Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA BI O Q UI M IC A ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA AC I A Y TESIS I FA R M Características fisicoquímicas de los aceites esenciales de las hojas de Cymbopogon citratus CA DE y determinación del porcentaje relativo de sus componentes hidrocarbonados y oxigenados IO TE AUTOR(es): AZAÑA DÍAZ, Victoria Janet BI BL CASTILLO VÁSQUEZ, Lessly Tatiana ASESOR: Dr. VENEGAS CASANOVA, Edmundo Arturo TRUJILLO – PERÚ 2017 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación DEDICATORIA “A Dios por haberme dado la vida, guiado en cada paso de ella, poner la fuerza y sapiencia necesaria IC A para lograr mis objetivos y metas”. M “A mis abuelos Otto Diaz Q UI Lecca y Victoria Goicochea de Diaz, BI O que Dios guarda en su gozo, por A Y formarme humanísticamente y ser mi FA R M AC I inspiración a seguir”. DE “A mi madre Anabel Diaz Goicochea por su amistad, IO TE CA apoyo, confianza, por su paciencia, comprensión y BL cada uno de sus consejos en la etapa de esta BI carrera profesional y personal, a mi segunda madre Hercelinda Diaz Goicochea por su apoyo constante, desinteresado y leal, que me brindo en cada momento de la etapa profesional”. Atte. Victoria Janet Azaña Diaz. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación AGRADECIMIENTO A nuestro asesor Dr. Q.F. Edmundo Venegas Casanova por su amabilidad, IC A comprensión y disposición, por el tiempo UI M que nos dedicó para que este trabajo “A mi familia y amigos, por su amor, apoyo incondicional, comprensión, por todos sus buenos consejos y cariño incondicional”. BI BL IO TE CA DE FA R M AC I A Y BI O Q culminara exitosamente. Las Autoras. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación PRESENTACIÓN Señores miembros del jurado dictaminador: Dando cumplimiento a lo establecido por el Reglamento de Grados y Títulos de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo – La Libertad, sometemos IC A a vuestra honorable consideración y elevado criterio el presente informe final de Tesis I: UI M Características fisicoquímicas de los aceites esenciales de las hojas de Cymbopogon BI Y oxigenados O Q citratus y determinación del porcentaje relativo de sus componentes hidrocarbonados y AC I A Es propicia esta oportunidad para manifestarle nuestro más sincero reconocimiento a nuestra FA R nuestra formación profesional. M alma máter y toda su plana docente, que con su capacidad y buena voluntad contribuyeron a DE Dejamos a vuestro criterio Señores Miembros del Jurado dictaminador, la respectiva BI BL IO TE CA calificación del presente informe. __________________________ AZAÑA DÍAZ, Victoria Janet __________________________ CASTILLO VÁSQUEZ, Lessly Tatiana Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación JURADO DICTAMINADOR ___________________________________ IC A Dr. RUIZ REYES, Segundo Guillermo FA R M AC I A Y BI O Q UI M PRESIDENTE ____________________________________ MIEMBRO BI BL IO TE CA DE Dr. VENEGAS CASANOVA, Edmundo Arturo ____________________________________ Mg. RENGIFO PENADILLOS, Roger Antonio MIEMBRO Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación RESUMEN Se realizó la determinación de las características fisicoquímicas y el porcentaje relativo de los componentes hidrocarbonados y oxigenados del aceite esencial de las hojas de Cymbopogon IC A citratus. UI M La extracción del aceite esencial se realizó mediante el método de hidrodestilación, usando O Q el equipo Clevenger, con un rendimiento de 0.7 %, las características organolépticas Y BI obtenidas son color: cristalino amarillo; olor: suigéneris; sabor: astringente, amargo, picante AC I A y pujante; textura: aceitosa y oleosa. M Las características fisicoquímicas obtenidas, fueron la densidad de 0.8983, índice de FA R refracción de 1.4730, pH de 5.0, índice de acidez de 21.318, respecto a la solubilidad se DE determinó que es soluble en alcohol de 96%, n-hexano y éter etílico, medianamente soluble CA en alcohol de 70% y 80%, e insoluble en agua y alcohol de 50%. IO TE La separación de los componentes hidrocarbonados y oxigenados del aceite esencial de BL Cymbopogon citratus, se consiguió obtener el porcentaje relativo de sus componentes BI hidrocarbonados de 13.29 % y 2.92 % oxigenados. Palabras clave: Aceite esencial, componentes hidrocarbonados, componentes oxigenados, características fisicoquímicas, organolépticas. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación ABSTRACT The determination of the physicochemical characteristics and the relative percentage of the hydrocarbon and oxygen components of the essential oil of the leaves of Cymbopogon IC A citratus was carried out. UI M The extraction of the essential oil was carried out using the hydrodistillation method, using O Q the Clevenger equipment, with a yield of 0.7%, the obtained organoleptic characteristics are: Y BI yellow crystalline color; Odor: suigéneris; Flavor: astringent, bitter, spicy and thriving; AC I A Texture: oily and oily. The physicochemical characteristics obtained were the density of M 0.8983, refractive index of 1.4730, pH of 5.0, acid index of 21,318, with respect to solubility FA R was determined to be soluble in alcohol of 96%, n-hexane and ethyl ether, medium Soluble CA DE in alcohol of 70% and 80%, and insoluble in water and alcohol of 50%. IO TE The separation of the hydrocarbon and oxygen components of the essential oil of BL Cymbopogon citratus was able to obtain the relative percentage of its hydrocarbon BI components of 13.29% and 2.92% oxygenated. Key words: Essential oil, hydrocarbon components, oxygenated components, physicochemical, organoleptic characteristics. