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Ácidos Nucleicos - EMEI

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16/3/2020
Ácidos Nucleicos - EMEI
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Ácidos Nucleicos
15/05/2011 por Salvador Resino
Ácidos Nucleicos (ADN y ARN)
DNA (ácido desoxirribonucleico)
RNA (ácido ribonucleico)
Monómero
Cada monómero de ácido nucleico es un nucleótido formado por la unión del ácido
fosfórico + azucar (ribosa, desoxiribosa) + base nitrogenada.
Enlace fosfodiester
Ácido fosfórico:
– Une los nucleótidos entre sí asociando las pentosas de dos nucleótidos consecutivos.
– La unión se produce con el carbono 3’ de un nucleósido con el carbono 5’ del siguiente.
– Enlace de alta energía muy estable.
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Azúcar y base nitrogenada
DNA: ESTRUCTURA DE LA DOBEL HELICE
Composición en bases del DNA en algunas especies
Reglas de Charga
1. La relación purinas/pirimidinas es igual a 1.
Es decir, A+G = C+T
2. En todos los DNA estudiados, la proporción molar de A es igual a la de T, y la de G igual a
la de C.
Es decir, A = T y G = C
Modelo De WATSON-CRICK
Cada molécula de DNA está formada por dos largas cadenas de polinucleótidos que
corren en direcciones opuestas formando una hélice doble alrededor de un eje
imaginario central. De esta forma la polaridad de cada cadena es opuesta. El sentido
de giro es dextrógiro con un paso de rosca de 3.4 nm.
Cada nucleótido está en un plano perpendicular al de la cadena polinucleótida. El eje
ribosa-fosfato se sitúa hacia el exterior de la doble hélice, en contacto con el
solvente mientras que las bases nitrogenadas (anillos planares) se sitúan, apiladas,
hacia el interior de la estructura, en un entorno hidrofóbico.
Las bases están situadas en planos aproximadamente perpendiculares al eje mayor
de la doble hélice. La distancia entre planos es de 0.34 nm.
Las dos cadenas se encuentran apareadas por uniones de hidrógeno establecidas
entre los pares de bases. El apareamiento es altamente especí co. Existe una
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distancia física de 11 A entre dos moléculas de desoxirribosa en las cadenas
opuestas (sólo se pueden aparear una base púrica con una pirimídica. A-T G-C entre
A y T hay dos puentes de hidrógeno y entre G-C hay tres. Son imposibles otras
uniones).
La secuencia axail de bases a lo largo de una cadena de polinucleótidos puede variar
considerablemente, pero en la otra cadena la frecuencia debe ser complementaria.
El eje de la doble hélice no pasa por el centro geométrico del par de bases. Esto
determina que la hélice presente un surco ancho y un surco estrecho
Curvas de fusión: Estudio de estabilidad del DNA
Tm= temperatura a la cual el 50% del DNA es fusionado.
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Desnaturalización/Renaturalización del DNA
Superada la temperatura de fusión, las dos hebras de DNA se separan y al descender la
temperatura las dos hebras de DNA se fusionan.
Contenido en GC
El contenido en GC determina la temperatura de fusión que es característica de cada
especie.
La desnaturalización térmica del DNA sigue una curva sigmoide. El punto medio, Tm, está
relacionado con el contenido en G+C. Así, la muestra B tiene un mayor contenido en G+C
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que A.
Implicaciones genéticas del modelo
1. El material genético ha de ser lineal y aperiódico; el DNA cumple esa condición.
2. El apareamiento de bases sugiere un modelo para la replicación del mismo de forma
que las dos moléculas hijas son idénticas a la parental:
3. La reactividad de las bases y la estructura general del DNA explican perfectamente la
acción de los mutágenos químicos
4. La tautomería de las bases explica en parte las tasas de mutación espontánea:
Con guración del DNA
DNA-A
1. Doble hélice plectonémica y dextrógira.
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2. Planos de bases oblicuos respecto al eje de la doble hélica.
3. Propio de RNAs en doble hélice, o de híbridos DNA-RNA.
4. Más ancha y corta que DNA-B.
DNA-Z
1. Doble hélice plectonémica y levógira.
2. Zonas de secuencia alternante -GCGC-.
3. Conformación de G es syn- en lugar de anti-.
4. Más estrecha y larga que DNA-B.
Superhélices de DNA
El DNA se presenta habitualmente en forma de superhélices, cuando la doble hélice, a su
vez, se enrolla sobre sí misma. Esto permite el empaquetamiento de la molécula en el
interior de la célula o del núcleo celular.
