Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación
UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA
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ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA
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TESIS I
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Características fisicoquímicas de los aceites esenciales de las hojas de Cymbopogon citratus
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DE
y determinación del porcentaje relativo de sus componentes hidrocarbonados y oxigenados
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TE
AUTOR(es): AZAÑA DÍAZ, Victoria Janet
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CASTILLO VÁSQUEZ, Lessly Tatiana
ASESOR:
Dr. VENEGAS CASANOVA, Edmundo Arturo
TRUJILLO – PERÚ
2017
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DEDICATORIA
“A Dios por haberme dado la vida,
guiado en cada paso de ella,
poner la fuerza y sapiencia necesaria
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para lograr mis objetivos y metas”.
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“A mis abuelos Otto Diaz
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Lecca y Victoria Goicochea de Diaz,
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que Dios guarda en su gozo, por
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formarme humanísticamente y ser mi
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inspiración a seguir”.
DE
“A mi madre Anabel Diaz Goicochea por su amistad,
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apoyo, confianza, por su paciencia, comprensión y
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cada uno de sus consejos en la etapa de esta
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carrera profesional y personal, a mi segunda
madre Hercelinda Diaz Goicochea
por su apoyo constante, desinteresado y leal,
que me brindo en cada momento de la etapa profesional”.
Atte. Victoria Janet Azaña Diaz.
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AGRADECIMIENTO
A nuestro asesor Dr. Q.F. Edmundo
Venegas Casanova por su amabilidad,
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comprensión y disposición, por el tiempo
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que nos dedicó para que este trabajo
“A mi familia y amigos,
por su amor, apoyo incondicional,
comprensión, por todos sus buenos
consejos y cariño incondicional”.
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culminara exitosamente.
Las Autoras.
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PRESENTACIÓN
Señores miembros del jurado dictaminador:
Dando cumplimiento a lo establecido por el Reglamento de Grados y Títulos de la Facultad
de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo – La Libertad, sometemos
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a vuestra honorable consideración y elevado criterio el presente informe final de Tesis I:
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Características fisicoquímicas de los aceites esenciales de las hojas de Cymbopogon
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oxigenados
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citratus y determinación del porcentaje relativo de sus componentes hidrocarbonados y
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Es propicia esta oportunidad para manifestarle nuestro más sincero reconocimiento a nuestra
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nuestra formación profesional.
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alma máter y toda su plana docente, que con su capacidad y buena voluntad contribuyeron a
DE
Dejamos a vuestro criterio Señores Miembros del Jurado dictaminador, la respectiva
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calificación del presente informe.
__________________________
AZAÑA DÍAZ, Victoria Janet
__________________________
CASTILLO VÁSQUEZ, Lessly Tatiana
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JURADO DICTAMINADOR
___________________________________
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Dr. RUIZ REYES, Segundo Guillermo
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PRESIDENTE
____________________________________
MIEMBRO
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DE
Dr. VENEGAS CASANOVA, Edmundo Arturo
____________________________________
Mg. RENGIFO PENADILLOS, Roger Antonio
MIEMBRO
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RESUMEN
Se realizó la determinación de las características fisicoquímicas y el porcentaje relativo de los
componentes hidrocarbonados y oxigenados del aceite esencial de las hojas de Cymbopogon
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citratus.
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La extracción del aceite esencial se realizó mediante el método de hidrodestilación, usando
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el equipo Clevenger, con un rendimiento de 0.7 %, las características organolépticas
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obtenidas son color: cristalino amarillo; olor: suigéneris; sabor: astringente, amargo, picante
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y pujante; textura: aceitosa y oleosa.
M
Las características fisicoquímicas obtenidas, fueron la densidad de 0.8983, índice de
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refracción de 1.4730, pH de 5.0, índice de acidez de 21.318, respecto a la solubilidad se
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determinó que es soluble en alcohol de 96%, n-hexano y éter etílico, medianamente soluble
CA
en alcohol de 70% y 80%, e insoluble en agua y alcohol de 50%.
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La separación de los componentes hidrocarbonados y oxigenados del aceite esencial de
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Cymbopogon citratus, se consiguió obtener el porcentaje relativo de sus componentes
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hidrocarbonados de 13.29 % y 2.92 % oxigenados.
Palabras clave: Aceite esencial, componentes hidrocarbonados, componentes
oxigenados, características fisicoquímicas, organolépticas.
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ABSTRACT
The determination of the physicochemical characteristics and the relative percentage of the
hydrocarbon and oxygen components of the essential oil of the leaves of Cymbopogon
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citratus was carried out.
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The extraction of the essential oil was carried out using the hydrodistillation method, using
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the Clevenger equipment, with a yield of 0.7%, the obtained organoleptic characteristics are:
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yellow crystalline color; Odor: suigéneris; Flavor: astringent, bitter, spicy and thriving;
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Texture: oily and oily. The physicochemical characteristics obtained were the density of
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0.8983, refractive index of 1.4730, pH of 5.0, acid index of 21,318, with respect to solubility
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was determined to be soluble in alcohol of 96%, n-hexane and ethyl ether, medium Soluble
CA
DE
in alcohol of 70% and 80%, and insoluble in water and alcohol of 50%.
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TE
The separation of the hydrocarbon and oxygen components of the essential oil of
BL
Cymbopogon citratus was able to obtain the relative percentage of its hydrocarbon
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components of 13.29% and 2.92% oxygenated.
Key words: Essential oil, hydrocarbon components, oxygenated components,
physicochemical, organoleptic characteristics.
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INDICE
INTRODUCCIÓN .............................................................................................................1
MATERIAL Y METODO .................................................................................................7
RESULTADOS ...............................................................................................................15
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DISCUSIÓN .................................................................................................................... 17
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CONCLUSIONES ........................................................................................................... 22
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RECOMENDACIONES .................................................................................................. 23
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REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS……………………………………………………24
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ANEXOS ......................................................................................................................... 26
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I.
INTRODUCCIÓN
Actualmente se está enfatizando en las propiedades medicinales de las plantas debido a que
poseen un mayor potencial farmacológico y además mayores cualidades terapéuticas 1.
Las plantas dotadas de principios activos sirven para curar y aliviar males de la humanidad.
