BIO3102 - Devoir 1: Voici une liste non exhaustive de traitements que vous pourrez utiliser pour mieux caractériser votre gène et ainsi tenter de déterminer son rôle dans l’organisme. Remplissez le document et ajoutez toutes conditions ou expériences pertinentes pour votre projet. N 1 O TISSUS Feuille CATÉGORIE Blessure (wounding) 2 Feuille Stress abiotique (wounding) 3 Feuille Stress abiotique (wounding) 4 Feuille Stress biotique (pathogène) 5 Feuille Stress hydrique et développement 6 Feuille Développement 7 Fleur Développement parthénocarpie 8 Feuille 9 Pistil Stress salin (abiotique) Blessure (wounding) 10 Ovaire Fécondation 11 Ovaire Développement 12 Feuille Témoin 13 Feuille Stress abiotique (cold shock) TRAITEMENT À l’aide d’une pince, pincer délicatement des feuilles en plusieurs endroits. Récolter les tissus 24 et/ou 48 heures après le traitement. Vaporiser les feuilles avec une solution d’acide jasmonique (JA, 50 μM), une phytohormone impliquée dans la réponse à la blessure. Appliquer sur 2 jours consécutifs. Mettre une plante sous cloche ou sac de plastique transparent et introduire un carré de papier Whatmann de jasmonate de méthyle (MeJa, 100 mM dans du MeOH). Appliquer sur 2 jours consécutifs. Comme témoin, utiliser le méthanol (MeOH) sur une autre plante aussi sous cloche. Vaporiser les feuilles avec une solution d’acide salicylique (SA, 5 mM), une phytohormone impliquée dans la réponse à la défense causée par des pathogènes. Appliquer sur 2 jours consécutifs. Vaporiser les feuilles avec une solution d’acide abscissique (ABA, 50 μM), une phytohormone. Appliquer sur 2 jours consécutifs. Vaporiser les feuilles avec une solution d’auxine (IAA, 50 μM), une phytohormone. Appliquer sur 2 jours consécutifs. Vaporiser les fleurs avec une solution d’auxine (IAA, 50 μM), une phytohormone. Appliquer sur 2 jours consécutifs. L’IAA provoque le développement du fruit sans qu’il y ait eu fécondation. Arroser sur 2 jours consécutifs la plante avec une solution de NaCl 100 mM. À l’aide d’une pince, pincer délicatement l’extrémité du style en un seul endroit, juste en dessous du stigmate ou à la jonction du stigmate avec le style. Récolter les tissus 48 heures après le traitement. Polliniser des fleurs et récolter les ovaires 48 heures après pollinisation. À ce moment, chaque ovule aura été fécondé et portera un zygote. Polliniser des fleurs et récolter les ovaires 14 jours après pollinisation. À ce moment, les ovules porteront des embryons au stade cordiformes. Vaporiser les feuilles avec une solution de Tween 0,05% dans l’eau. Ceci servira de témoin pour les traitements avec l’ABA, l’IAA, le GA, le JA et le SA. Placer un plant dans une chambre de croissance 24 h à 4 ou 6 °C. O N 14 TISSUS Feuille CATÉGORIE Stress abiotique (heat shock) Stress/hormone (éthylène) 15 Feuille 16 Feuille 17 Feuille 18 ________ _________________ _________________ 19 ________ _________________ _________________ ____________________________________________ ____________________________________________ ____________________________________________ 20 ________ _________________ _________________ ____________________________________________ ____________________________________________ ____________________________________________ 21 ________ _________________ _________________ ____________________________________________ ____________________________________________ ____________________________________________ 22 ________ _________________ _________________ ____________________________________________ ____________________________________________ ____________________________________________ 23 ________ _________________ _________________ ____________________________________________ ____________________________________________ ____________________________________________ 24 ________ _________________ _________________ ____________________________________________ ____________________________________________ ____________________________________________ 25 ________ _________________ _________________ ____________________________________________ ____________________________________________ ____________________________________________ Stress abiotique choc osmotique Blessure (wounding) TRAITEMENT Placer un plant durant 4 à 6 h dans une chambre de croissance à 35 °C ou plus. Découper des disques foliaires (environ 1 à 2 cm de diamètre) et mettre en flottaison dans une boîte de pétri sur un milieu liquide (20 mL) de MES 10 mM pH5.5 (témoin) et sur des milieux MES 10mM pH5.5 additionnés de 20 µM et 200 µM Ethephon (2Chloroethylphosphonic acid). Sceller le prétri avec du Parafilm™ et laisser 48h sous lumière dans la salle de culture in vitro. Arroser sur 2 jours consécutifs la plante avec une solution de mannitol 200 mM. À l’aide d’une pince, pincer délicatement des feuilles en plusieurs endroits. Récolter les tissus 24 et/ou 48 heures après le traitement. ____________________________________________ ____________________________________________ ____________________________________________ Nom :_________________________________________________________________ Équipe :___________