Nucleosomas
DNA mide aproximadamente 2 metros de largo.
Estructura repetitiva de cromatina.
Estructura “beads-on-string”.
Formada por la H1: Zig-Zag, Lineal.
Modelo del Solenoide.
Histonas: 2H2a, 2H2b, 2H3, 2H4.
DNA: aprox. 196 pares de bases.
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Histonas
Hay 5 tipos diferentes: H1, H2A, H2B, H3 y H4.
Poseen un alto grado de conservación entre organismos.
La histona H3 es la mejor conservada, también lo son la H2A y H2B, no así la H1.
Hay dos fuentes de variabilidad:
Reiteración génica.
Modi cación post-traslacional.
La principal modi cación en las histonas es la acetilación, importante rol en la actividad
génica.
Entre otras modi caciones se encuentra la metilación y la fosforilación de residuos como
Ser, Treonina, Lys, His.
ESTRUCTURA DEL RNA
-Constituido por ribonucleótidos (nucleótidos de ribosa).
-Los ribonucleótidos se unen entre sí, igual que en el DNA, a través de un ácido fosfórico
en sentido 5’à3’.
-El RNA es casi siempre monocatenario.
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RNA
Los distintos tipos de RNA permiten la expresión fenotípica del DNA:
Como mensaje genético que determina la secuencia de aminoácidos en la síntesis
de proteína: RNA mensajero o mRNA.
Como molécula que activa a los aminoácidos para poder ser incorporados en una
nueva proteína: RNA de transferencia o tRNA.
Como elemento estructural básico de las partículas encargadas de llevar a cabo la
síntesis proteica, los ribosomas: RNA ribosómico o rRNA.
Características del RNA
Reactividad química: El RNA, al tener el grupo 2’-OH, es mucho más reactivo
químicamente que el DNA. En concreto, puede ser completamente hidrolizado por
álcali a una mezcla de 2’- y 3’-nucleótidos.
Estructura tridimensional: Las formas en doble hélice del RNA adoptan la
con guración A (en lugar de la B, propia del DNA), así como los híbridos DNA-RNA.
La pentosa aparece en forma endo-3’ (y no endo-2’).
En el RNA son frecuentes las bases y nucleósidos anómalos.
Tamaño molecular: aun con ser grande, es de bastante menor tamaño que el DNA.
Está presente en todas las células, sean del tipo que sean.
RNA como material genético: Algunos virus tienen como material genético el RNA.
Entre éstos, los hay que a partir de su RNA sintetizan un DNA complementario
mediante una enzima conocida como transcriptasa inversa. Son los retrovirus.
RNA como enzima: Algunos RNA son capaces de catalizar reacciones químicas del
mismo modo que las enzimas (ribozimas).
Participa en el procesado del transcrito primario para dar lugar al RNA mensajero o
mRNA.
Participa en la formación de enlace peptídico en la síntesis de proteínas.
Replicación del DNA
El DNA es el portador del mensaje genético.
La cantidad de DNA en las células de individuos de la misma especie es constante.
Cuanto más compleja es la especie mayor cantidad de DNA contiene.
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La luz ultravioleta de 360 nm es la más absorbida por el DNA y la qué provoca más
mutaciones (reconocidas por una descendencia anormal).
Debido a la temporalidad de los seres vivos para que una especie no se extinga ha
de haber al menos un momento en el que la información biológica (características
morfológicas y siológicas) se replique y a partir de esas copias aparezcan los
descendientes.
Características de la Replicación del DNA
El proceso de duplicación del DNA es controlado enzimáticamente, asegurando así una alta
delidad en la información que contiene la copia. Entre las enzimas que participan en el
proceso de replicación o duplicación del DNA tenemos:
DNA polimerasa, participa en la replicacion y reparación del DNA.
Topoisomerasas, desenrollan al DNA.
Helicasas, separan las dos hebras del DNA para que cada una actúe como molde.
Primasas, sintetizan al RNA cebador usando como molde una hebra del DNA.
Nucleasas, rompen una de las hélices, dando lugar a un origen de replicación,
reparan lesiones del DNA.