Las conocemos desde la antigüedad.; a pesar de ser muy antigua y de trasmitirse de
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generación en generación en la actualidad es objeto de numerosas investigaciones
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demostrándose experimentalmente algunas acciones atribuidas a estas plantas 1,2.
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Entre las plantas reconocidas por sus comprobadas propiedades medicinales se encuentra el
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Cymbopogon citratus.
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Es originaria de la región suroriental de Asia y se encuentra ampliamente distribuida tanto
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en América Central como en América del Sur. En nuestro país las principales zonas de
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producción son Lima, Cajamarca y Ucayali 3.
DE
La parte utilizables por la industria está constituida por las hojas y los tallos tiernos. Crece
CA
adecuadamente en una gama de suelos, pero, su mayor productividad se da en los suelos
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fértiles de textura media a ligera (franco a franco arenoso) y con buena capacidad retentiva
de agua. En los suelos arenosos se tiene mayor producción de follaje pero menor aceite
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esencial. No tolera las condiciones de mal drenaje. Desarrolla bien en zonas con temperatura
media entre 22°C y 28ºC 4.
Es conocida en diferentes partes del mundo con diferentes nombres vulgares como: caña
santa, cañita de limón, hierba de la calentura, lemon grass, limoncillo, hierba de limón,
mantojo de limón, malojillo limonero, campin de cheiro, campin sir, campin limao en Brasil,
paja de la meca, junco oloroso, citronen grass, pasto citron, te de limón, zacate citrion, pero
el nombre de hierba luisa es casi exclusivo del Perú 3,5.
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La hierba luisa, dentro de la botánica sistemática, se encuentra clasificada de la siguiente
manera:6
Reino: Cormobionta
División: Magnoliophyta
Clase: Liliatae (Liliopsida)
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Subclase: Commelinidae
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Orden: Cyperales
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Familia: Poaceae
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Tribu: Andropogoneae Dumort
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Género: Cymbopogon
Especie: Citratus
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El Cymbopogon citratus es una hierba perenne, robusta, tallos muy ramificados de 1 a 2 m
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de alto con los nudos ceríferos. Hojas aromáticas, amontonadas cerca de la base, lampiña,
de 6 a 10 dm, sus ramas alargadas y un tanto pendulazas; los racimos bifurcados, portando
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en la bifurcación una espiguilla estaminada sin arista, la espiguilla sésil, del par o los pares
inferiores diferentes de las de arriba. Racimos de 1 a 1,5 cm de largo, la espiguilla sésil línea
lanceolada de 4 a 5 cm de largo acuminada con el dorso cóncavo en la parte baja. No florece
o lo hace muy rara vez 7.
El Cymbopogon citratus el cual posee propiedades antibacterianas, antimicóticos,
antiprotozoaria, antitumoral, antiinflamatoria. El potencial antibacteriano se debe porque
posee dentro de su composición al Citral.7
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Como toda planta, la composición química es muy compleja y por el momento la existencia
de algunos componentes no tienen mucho valor práctico. Diversas investigaciones
fitoquímicas realizadas tanto en las hojas desecadas como en el aceite esencial han permitido
identificar los siguientes compuestos: monoterpenos borneol, canfeno, canfor, car-3-eno,
cineal, citral, citral a, citral b, citronelol, acetato de citronelol, fenchona, geranial, geranio,
acetato de geraniol ,6-metil-hepta-5-en-2-2-ona, limoneno, linaldol, óxido de linaldol,
a-pineno,
b-pineno,
terpineol
terpinoleno
triperpenos,
cymbopogenol,
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mentol,
metil-heptenol,
heptenona,
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alcanos-3-metil-hepta-2-ona,
hexacosan10-1,
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humuleno,
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cymbopogona, cymbopogonol, sesquiterpeno, oxi-bisaboleno, b-cardineno, farnesol,
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triacontan-1-1 ,b-sitosterol 7.
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El aceite esencial u óleo volátil es considerado como desecho del metabolismo de la planta,
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ya que no se conoce el papel que desempeña en esta. Son compuestos terpenicos, formados
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por sustancias orgánicas volátiles y de consistencia oleosa. Forma parte del grupo de los
DE
isoprenoides.7
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Los llamados aceites esenciales son constituyentes odoríficos o esencias de una planta, el
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término “aceite” probablemente se origina del hecho que el aroma de una planta existe en
BL
las glándulas o entre las células en forma líquida. Proceden de las flores, frutos, hojas, raíces,
BI
semillas y corteza de los vegetales. Los aceites se forman en las partes verdes (con clorofila)
del vegetal y al crecer la planta son transportadas a otros tejidos, en concreto a los brotes de
flor. Se desconoce la función exacta de un aceite esencial de un vegetal, puede ser para atraer
a los insectos, para la polimerización o para repeler a los insectos nocivos o puede ser
simplemente un producto metabólico intermedio 3,7.
Los aceites esenciales son mezclas complejas de origen orgánico cuyos constituyentes
pertenecen, de manera casi exclusiva a dos grupos: el grupo de los terpenoides y el grupo de
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los compuestos aromáticos derivados del flenilpropano, mucho menos frecuente. Se
encuentran en mayor incidencia en las Lauráceas, Coníferas, Mirtáceas, Liliáceas, Labeadas,
Umbelíferas, Rutáceas y compuestas. Poseen propiedades antisépticas por el coeficiente
fenol que contienen. Son productos volátiles de naturaleza compleja, con aroma agradable
en la mayoría de ellas 7.
El aceite esencial de la hierba luisa se caracteriza por su fuerte olor a limón es producto de
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un alto contenido de citral el cual es químicamente conocido como 3,7 dimetil 2,6 octadienal.
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Encontraremos además otros componentes como :el mirceno ,metil heptanona el limoneno
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,el dipenteno ,linolol ,citronelal ,isocitral ,dacanol farnesol aldehido octolitico o caprilico,
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aldehido manilico o pelargonico, aldehido capricho, acido capricho y acetato de geranilo en
AC
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menores cantidades 7.
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Es importante su utilización ya sea para fines industriales como la fabricación de
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desodorantes, detergentes y otros productos domésticos que requieren una fragancia fresca
DE
además también se la utiliza como saborizante ,en pequeñas cantidades debido a su fuerte
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olor a limón 7,3.
