UROCULTIVO

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UROCULTIVO
TOMA DE MUESTRA
TIPOS DE
MUESTRA
INVASIVOS
PUNCION
SUPRAPUBICA
CATERIZACION
NO INVASIVOS
ORINA
CHORRO
MEDIO
SONDA
PERMANENTE
Recomendaciones para el diagnóstico microbiológico de la infección urinaria Rev Chil Infect (2001); 18 (1): 57-63
ORINA POR
COLECTOR
EXTERNO
ORINA CHORRO MEDIO
 Más frecuentemente procesada, por su fácil obtención.
 Requiere mas cuidado en su obtención
 Contaminación mas frecuente en mujeres
 La primera parte de la micción debe descartarse
Como recolectar la orina
 Lavado de manos y genitales




externos con agua y jabón
Se toma la orina de la primera
hora de la mañana
Separar con la mano los labios
mayores, procurando que la
orina salga directamente sin
tocar los genitales externos.
Debe descartarse la primera
parte y recoger el resto
directamente en un recipiente
estéril
Enviar cuanto antes a
laboratorio o conservar en
refrigeración 24 horas.
Bolsa colectora de orina
 Se utiliza en niños sin control de esfínteres
 Alta tasa de contaminación: 30 a 70%.
 El uso de bolsa colectora para la obtención de muestras de
orina en pacientes pediátricos no tiene utilidad en los
urocultivos
Se recomienda lavado de genitales externos con
agua y jabón, el retiro inmediato de la bolsa al
terminar la micción o el recambio cada 20 min
cuando esta no ha ocurrido.
• Si cultivo de orina es negativo descarta ITU
• Si cultivo es positivo requiere descartar con
cateterización o punción suprapúbica
• Nitrito positivo, podría ser confiable.
Farrell M. y col. J Adv Nurs 2002 Feb;37(4):387-393.
Punción de la sonda vesical
 PUNCION EN EL PUERTO
DE RECOLECCION:
obtención previa desinfección
se punciona con una aguja y
se aspira la orina.
 Al cambiar la sonda: se
obtiene la orina por la nueva
sonda.
La superficie externa del catéter debe limpiarse con
una tórunda con alcohol 70% y esperar que seque. La
punción se efectúa en un ángulo de 30° en el sitio
indicado para ello. No debe pinzarse el catéter antes
de obtener la muestra.
Recomendaciones para el diagnóstico microbiológico de la infección urinaria Rev Chil Infect (2001); 18 (1): 57-63
Cateterización vesical
 Sensibilidad 95%, especificidad
99%
 Indicaciones:
 Pacientes inmovilizados
 Pacientes obesos
 Pacientes con alteraciones
neurológicas.
 Niños (menores de 2 años)
 Requiere asepsia rigurosa.
 Descartar los primeros mililitros
(falsos positivos).
 La cateterización vesical puede
introducir microorganismo en la
vejiga y producir ITU
iatrogénica
Punción suprapúbica y sondaje vesical. An Pediatr Contin 2003;1(2):97-100 97
Aspiración suprapúbica
 Es el “gold standar"
 Mínima probabilidad de
contaminación.
 Se requiere conocimientos
técnicos y experiencia.
 Tasa de éxito: 23-90% (con
control ecográfico,
aumenta al 90-100%).
 Para pacientes recién
nacidos, neonatos o
lactantes (con fimosis).
Cualquier hallazgo microbiológico debe
considerarse significativo
Recolección transporte y
almacenamiento de la muestra
 Se recomienda la primera orina
de la mañana.
 Mínimo 4 horas en la vejiga
 Orina al azar si el paciente es
sintomático.
 No estar tomando antibiótico.
 El transporte al laboratorio debe
ser inmediato.
 Hasta 2 horas a temperatura
ambiente.
 Hasta 24 horas en refrigeración
(4-8 °C).
 Datos en la orden médica:
 Método y hora de recolección
 Uso previo de antimicrobianos
Métodos microscópicos
Examen directo
Coloración de Gram
 Colocar 10 µl de orina bien