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación INDICE INTRODUCCIÓN .............................................................................................................1 MATERIAL Y METODO .................................................................................................7 RESULTADOS ...............................................................................................................15 IC A DISCUSIÓN .................................................................................................................... 17 UI M CONCLUSIONES ........................................................................................................... 22 BI O Q RECOMENDACIONES .................................................................................................. 23 Y REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS……………………………………………………24 BI BL IO TE CA DE FA R M AC I A ANEXOS ......................................................................................................................... 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación I. INTRODUCCIÓN Actualmente se está enfatizando en las propiedades medicinales de las plantas debido a que poseen un mayor potencial farmacológico y además mayores cualidades terapéuticas 1. Las plantas dotadas de principios activos sirven para curar y aliviar males de la humanidad. Las conocemos desde la antigüedad.; a pesar de ser muy antigua y de trasmitirse de IC A generación en generación en la actualidad es objeto de numerosas investigaciones UI M demostrándose experimentalmente algunas acciones atribuidas a estas plantas 1,2. O Q Entre las plantas reconocidas por sus comprobadas propiedades medicinales se encuentra el BI Cymbopogon citratus. A Y Es originaria de la región suroriental de Asia y se encuentra ampliamente distribuida tanto AC I en América Central como en América del Sur. En nuestro país las principales zonas de FA R M producción son Lima, Cajamarca y Ucayali 3. DE La parte utilizables por la industria está constituida por las hojas y los tallos tiernos. Crece CA adecuadamente en una gama de suelos, pero, su mayor productividad se da en los suelos IO TE fértiles de textura media a ligera (franco a franco arenoso) y con buena capacidad retentiva de agua. En los suelos arenosos se tiene mayor producción de follaje pero menor aceite BI BL esencial. No tolera las condiciones de mal drenaje. Desarrolla bien en zonas con temperatura media entre 22°C y 28ºC 4. Es conocida en diferentes partes del mundo con diferentes nombres vulgares como: caña santa, cañita de limón, hierba de la calentura, lemon grass, limoncillo, hierba de limón, mantojo de limón, malojillo limonero, campin de cheiro, campin sir, campin limao en Brasil, paja de la meca, junco oloroso, citronen grass, pasto citron, te de limón, zacate citrion, pero el nombre de hierba luisa es casi exclusivo del Perú 3,5. 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación La hierba luisa, dentro de la botánica sistemática, se encuentra clasificada de la siguiente manera:6 Reino: Cormobionta División: Magnoliophyta Clase: Liliatae (Liliopsida) IC A Subclase: Commelinidae Q UI M Orden: Cyperales BI O Familia: Poaceae AC I A Y Tribu: Andropogoneae Dumort FA R M Género: Cymbopogon Especie: Citratus DE El Cymbopogon citratus es una hierba perenne, robusta, tallos muy ramificados de 1 a 2 m IO TE CA de alto con los nudos ceríferos. Hojas aromáticas, amontonadas cerca de la base, lampiña, de 6 a 10 dm, sus ramas alargadas y un tanto pendulazas; los racimos bifurcados, portando BI BL en la bifurcación una espiguilla estaminada sin arista, la espiguilla sésil, del par o los pares inferiores diferentes de las de arriba. Racimos de 1 a 1,5 cm de largo, la espiguilla sésil línea lanceolada de 4 a 5 cm de largo acuminada con el dorso cóncavo en la parte baja. No florece o lo hace muy rara vez 7. El Cymbopogon citratus el cual posee propiedades antibacterianas, antimicóticos, antiprotozoaria, antitumoral, antiinflamatoria. El potencial antibacteriano se debe porque posee dentro de su composición al Citral.7 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Como toda planta, la composición química es muy compleja y por el momento la existencia de algunos componentes no tienen mucho valor práctico. Diversas investigaciones fitoquímicas realizadas tanto en las hojas desecadas como en el aceite esencial han permitido identificar los siguientes compuestos: monoterpenos borneol, canfeno, canfor, car-3-eno, cineal, citral, citral a, citral b, citronelol, acetato de citronelol, fenchona, geranial, geranio, acetato de geraniol ,6-metil-hepta-5-en-2-2-ona, limoneno, linaldol, óxido de