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TE
El aceite esencial presenta, además propiedades medicinales reconocidas .Tiene acción
BL
farmacológica sobre el sistema cardiocirculatorio, como antihipertensivo, sobre el sistema
BI
digestivo, como antiespasmódico, sobre el sistema respiratorio, como antiasmático, sobre la
piel y mucosas, como antibacteriano (bacterias Gram positivas como por ejemplo Bacillus
subtilis y Staphylococcus aureus) y antimicótico. Se le atribuyen otras propiedades
medicinales, aun no probadas como la de ser febrífugo, antitusivo, estomaquico,
carminativo, diaforético y expectorante. Estudios clínicos realizados para precisar las
propiedades terapéuticas de esta especie sugieren que el mirceno, uno de los componentes
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del aceite esencial posiblemente sirva como analgésico específico para partes particulares
del cuerpo .Su uso se realiza tanto oral como tópicamente ,8,9.
Dentro de la composición del aceite esencial al que encontramos en mayor porcentaje es al
citral 7.
El citral se encuentra en la naturaleza de dos o probablemente cuatro isomeros .Estos dos
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componentes conocidos como citral a (geranial) y citral b (peral) son isomeros geométricos
que difieren solamente en la posición relativa del doble enlace en el átomo de carbono
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terminal .En una mezcla natural predomina ligeramente el isomero a 7.
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El citral es un aceite fluido ligero, débilmente coloreado de amarillo, inactivo y de un olor a
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limones penetrantes. Su punto de ebullición es a 760mm de Hg 7.
Es muy sensible a los ácidos y a los compuestos ácidos por ello puede por ejemplo con
FA
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muchos derivados formar compuestos cíclicos 7.
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La oxidación se produce a velocidad moderada en el aire, lo cual debe tenerse en cuenta al
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almacenar el material .Desde el punto de vista medicinal ,el citral tiene acción histamínica y
IO
TE
es analgésico en oftalmología 7.
BL
Para la obtención del aceite esencial es necesario realizar la destilación por arrastre de vapor.
BI
La destilación se basa en la diferencia de los puntos de ebullición mediante esta se obtiene
el aceite esencial, siendo este un compuesto volátil de bajo punto de ebullición. La
destilación por arrastre al vapor es una variación de la destilación simple, se hace pasar una
corriente de vapor a través de la mezcla de reacción y los componentes que son solubles en
vapor son separados (aceites) 8.
La importancia es conocer mejor las propiedades fisicoquìmicas de Cymbopogon citratus,
y determinación de porcentaje relativo y sus componentes hidrocarbonados, teniendo en
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cuenta su amplio uso comercial en el mundo y su potencial desarrollo en nuestro país, y
lograr un mejor aprovechamiento de este recurso natural, por lo cual se planteó el siguiente
problema:
¿Cuáles son las características fisicoquímicas de los aceites esenciales de las hojas de
Cymbopogon citratus y el porcentaje relativo de sus componentes hidrocarbonados y
oxigenados?
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A
De acuerdo a lo expuesto el trabajo estuvo orientado a cumplir los siguientes objetivos:
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OBJETIVOS
Determinar las características fisicoquímicas de los aceites esenciales de las hojas
BI

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Objetivo General
A
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Cymbopogon citratus y el porcentaje relativo de sus componentes hidrocarbonados
M
AC
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y oxigenados.
Realizar la extracción del aceite esencial de las hojas de Cymbopogon citratus
DE

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(Hierba luisa).
Separar los componentes hidrocarbonados y oxigenados de los aceites esenciales de
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TE

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Objetivos Específicos
BI
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las hojas de Cymbopogon citratus (Hierba luisa).
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II.
MATERIAL Y METODO
1. Descripción del diseño
1.1. Materiales
1.1.1. Material Botánico
Se obtuvo muestras del jardín botánico de plantas medicinales “Bertha Rosa
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A
Elena de los Ríos” de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad
UI
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Nacional de Trujillo.
1.1.3. Equipos
BI
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Estufa eléctrica “Memmert”
AC
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Y
5 kg de hojas de Cymbopogon citratus
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1.1.2. Material biológico
Balanza analítica “Sartorius”
DE
Equipo Clevenger – extracción de aceites volátiles.
CA
Columna cromatográfica de vidrio
IO
TE
1.1.4. Material de vidrio y porcelana
BL
Pipetas 1 y 5 mL.
BI
Vasos de precipitación de 50 y 100 mL.
Fiolas de 50 y 100 mL
Cápsulas de porcelana
1.1.5. Reactivos
-Cloruro de sodio, Merck
-Sulfato de sodio, Merck
-Agua destilada
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- Alcohol 96º
- n- hexano
- Metanol
- Sílica Gel
1.1.6. Otros
-Viales de 5 cc, color ámbar.
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-Algodón hidrofílico.
M
-Termómetro,
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-Papel filtro
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-Cocina eléctrica.
A
Y
-Frascos color ámbar.
AC
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1.2. PROCEDIMIENTO
FA
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M
1.2.1 Recolección e identificación taxonómica 7,9,10,11,12
DE
Se recolectó 5 kg de hojas de Cymbopogon citratus obtenidas del Jardín
CA
Botánico de plantas medicinales “Bertha Rosa Elena de los Ríos” de la
IO
TE
Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo.
La planta fue llevada al Herbarium Truxillensis para su identificación
BI
BL
correspondiente.
1.2.2 Preparación de la muestra
a. Selección
La planta recolectada fue transportada al laboratorio de Farmacognosia de la
Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo,
donde se eliminó las sustancias extrañas presentes en la muestra.
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b. Lavado
Luego de la separación de las sustancias extrañas, se procedió a lavar las hojas
con agua destilada, seguido de una desinfección utilizando hipoclorito de sodio,
a una concentración de 200 ppm.