mezclada sin centrifugar sobre una
lámina portaobjetos, colocar un
cubreobjetos y observar a 400
 La presencia de más de 5 leucocitos
por campo es considerado como
indicativo de piuria
 Nota: este resultado tiene una
especificidad de 90% para predecir
una infección urinaria asociada a
catéter con más de 105 UFC/mL,
pero una sensibilidad de solo 37%.
Colocar 10 µl de orina bien mezclada sin
centrifugar sobre una lámina portaobjetos, y
deje que se seque al aire sin extenderla
 Determinar el número de organismos por
campo de aceite de inmersión. Un
organismo observado a 1,000x correlaciona
con un recuento de colonias de 105/ml de
orina
 Comentario: La tinción de Gram es útil para
determinar rápidamente el tipo y el
recuento de bacterias y células en la orina .
Para los pacientes hospitalizados, la
coloración de Gram de la orina puede
ayudar a diagnosticar la causa de la sepsis
antes que los cultivos de sangre den
positivos
La presencia de una bacteria/campo de inmersión tiene buena correlación con 100.000 UFC/ml en ~ 85% de
los casos.
La presencia de muchas células epiteliales y morfotipos microbianos diferentes sugieren contaminación
Siembra
Medios de cultivo
 Usar placas con Agar Sangre y Agar
MacConkey

Para orinas de chorro medio, recolector y
catéter, las muestras deben sembrarse con asa de
1 µl en placas de un medio enriquecido como Agar
Sangre y Agar Mac Conkey. El desarrollo de una
colonia en el cultivo debe multiplicarse por 1000.
 Para orinas obtenidas por cateterización
vesical, las muestras pueden sembrarse
con asa de 10µ (1 colonia = 100
ufc/ml) y 1 µl (1 colonia = 1000
ufc/ml).
OJO:
 El recuento de colonias se debe
realizar en el agar sangre. Las
demás placas deben ser estriadas de
tal forma que se obtengan colonias
aisladas . Si el recuento de colonias
no puede ser realizado debido a una
abrumadora propagación de Proteus,
una estimación del recuento se
puede hacer de las placas de
aislamiento.
Metodo de
inoculacion
Recuento de
colonias
Incubación
CULTIVOS AEROBICOS
CULTIVOS ANAEROBICOS
 16 a 18 horas a 35 - 37° C
 cuando sea solicitado en
 ambiente aeróbico
aspiración suprapúbica,
 cuando se sospecha en una
fístula vesiculoentérica
 cuando se observen
diferentes morfotipos
bacterianos en el examen
directo pero no crecen en
cultivo aeróbico.
 Incube 48 horas 
urocultivos negativos con
sedimento urinario
alterado y sembrar en Agar
Sangre con estría
DETERMINACIÓN DE SUSTANCIAS ANTIBACTERIANAS RESIDUALES EN
ORINA
 Hacer una suspensión de Bacillus subtilis en un tubo con




solución salina estéril que sea similar al tubo 0,5 de la escala
de Mc Farland
Sembrar la placa de agar Mueller Hinton con la suspensión de
bacterias de manera similar a un antibiograma.
Dejar secar a temperatura ambiente aproximadamente 15
min.
Colocar 10 µL de orina con una asa calibrada o una
micropipeta
La placa será incubada a 35°C por 18 horas en aerobiosis.
DETERMINACIÓN DE SUSTANCIAS ANTIBACTERIANAS RESIDUALES EN
ORINA
INTERPRETACIÓN:
 Se buscará la presencia de un halo de inhibición alrededor del
disco con la orina.
 Cualquier diámetro de halo se considerará como prueba
positiva. La ausencia de halo se considera como prueba
negativa.
 Reporte de resultados
 El resultado se informa como “Actividad antimicrobiana:
Positiva o Negativa”
Lectura de urocultivos
 Examinar los cultivos que han sido incubados durante toda la
noche, pero hacer la lectura final a las 24 hrs
 48 horas:
 PSP o por Cateterización.
 Pequeñas o pocas colonias
 No correlacion con la tinción gram o la sintomatología clínica
 Paciente inmunosuprimido incluye pacientes que han sido
transplantados.
 Se requiere cultivo para hongos o levaduras
Urocultivo positivo
 Streptococcus agalactiae debe ser reportado de mujeres en
edad fértil y de diabéticos conocidos,
independientemente del recuento.
 Mantenga las placas con cultivo positivo a temperatura
ambiente hasta 48 h, por si el médico solicitara algún
estudio adicional.
 Mantenga las muestras de orina en refrigeración por lo
menos 24 horas para resolver cualquier problema con la
muestra o resultados del cultivo.
 No informar recuento en levaduras.
Otros criterios para interpretación de
resultados
 a) En pacientes sin sonda vesical, la cuenta significativa de
bacterias en orina es la presencia de más de 105 UFC / ml de un
solo gérmen, se confirma en 92% de casos si el gérmen aislado es
gram negativo y en 70%, si es gram positivo.
 Recuentos entre 105 y 103 UFC/ml, si el paciente es sintomático o
si el gérmen es S. saprophyticus o Enterococcus spp. hacen diagnóstico
de ITU.
 b) Los recuentos intermedios (103 - 104 UFC / ml) indican
infección si el procedimiento de recolección de orina fue realizado
correctamente. Gérmenes normalmente encontrados en la piel o
genitales externos e internos. Pero en ciertas circunstancias
recuentos de 102 UCF/ml o más especialmente por Salmonella o
Shigella pueden ser considerados significativos.






