yang akan menyebabkan reduksi terhadap aktivitas DPPH sebesar 50%. Nilai IC50 dihitung dari persentase penghambatan serapan larutan ekstrak menggunakan persamaan yang diperoleh dari kurva regresi linier. Menurut Molyneux (2004), semakin tinggi nilai IC50 semakin rendah aktivitas antioksidannya, dan semakin rendah nilai IC50 semakin tinggi aktivitas antioksidannya. Tanaman bunga kenop (Gomphrena globosa L.) merupakan tanaman liar yang dapat tumbuh sampai ketinggian 1.400 m di atas permukaan laut dan juga pada tempattempat yang cukup mendapat sinar matahari (Wijayakusuma, 2000). Bunga kenop merupakan salah satu sumber betasianin. Betasianin merupakan pigmen yang mengandung nitrogen yang larut di dalam air yang termasuk dalam kelompok betalain. Betasianin memiliki warna antara merahungu (Strack et al., 2003). Pigmen betasianin hanya dapat ditemui pada beberapa tanaman dari anggota ordo Caryophyllales, termasuk Amaranthaceae, dan bersifat mutual eksklusif dengan pigmen antosianin (Grotewold, 2006).