1.2.3. Obtención del aceite esencial de Cymbopogon citratus
El aceite esencial se extrajo a partir de las hojas frescas por el método de
IC
A
hidrodestilación, se cortó en pequeños trozos y se pesó 100 g luego se colocó en
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un balón y se agregó 400 mL de agua destilada y finalmente se calentó hasta
O
Q
punto de ebullición durante 3 h. Como producto del proceso de condensación se
BI
obtuvo dos fases, una de aceite esencial y la otra, de agua; posteriormente se
A
Y
separó el aceite esencial y se deshidrató las impurezas de agua en el aceite
AC
I
esencial con Na2SO4 anhidro, se filtró y se guardó en un frasco de vidrio color
DE
temperatura de 4 oC7.
FA
R
M
ámbar (para evitar la descomposición por la luz), bajo refrigeración a una
CA
1.2.4 Determinación del rendimiento de aceite esencial de Cymbopogon citratus7
IO
TE
A partir de 100 g de hojas de Cymbopogon citratus se obtuvo un determinado
BL
volumen que fue medido por el método gravimetría-volumétrico, mediante el cual
BI
se determinó el porcentaje de rendimiento del aceite esencial (% RAE), aplicando
la siguiente fórmula:
% RAE = Vol. AE (mL)/ Pmuestra (g) x 100
Dónde:
% RAE: Porcentaje del rendimiento del aceite esencial
Vol. AE: Volumen del aceite esencial obtenido en mililitros.
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Pmuestra: Peso de la muestra a destilar en gramos.
1.2.5 Parámetros fisicoquímicos del aceite esencial 9, 10
1.2.5.1 Determinación de las características organolépticas
Los carácteres organolépticos incluyen olor, color, sabor y textura.
1.2.5.1.1 Determinación de olor: Se tomó una tira de papel secante de
IC
A
aproximadamente 1 cm de ancho por 10 cm de largo y se
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introdujo en un extremo en la muestra de ensayo. Luego se óleo
BI
Determinación del color: En un tubo de ensayo bien limpio y
Y
1.2.5.1.2
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y se determinó si corresponde con la característica del producto.
AC
I
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seco, se llenó hasta las tres cuartas partes con la muestra de
M
ensayo y se observó el color, la transparencia, la presencia de
FA
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partículas y la separación en capas.
DE
1.2.5.1.3 Determinación del sabor: Se tomó una pequeña alícuota y se
CA
probó el sabor.
IO
TE
1.2.5.1.4 Determinación de textura: Se tomó una alícuota y se sintió con
BL
el tacto la textura y consistencia.
BI
1.2.5.2 Determinación de la densidad relativa.
Se pesó el picnómetro vacío y secó, se llenó con la porción de ensayo, manteniendo
la temperatura de 25 °C (±1°C) durante 15 min y luego se ajustó el líquido al nivel
requerido, se pesó cuidadosamente el picnómetro con la porción de ensayo y se
repitió la operación con el agua destilada a 25 °C.
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Expresión del resultado
La densidad relativa a 25 ° C se calculó por la siguiente fórmula:
D25 = M1 -M
M2-M
Dónde:
UI
M
M2: peso del picnómetro con el agua (g)
IC
A
M1: peso del picnómetro con la muestra (g)
O
Q
M: peso el picnómetro vacío (g).
Y
BI
Los resultados se aproximan hasta la tercera cifra.
AC
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A
1.2.5.3 Determinación del índice de refracción
M
Se colocó sobre el prisma de medición una gota de agua destilada, utilizando para
FA
R
ello una varilla de vidrio que no tenga bordes agudos, se ajustó el equipo
DE
seleccionando la zona del espectro visible que aparece en la línea límite del campo
CA
visual, moviendo el compensador cromático y colocando la intersección del
IO
TE
retículo sobre la línea límite de los campos claro y oscuro.
BL
Después de haber realizado el ajuste del refractómetro, se colocó una gota de la
BI
muestra de ensayo sobre el prisma de medición, se cerró el termo prisma y se
enfocó la luz por medio del espejo, de modo tal que la misma incida sobre la
apertura de entrada del prisma de medición y se procedió de la misma forma que
con el agua.
11
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1.2.5.4 Determinación del pH
Se determinó el pH de la muestra mediante tira reactivas de pH. Se introdujo el
papel pH en una muestra de aceite colocada previamente en un tubo de ensayo.
1.2.5.5 Solubilidad
Se colocó en 7 tubos 0,5 mL de aceite esencial y luego se añadió a cada tubo por
IC
A
separado 5 mL de agua, 5 mL de etanol 50%, 5 mL de etanol 70%, 5 mL de etanol
M
80%, 5 mL de etanol 96%, 5 mL n-hexano y 5 mL de éter etílico respectivamente.
Q
UI
Luego se agitó cada tubo y se observó en cada uno de ellos si se produce algún
Se preparó una solución que consiste en una mezcla de partes iguales de
AC
I
-
A
Y
1.2.5.6 Determinación del índice de acidez 7
BI
O
enturbiamiento.
-
FA
R
M
alcohol-éter etílico neutralizado.
En un matraz de capacidad adecuada se pesó entre 1 a 2 g de aceite
DE
esencial, luego se añadió 60 mL de alcohol-éter y III gotas de fenolftaleína,
CA
se agitó y valoró con la solución KOH 0.1 N hasta coloración ligeramente
BL
Se anotó los mililitros gastados y se efectuaron los cálculos.
BI
-
IO
TE
rosada.
IA =
5.61 x V
P
Dónde:
IA: Índice de acidez
P: Peso, en gramos de la muestra ensayada
V: Volumen en mililitros, de hidróxido de potasio utilizado
12
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1.2.5.7. Separación y determinación del porcentaje relativo de componentes
Hidrocarbonados y Oxigenados del aceite esencial 7,13

Medición de los índices de refracción de los solventes utilizados para el
desarrollo de la cromatografía en columna
Se medió alícuotas de los solventes n- hexano y metanol; y su índice de refracción
según procedimiento. Se colocó sobre el prisma de medición una gota de solvente,
IC
A
utilizando para ello una varilla de vidrio que no tenga cantos agudos, se ajustó el
UI
M
equipo seleccionando la zona del espectro visible, moviendo el compensador
O
Q
cromático y colocando la intersección del retículo sobre la línea límite de los
BI
campos claro y oscuro. Después de haber realizado el ajuste del refractómetro, se
A
Y
colocó una gota de la muestra de ensayo sobre el prisma de medición, se cerró el
AC
I
termo prisma y se enfocó la luz por medio del espejo, de modo tal que la misma
FA
R
M
incida sobre la apertura de entrada del prisma de medición y se procedió de la
Preparación de la muestra
CA

DE
misma forma que con el agua.