c) Generalmente, el aislamiento de tres o más especies bacterianas indican que la
muestra se ha contaminado por recolección inadecuada o demora en la siembra.
d) En pacientes con sonda vesical, cuentas bacterianas menores de 105 UFC / ml pueden
tener significado, así también se pueden encontrar bacteriurias polimicrobianas hasta en
casi 15% de enfermos.
e) En pacientes sin catéter se puede comprobar si el procedimiento de obtención de
muestra fue realizado correctamente observando la frecuencia con la cual se informan
recuentos de colonias intermedias entre 103 - 104 UFC / ml. En pacientes sin infecciones
del tracto urinario, el recuento es nulo o se reduce a pocas colonias.
f) En muestras obtenidas por punción suprapúbica, el desarrollo de una sola colonia en el
medio de cultivo indica infección del tracto urinario.
g) Si en el urocultivo desarrolla flora polimicrobiana, sospechar contaminación y repetir
el estudio. Sin embargo hay situaciones en que la flora puede ser polimicrobiana:
portador de sonda vesical, vejiga neurógena , fístula vésico-intestinal o vésico-vaginal
h) Cuando el urocultivo es positivo y el paciente está asintomático, es necesario repetir
el estudio.
i) Proceso del antibiograma de la orina directa no se recomienda.
Pruebas bioquimicas
 TSI
 CITRATO
 LIA
 SIM
TSI (TRIPLE SUGAR IRON AGAR)
 LACTOSA, SACAROSA Y GLUCOSA  FERMENTABLES
 ALCALINO A ACIDO (AMARILLO)
 SULFATO DE HIERRO Y AMONIO INTERACCIONA
CON ACIDO SULFHIDRICO  SULFURO DE HIERRO
(NEGRO)
CITRATO AGAR
 CITRATO  CITRATO PERMEASA  CARBONATOS
ALCALINOS  AZUL
LIA (LISINA IRON AGAR)
• FERMENTACION DE LA
GLUCOSA  MEDIO ACIDO
(AMARILLO)
• SULFATO DE HIERRO Y
AMONIO INTERACCIONA
CON ACIDO SULFHIDRICO
 SULFURO DE HIERRO
(NEGRO)
• PROTEUS, PROVIDENCIA Y
ALGUNAS MORGANELLAS
DESAMINAN LA LISINA
ACIDO + O2 (ROJO)
• DESCARBOXILACION 
LILA
K/A
R/A
K/K
H2S
SIM
SH2 (S), INDOL (I), MOVIMIENTO (M)
 Tiosulfato de sodio  ácido sulfhídrico + hierro  negro
 Semisólido  movilidad enturbiamiento del medio
 El indol producido + aldehido del reactivo  rojo.
ANTIBIOGRAMA: ENTEROBACTERIAS
 Agar Mueller Hinton
 Método de crecimiento o suspensión
directa de la colonia. Ajustar a la
turbidez equivalente al estándar 0,5
de la escala de Mc. Farland.
 Dispersar por toda la placa
uniformemente
 Colocar encima de la siembra discos
de papel conteniendo los antibióticos
estandarizados para urocultivo, según
agente etiológico identificado.
 Incubar a 37° por 18-24 horas
 Leer
LECTURA
Realizar la lectura del
antibiograma realizando
la medida del diámetro
del disco de antibiótico
y comparando con
tablas estandarizadas de
lectura.
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