Ligasas, unen fragmentos de DNA adyacentes a través de enlaces fosfodiester.
La duplicación consiste en la disociación de las dos cadenas de forma que cada una sirve
como molde para la síntesis de dos hebras complementarias, produciéndose dos
moléculas de DNA con igual constitución molecular.
Es semiconservativa ya que al nal de la duplicación, cada molécula de DNA presenta una
hebra original y una hebra nueva.
Es bidireccional, ya que a partir de un punto dado, la duplicación progresa en dos
direcciones.
La replicación avanza adicionando mononucleótidos en dirección 5′ ? 3′.
Es semidiscontinua, ya que en una de las hebras (hebra conductora) sesintetizan
lamentos bastante grandes y de forma continua, mientras que en la otra (hebra
retardada) la síntesis es discontinua, ya que se van sintetizando fragmentos pequeños que
se disponen de manera separada.
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Gen
Un gen es un fragmento de ácido nucleico que tiene información para un
determinado carácter y ocupa una posición ja en el hilo de DNA (LOCUS).
Para un mismo locus puede haber más de un tipo de información. Cada información
que hay en un mismo locus se le llama ALELO.
Alteración en la Secuencia de Nucleótidos: mutaciones.
Las mutaciones posibilitan la aparición de individuos distintos.
Existe la posibilidad de que alguno de los nuevos individuos se adapte a las posibles
variaciones ambientales.
Las mutaciones aparecen por acción de agentes externos (radiaciones, agentes
químicos, virus, etc.) o causa interna (error de copia, entrecruzamientos,
recombinación genética).
La Expresión del Mensaje Genético
Las instrucciones para construir las proteínas están codi cadas en el DNA y las células
tienen que traducir dicha información a las proteínas. El proceso consta de dos etapas:
En el núcleo se pasa de una secuencia de bases nitrogenadas de un gen DNA a una
secuencia de bases nitrogenadas complementarias que pertenecen a un mRNA
(TRANSCRIPCIÓN).
En los ribosomoas se pasa de una secuencia de ribonucleótidos de mRNA a una
secuencia de aminoácidos (TRADUCCIÓN).
El Código Genético
Existen 20 aminoácidos diferentes y sólo 4 nucleótidos en el mRNA. Se pueden
construir 64 tripletes mediante combinaciones con repetición de los 4 nucleótidos
tomados de tres en tres. A cada triplete se le llama CODÓN.
Es universal, pues lo utilizan casi todos los seres vivos conocidos. Solo existen
algunas excepciones en unos pocos tripletes en bacterias.
No es ambiguo, pues cada triplete tiene su propio signi cado.
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Todos los tripletes tienen sentido, bien codi can un aminoácido o bien indican
terminación de lectura.
Está degenerado, pues hay varios tripletes para un mismo aminoácido, es decir hay
codones sinónimos.
Carece de solapamiento,es decir los tripletes no comparten bases nitrogenadas.
Es unidireccional, pues los tripletes se leen en el sentido 5´-3´.
Organización básica del Genoma Humano
Los genes eucariotas contienen secuencias codi cantes denominadas exones,
separadas entre sí por otras no codi cantes llamadas intrones. Durante el
procesamiento del mRNA, se eliminan las secuencias de los intrones, fenómeno
conocido como corte-empalme o splicing.
Cada exón suele corresponderse con un dominio de la cadena polipeptídica.
El dominio es una región del polipéptido con una localización y función de nida
dentro de la proteína nal y la célula.
Una proteína tiende a estar constituida por varias cadenas, por lo que entran en
juego varios genes.
El 25 % de todo el Genoma Humano está constituido por genes, cuyo número se
estima que se halla entre 30.000 y 40.000, la mayoría aún sin función conocida.
Solo el 1 % de todo el Genoma Humano está constituido por DNA codi cante es
decir, exones.
El origen de esta discrepancia es el fenómeno de splicing o corte- empalme
alternativo del mRNA que sufren el 60% de los genes. Es decir, un gen da lugar a
varios mRNA maduros.
 Teoría
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 Genética, DNA, ARN, ADN, Código genético, Genoma, Modelo de Watson-Crick,
Desnaturalización, Nucleosomas, Gen, Replicación
 Microscopio confocal
 Clasi cación de los agentes biológicos en base a su riesgo biológico
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propiedades y tipos
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