IO
TE
Se pesará exactamente 1 g de aceite esencial en un vaso de precipitado de
Montado de cromatografía en columna cromatográfica
BI

BL
capacidad adecuada y se diluye este en 5 mL de n-hexano.
Se adaptó en un soporte metálico una columna cromatografía de vidrio (de
dimensiones: 3 cm de ancho por 30 cm de largo), posteriormente con ayuda de un
embudo se empaca con sílica gel granulada hasta las ¾ partes, cuidando no
respirar las partículas de SiO2, que se desprenden en el proceso. Una vez
culminado el empacado se vierte con la ayuda del mismo embudo la muestra de
aceite esencial la muestra de aceite esencial, repitiendo el proceso con 2 fracciones
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sucesivas de 5 mL de n-hexano que garanticen el lavado total del vaso que
contiene la muestra.

Desarrollo Cromatográfico
Sobre los primeros 10 mL de n- hexanos utilizados para adsorber la muestra sobre
la sílica gel granulada, se vierten gradualmente 50 mL más del solvente, esperando
IC
A
su elución total de la columna y colectando la fracción en un matraz de capacidad
M
adecuada. Enseguida se adicionó gradualmente 50 mL de metanol y se esperó la
Q
UI
elución de la misma.

Y
BI
O
Determinación de los índices de refracción finales
AC
I
A
A una alícuota de las fracciones de n-hexano y metanol eluidas se midió el índice
M
de refracción.
FA
R

Determinación de porcentaje de compuestos hidrocarbonados y oxigenados
CA
DE
presentes en el aceite esencial
IO
TE
Las fracciones de n-hexano y metanol eluidas se vertieron en cápsulas de
porcelana de capacidad adecuada y posteriormente se evaporarán los solventes en

BI
BL
baño de agua a 70 ºC cuidando la permanencia de las fracciones de aceite esencial.
Plan de recolección, procesamiento y análisis de datos
La información se almacenó en una hoja de datos diseñado para este fin,
posteriormente fueron ingresados en una hoja de cálculo del programa Excel ver.
2016, procesados para ser expuestos en tablas de doble entrada, de acuerdo a las
características fisicoquímicas, separación de componentes y porcentaje relativo de
componentes hidrocarbonados.
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III.
RESULTADOS
Tabla 1. Determinación del rendimiento del aceite esencial (%RAE) de las
hojas de Cymbopogon citratus (Hierba luisa)
100 g
Volumen de aceite esencial
0.7 mL
% RAE
0.7
IC
A
Peso de muestra
BI
O
Q
UI
M
Tabla 2. Características organolépticas del aceite esencial de las hojas de
Cymbopogon citratus (Hierba luisa)
Y
CARACTERÍSTICAS ORGANOLÉPTICAS
Cristalino amarillo
Olor
Sabor
Suigéneris
Astringente, amargo, pungente
Textura
Aceitosa, oleosa
DE
FA
R
M
AC
I
A
Color
IO
TE
CA
Tabla 3. Parámetros físicos del aceite esencial de Cymbopogon citratus (Hierba
luisa)
RESULTADO
Densidad relativa
0.898
Índice de Refracción
1.4730
pH
5
BI
BL
PARAMETRO FISICO
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Tabla 4. Solubilidad del aceite esencial de las hojas de Cymbopogon citratus (Hierba
luisa)
ASPECTO
MISCIBILIDAD
Agua
Dos fases
No
Alcohol 50%
Turbio
No
Alcohol 70%
Turbio
Medianamente
Alcohol 80%
Opalescencia y turbidez
Medianamente
Alcohol 96%
Soluble cristalino
Sí
n-Hexano
Soluble medio cristalino
Éter etílico
Soluble cristalino
UI
M
IC
A
SOLUCION
Sí
Y
BI
O
Q
Sí
AC
I
A
Tabla 5. Parámetros químicos del aceite esencial de las hojas de Cymbopogon citratus
(Hierba luisa)
RESULTADO
FA
R
M
PARAMETRO QUIMICO
21.318
DE
Índice de Acidez
IO
TE
CA
Tabla 6. Porcentaje relativo de los componentes Hidrocarbonados y Oxigenados del
aceite esencial de las hojas de Cymbopogon citratus (Hierba luisa)
BL
CARACTERÍSTICAS
BI
Componentes Hidrocarbonados
Componentes Oxigenados
CANTIDAD (g)
PORCENTAJE (%)
0.1329
13.29
0.0292
2.92
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IV.
DISCUSIÓN
La extracción del aceite esencial de Cymbopogon citratus (Hierba luisa), se utilizó el
método de hidrodestilacion, técnica muy utilizada para la obtención de esencias fluidas,
especialmente las utilizadas en perfumería. Al utilizar agua como solvente se obtiene una
ventaja importante en la posible aplicación del aceite en contacto directo con alimentos,
puesto que las propiedades del agua no perjudican al aceite. Se utiliza a nivel industrial
IC
A
debido a su alto rendimiento, a la pureza del aceite obtenido y porque no requiere
UI
M
tecnología sofisticada6,7.
O
Q
De esta manera de 100 g de muestra se obtuvo como resultado un 0.7 % de rendimiento
BI
(Tabla 1), según la norma mexicana NMX-F-062-1974, el rango de rendimiento para
A
Y
aceites esenciales se encuentra del 0.2 – 2 %, en tanto el rendimiento obtenido se
AC
I
encuentra dentro de los límites especificados. Existen diferentes factores que afectan el
FA
R
M
rendimiento de la extracción de aceite esencial, un factor determinante es el método
DE
empleado para la obtención del aceite esencial, en el estudio realizado por Maria C.
CA
Colecio Juarez y col (2011), se encontró que el mejor método para realizar la extracción
IO
TE
de aceites esenciales es la destilación por arrastre de vapor o hidrodestilación, según AttiSantos et al. (2005), los métodos más empleados son hidrodestilación, presión,
BI
BL
compresión, destilación por arrastre de vapor, extracción con fluidos supercríticos, lo
que corrobora que el método empleado es el más apropiado14,15,16.
Dentro de las características organolépticas observadas se encontró; color: cristalino
amarillo, olor: suigéneris, sabor: astringente, amargo, picante y pujante, textura: aceitosa
y oleosa. (Tabla 2), dichos resultados son contrastados con la descripción de la Norma
Mexicana NMX-F-366-S-1980, cumpliéndose en su totalidad11.
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En la evaluación de la densidad relativa, la Farmacopea de los Estados Unidos (USP)
refiere un rango de 0.869 a 0.894 para densidad relativa, la norma Mexicana NMX-F366-S-1980 proporciona el mismo valor, en el caso del aceite esencial en estudio tiene
una densidad de 0.898 (Tabla 3), por lo que se encuentra ligeramente por encima de los
parámetros normales de calidad establecidos para los aceites esenciales, cabe recalcar
que los aceites esenciales al estar compuestos fundamentalmente por terpenos y
IC
A
derivados, y estos compuestos orgánicos a su vez por átomos ligeros (C, H, O) formando
M
cadenas y anillos, tienen una densidad menor que el agua (densidad menor que 1 g/m3)
Q
UI
pero hay algunos aceites esenciales con mayor densidad como los de almendras amargas,
BI
O
mostaza, canela, perejil o clavo 11, 14 .
A
Y
El índice de refracción se utiliza como prueba fisicoquímica para el control de pureza y
AC
I
calidad de aceites puros. El procedimiento más empleado para esta determinación se
FA
R
M
señala en la United Stated Pharmacopoeia 40, método 831. Los refractómetros utilizan
DE
como principio de medición, la determinación del ángulo límite el cual presenta en el
CA
campo visual un contraste claro y otro oscuro. La línea de separación entre ambos
IO
TE
campos establece el ángulo límite de la luz incidente. El índice de refracción reportado
en el estudio fue 1.4730 (Tabla 3), la norma antes mencionada indica que el aceite debe
BI
BL
tener un índice de refracción entre 1,4830 – 1,4873, por lo que el valor obtenido en el
análisis es inferior, esto puede deberse a que la temperatura a la cual se realizó la medida
fue superior a la especificada en la Farmacopea de referencia, ya que en general las
mediciones se deben realizar a temperatura ambiente, es decir cerca de 20°C, otro factor
que influye en la medición del refactómetro, es la presión y la longitud de onda
10,12
.
Con la densidad e índice de refracción se pueden hacer deducciones sobre componentes.
Por lo tanto, densidades menores a 0.9 e índices de refracción menores de 1.47 sugieren
un alto porcentaje de hidrocarburos terpénicos o compuestos alifáticos, si la densidad es
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mayor de 0.9 y el índice de refracción menor de 1.47 es posible la presencia de
compuestos oxigenados alifáticos en la muestra. Los hidrocarburos aromáticos tienen
densidades menores de 0.9 pero sus índices de refracción son mayores de 1.47, y los
compuestos oxigenados aromáticos o alicíclicos tienen densidades e índices de
refracción superiores a los límites señalados 13.
El pH identificado del aceite esencial de Cymbopogon citratus (Hierba luisa) fue de 5
IC
A
(Tabla 3), sin embargo se debe resaltar que la medida de este se realizó mediante tira
UI
M
reactiva de pH, y no mediante pH-metro, sin embargo da una referencia del valor, no se
O
Q
encontró como una característica necesaria de analizar según la norma técnica NMX-F-
BI
062-1974, de igual manera otras normas como la Farmacopea Europea, indican que es
A
Y
una análisis que no aplica para este tipo de producto. El pH ácido está dado por la
AC
I
concentración de hidrogeniones que se liberan de los compuestos que poseen radical
FA
R
M
hidroxilo, formilo y carboxilo presente en el aceite esencial11,12.
DE
En cuanto a la solubilidad (Tabla 4), los aceites esenciales son completamente solubles
CA
en alcohol puro, si al alcohol le vamos añadiendo agua de forma progresiva, la mezcla
IO
TE
disolverá cada vez menos aceite esencial, esta mezcla se trata de un equilibrio liquido-
.
BI
14
BL
liquido-liquido, en un sistema formado por 3 componentes aceite esencial, agua y alcohol
La prueba de solubilidad se realizó empleando 0.5 mL de muestra, siendo soluble
cristalino en alcohol de 96%, soluble medio cristalino en n-hexano y soluble cristalino
en éter etílico, medianamente soluble y turbio en alcohol de 70%, opalescencia y turbio
en alcohol de 80%, siendo insoluble y turbio en agua y alcohol de 50%. La solubilidad
de un aceite en etanol depende de su contenido de compuestos oxigenados12, 13.
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El índice de acidez del aceite esencial es de 21.318, el cual es elevado y se atribuye a
muchos factores entre los que resaltan el tiempo de almacenamiento de la muestra y edad
de las hojas procesadas14.
En la determinación del porcentaje de componentes hidrocarbonados (eluida con
Metanol) se obtuvo 13.29 % y componentes oxigenados (eluida con n-hexano) (Tabla
6), se obtuvo 2.92 %, lo que en total componen el 16.21 % de la muestra empleada en la
IC
A
cromatografía, el porcentaje restante se pudo haber perdido en el proceso de elución de
UI
M
la columna y en el proceso de vaporización de las fracciones de solvente (realizada a
O
Q
68ºC) o debido a la temperatura de ambiente, ya que los aceites esenciales en presencia
Y
BI
de oxígeno son susceptibles a oxidación14.
AC
I
A
Existen otros factores que pueden influir en la biosíntesis de aceite esencial en la planta,
M
estás características varían de región y claramente por país, de tal manera que la
FA
R
biosíntesis de aceites esenciales puede variar aunque la especie sea la misma, los factores
DE
son, el pH del suelo de cultivo, esto afecta directamente la absorción de nutrientes
CA
composición del suelo, por ejemplo la absorción de metales como el hierro, Zinc,
IO
TE
magnesio, se dificulta en suelos de carácter alcalino (pH mayor a 7) debido a que la sales
BL
de estos son menos solubles en este medio y se facilita en suelos con pH ácido, clima,
BI
altura, condiciones ambientales como el déficit de nutrientes y agua, existen también
microorganismos asociados (simbiosis) con las plantas que ayudan a absorben
compuestos fosfóricos, los terrenos pobres en nutrientes no favorecen el desarrollo de la
panta, además de restringir el crecimiento de la planta pueden ocasionar la acumulación
de carbohidratos no estructurales y aumento de la síntesis de sustancias de defensa,
basadas en carbono, el balance carbono y nutrientes ha sido encontrada en especies que
crecen en ambientes con baja disponibilidad de nutrientes, en las que se produce aumento
de taninos, lignanos, fenoles o glicósidos de fenoles10, 17.
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Por otro lado, los aceites esenciales refractan la luz polarizada, también presentan un
poder rotatorio característico, debido a que en su composición existen numerosos
productos ópticamente activos, esta propiedad es de importancia en la detección de
BI
BL
IO
TE
CA
DE
FA
R
M
AC
I
A
Y
BI
O
Q
UI
M
IC
A
adulteraciones en las esencias11.
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V.
CONCLUSIONES
 Se realizó la extracción del aceite esencial de Cymbopogon citratus (Hierba luisa)
siendo el rendimiento de extracción de 0.7 %
 Se obtuvieron las siguientes características fisicoquímicas: Densidad relativa de
0.8983, índice de refracción de 1.4730, pH de 5, índice de acidez de 21.318, respecto
IC
A
a la solubilidad se determinó que es soluble en alcohol de 96%, N-hexano y Éter
M
etílico. Medianamente soluble en alcohol de 70% y 80%. Siendo insoluble en agua y
Q
UI
alcohol de 50%.
BI
O
 Se realizó la separación de los componentes hidrocarbonados y oxigenados del
Y
aceite esencial de Cymbopogon citratus (Hierba luisa), el cual se consiguió obtener
AC
I
A
el porcentaje relativo de sus componentes hidrocarbonados de 13.29 % y 2.92 %
BI
BL
IO
TE
CA
DE
FA
R
M
oxigenados.
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VI.
RECOMENDACIONES
 Se recomienda estudios posteriores para la determinación, caracterización y
cuantificación de los componentes del aceite esencial de Cymbopogon citratus.
 Se recomienda estudios para la determinación, caracterización y determinación de la
IC
A
concentración específica y porcentaje de compuestos Hidrocarbonados y Oxigenados
BI
BL
IO
TE
CA
DE
FA
R
M
AC
I
A
Y
BI
O
Q
UI
M
del aceite esencial de las hojas de Cymbopogon citratus.
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VII.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Jorge L. Botanica de los cultivos tropicales. (3era, ed) revisión aumentada. San Jose
Costa Rica. Ed Agroamerica – Instituto Interamericano de cooperación para la
Agricultura. Pp: 370, 461, 475 – 477; 2000.
2. Cabieses, F. Apuntes de Medicina Tradicional: La racionalización de lo irracional.
Lima: A&B; 1993.
IC
A
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UI
M
hierba luisa. Ecuador: Macas; 2011.
O
Q
4. Guerra,O & Rodríguez,G. Actividad Antimicrobiana del aceite esencial y crema del
Y
BI
Cymbopogon citratus (DC) .Revista Cubana de Plantas Medicinales 9; 2004.
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I
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5. Rodriguez R., Ruiz C., Arias G., Castro H., Martinez., J., y Stashenko, E. Estudio
M
comparativo de la composición de cuatro especies del género Cymbopogon (Poaceae)
FA
R
cultivadas en Colombia. Boletín latinoamericano y del Caribe de Plantas Medicinales y
DE
Aromáticas, 11; 2011.
CA
6. Del Pozo, X. 2006. Obtención de aceite esencial a partir de las hojas de hierba luisa
IO
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BL
antimicótico. Tesis de grado. (en línea) Consultado 29 de abril de 2017. Disponible en:
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7. Mendoza, D, Taborda M. Composición Química y Actividad acaricida del aceite
esencial de Cymbopongon citratus stapf contra el ácaro intradomiciliario
Dermatophagoides farinae (acari: Pyroglyphidae). Biosalud,9 (2); 2010.
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Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 51(2), 327–345. 12. 2010
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9. Bertha Boncún de Linares, Gilmer Zari Gil, Segundo Guillermo Ruiz, Marilú Soto
Vásquez, Edmundo Vengas Casanova, Armando Cuéllar, Lorenzo Medina Zumarán.
Guía de Prácticas Asignatura de Farmacognosia. Universidad Nacional de Trujillo. 2015
10. Universidad Nacional Federico Villareal. Actividad Antimicrobiana del aceite esencial
de “Hierba Luisa” frente a Vancomicina contra Staphylococcus Aureus. 2008
Consultado 29 de abril de 2017. Disponible en: http://es.scribd.com.
IC
A
11. NMX-F-062-1974. Alimentos. Aceite esencial destilado de Limón Mexicano. Normas
M
Mexicanas. Dirección General de Normas,1974.
Q
UI
12. USP. United Stated Pharmacopeial 40 . USA: U.S Pharmacopeial Convention; 2017.
BI
O
13. Aguirre Y, Gutierrez C. Características Fisicoquímicas y determinación del porcentaje
Y
relativo de sus componentes hidrocarbonados y oxigenados de la raíz de Cúrcuma
FA
R
M
Nacional de Trujillo. Perú; 2016.
AC
I
A
longa L (cúrcuma) procedente de la selva peruana – Madre de Dios. Universidad
14. Mejia F. Extracción de aceite esencial de romero (Rosmarius officinalis). Universidad
DE
Nacional de San Agustín Tecnología de Aceites y Grasas. Perú. p 18-20; 2010
IO
TE
1985.
CA
15. Puhlow M. El gran libro de las plantas medicinales, 6ta ed España, Editorial Everest,
BL
16. El-Hilaly, J., Hmammouchi, M., Lyoussi, B., Ethnobotanical studies and economic
BI
evaluation of medicinal plants in Taounate province (northern Morocco). Journal of
Ethnopharmacology 86; 2003.
17. Gunther E. The essential oil. New York, USA: Editorial Van Nostran Co. Inc. Vols. 1,
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O
Q
UI
M
IC
A
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BI
BL
IO
TE
CA
DE
FA
R
M
AC
I
A
Y
ANEXOS
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ANEXO N° 1
CÁLCULOS
1. Determinación del rendimiento del aceite esencial (%RAE) de Cymbopogon
%𝑅𝐴𝐸 =
𝑉𝑜𝑙. 𝐴𝐸(𝑚𝐿)
𝑥100
𝑃𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎(𝑔)
UI
M
Dónde:
IC
A
citratus (Hierba luisa).
O
Q
% RAE: Porcentaje del rendimiento del aceite esencial
BI
Vol. AE: Volumen del aceite esencial obtenido en mililitros.
AC
I
A
Y
Pmuestra: Peso de la muestra a destilar en gramos.
FA
R
M
De los datos obtenidos:
DE
Vol. A.E: 0.7 mL
%𝑅𝐴𝐸 =
0.7 𝑚𝑙
𝑥100
100 𝑔
%𝑅𝐴𝐸 = 0.7 v/p
BI
BL
IO
TE
CA
Pm: 100 g de Cymbopogon citratus
2. Determinación de las características Fisicoquímicas del aceite esencial de
Cymbopogon citratus (Hierba luisa).
a. Determinación de la densidad relativa
D25 =
M1 − M
M2 − M
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Dónde:
M1: Peso del picnómetro con la muestra A.E (g)
M2: Peso del picnómetro con el agua (g)
M: Peso el picnómetro vacío (g).
De los datos obtenidos:
IC
A
M1: 2.2007 g
M
M2: 2.3531 g
Q
UI
M: 0.8541 g
BI
O
2.2007 − 0.8541
2.3531 − 0.8541
1.3466
1.499
FA
R
M
AC
I
𝐷25 =
A
Y
𝐷25 =
DE
𝐷25 = 0.8983
IA =
5.61 x V
𝑃
BL
IO
TE
CA
b. Determinación del índice de acidez
BI
Dónde:
IA: Índice de acidez
P: Peso en gramos de la muestra A.E
V: Volumen en mililitros de KOH utilizados
De los datos obtenidos:
P: 1 g
V: 3.8 mL
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IA =
5.61 x 3.8
1
IA = 21.318
3. Determinación del porcentaje de los componentes Hidrocarbonados y Oxigenados
IC
A
de Cymbopogon citratus (Hierba luisa).
UI
M
a. Separación
O
Q
Componentes Hidrocarbonados
Y
BI
Muestra Metanol + Wcap = 18.3539 g
AC
I
A
Wcap = 18.2210 g
FA
R
M
Wmuestra = 0.1329 g ------------ 13.29%
Componentes oxigenados
DE
Muestra n-Hexano + Wcap = 12.8077 g
CA
Wcap = 12.7785 g
BI
BL
IO
TE
Wmuestra = 0.0292 g ------------ 2.92%
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ANEXO N° 2
IMAGENES
Se pesarón 100 g de
muestra y se sometieron
a destilación en el quipo
Clevenger.
BI
BL
IO
TE
CA
DE
FA
R
M
AC
I
A
Y
BI
O
Q
UI
M
IC
A
Rendimiento del Aceite esencial de Cymbopogon citratus (Hierba Luisa).
Se
obtuvo
el
%
rendimiento del aceite
esencial
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Caracteristicas Fisicoquímicas del Aceite esencial de Cymbopogon citratus (Hierba
Luisa).
a. pH
Y
Solubilidad
BI
BL
IO
TE
CA
DE
FA
R
M
AC
I
A
b.
BI
O
Q
UI
M
IC
A
Se obtuvo un pH de 5
0.5 ml de aceite
esencial + 5 ml de
agua (Insoluble)
0.5 ml de aceite
esencial + 5 ml
de etanol 50%
(Insoluble
turbio)
0.5 ml de aceite
esencial + 5 ml de
etanol
70%
(Medianamente
soluble)
0.5 ml de aceite
esencial + 5 ml de
etanol
80%
(Opalescencia y
turbidez)
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0.5 ml de aceite esencial
+ 5 ml de etanol 96%
(Soluble cristalino)
Y
BI
O
Q
UI
M
IC
A
0.5 ml de aceite esencial
+ 5 ml de N-hexano
(Soluble
medio
cristalino)
BI
BL
IO
TE
CA
DE
FA
R
M
AC
I
A
0.5 ml de aceite
esencial + 5 ml de Éter
etílico
(Soluble
cristalino)
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EXTRACCIÓN DE COMPONENTES HIDROCARBONADOS Y OXIGENADOS
Por cada 10 ml decantados
se procedía hacer la lectura
en el refractómetro
Para n-Hexano:
I.R Inicial: 1.36
I.R Final: 1.325
Metanol o n-Hexano
Sílica gel
BI
BL
IO
TE
CA
DE
FA
R
M
AC
I
A
Y
BI
O
Q
UI
M
IC
A
Para Metanol:
I.R Inicial: 1.363
I.R Final: 1.359
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SECADO Y DETERMINACIÓN DEL PESO DE LOS COMPONENTES
HIDROCARBONADOS Y OXIGENADOS
METANOL (Componentes
hidrocarbonados)
IC
A
Se tomaron alícuotas del resultado de
la extracción y se sometieron a
vaporización del solvente a 68°C
CA
DE
FA
R
M
AC
I
A
Y
BI
O
Q
UI
M
Capsula con alícuotas del resultado
BL
IO
TE
Muestra que se formaba luego de la
vaporización del metanol
BI
Se obtuvo un peso final de 0.1329 g en
donde estaban concentrados los
componentes hidrocarbonados
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n-hexano
(Componentes oxigenados)
FA
R
M
Muestra que se formaba luego de
la vaporización del n-Hexano.
AC
I
A
Y
BI
O
Q
UI
M
IC
A
Se sometió a vaporización del
solvente
BI
BL
IO
TE
CA
DE
Se obtuvo un peso final de 0.0292
g donde estaban concentrados los
componentes oxigenados.
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