linaldol, a-pineno, b-pineno, terpineol terpinoleno triperpenos, cymbopogenol, IC A mentol, metil-heptenol, heptenona, UI alcanos-3-metil-hepta-2-ona, hexacosan10-1, Q humuleno, M cymbopogona, cymbopogonol, sesquiterpeno, oxi-bisaboleno, b-cardineno, farnesol, BI O triacontan-1-1 ,b-sitosterol 7. A Y El aceite esencial u óleo volátil es considerado como desecho del metabolismo de la planta, AC I ya que no se conoce el papel que desempeña en esta. Son compuestos terpenicos, formados FA R M por sustancias orgánicas volátiles y de consistencia oleosa. Forma parte del grupo de los DE isoprenoides.7 CA Los llamados aceites esenciales son constituyentes odoríficos o esencias de una planta, el IO TE término “aceite” probablemente se origina del hecho que el aroma de una planta existe en BL las glándulas o entre las células en forma líquida. Proceden de las flores, frutos, hojas, raíces, BI semillas y corteza de los vegetales. Los aceites se forman en las partes verdes (con clorofila) del vegetal y al crecer la planta son transportadas a otros tejidos, en concreto a los brotes de flor. Se desconoce la función exacta de un aceite esencial de un vegetal, puede ser para atraer a los insectos, para la polimerización o para repeler a los insectos nocivos o puede ser simplemente un producto metabólico intermedio 3,7. Los aceites esenciales son mezclas complejas de origen orgánico cuyos constituyentes pertenecen, de manera casi exclusiva a dos grupos: el grupo de los terpenoides y el grupo de 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación los compuestos aromáticos derivados del flenilpropano, mucho menos frecuente. Se encuentran en mayor incidencia en las Lauráceas, Coníferas, Mirtáceas, Liliáceas, Labeadas, Umbelíferas, Rutáceas y compuestas. Poseen propiedades antisépticas por el coeficiente fenol que contienen. Son productos volátiles de naturaleza compleja, con aroma agradable en la mayoría de ellas 7. El aceite esencial de la hierba luisa se caracteriza por su fuerte olor a limón es producto de IC A un alto contenido de citral el cual es químicamente conocido como 3,7 dimetil 2,6 octadienal. UI M Encontraremos además otros componentes como :el mirceno ,metil heptanona el limoneno O Q ,el dipenteno ,linolol ,citronelal ,isocitral ,dacanol farnesol aldehido octolitico o caprilico, BI aldehido manilico o pelargonico, aldehido capricho, acido capricho y acetato de geranilo en AC I A Y menores cantidades 7. M Es importante su utilización ya sea para fines industriales como la fabricación de FA R desodorantes, detergentes y otros productos domésticos que requieren una fragancia fresca DE además también se la utiliza como saborizante ,en pequeñas cantidades debido a su fuerte CA olor a limón 7,3. IO TE El aceite esencial presenta, además propiedades medicinales reconocidas .Tiene acción BL farmacológica sobre el sistema cardiocirculatorio, como antihipertensivo, sobre el sistema BI digestivo, como antiespasmódico, sobre el sistema respiratorio, como antiasmático, sobre la piel y mucosas, como antibacteriano (bacterias Gram positivas como por ejemplo Bacillus subtilis y Staphylococcus aureus) y antimicótico. Se le atribuyen otras propiedades medicinales, aun no probadas como la de ser febrífugo, antitusivo, estomaquico, carminativo, diaforético y expectorante. Estudios clínicos realizados para precisar las propiedades terapéuticas de esta especie sugieren que el mirceno, uno de los componentes 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación del aceite esencial posiblemente sirva como analgésico específico para partes particulares del cuerpo .Su uso se realiza tanto oral como tópicamente ,8,9. Dentro de la composición del aceite esencial al que encontramos en mayor porcentaje es al citral 7. El citral se encuentra en la naturaleza de dos o probablemente cuatro isomeros .Estos dos IC A componentes conocidos como citral a (geranial) y citral b (peral) son isomeros geométricos que difieren solamente en la posición relativa del doble enlace en el átomo de carbono Q UI M terminal .En una mezcla natural predomina ligeramente el isomero a 7. BI O El citral es un aceite fluido ligero, débilmente coloreado de amarillo, inactivo y de un olor a AC I A Y limones penetrantes. Su punto de ebullición es a 760mm de Hg 7. Es muy sensible a los ácidos y a los compuestos ácidos por ello puede por ejemplo con FA R M muchos derivados formar compuestos cíclicos 7. DE La oxidación se produce a velocidad moderada en el aire, lo cual debe tenerse en cuenta al CA almacenar el material .Desde el punto de vista medicinal ,el citral tiene acción histamínica y IO TE es analgésico en oftalmología 7. BL Para la obtención del aceite esencial es necesario realizar la destilación por arrastre de vapor. BI La destilación se basa en la diferencia de los puntos de ebullición mediante esta se obtiene el aceite esencial, siendo este un compuesto volátil de bajo punto de ebullición. La destilación por arrastre al vapor es una variación de la destilación simple, se hace pasar una corriente de vapor a través de la mezcla de reacción y los componentes que son solubles en vapor son separados (aceites) 8. La importancia es conocer mejor las propiedades fisicoquìmicas de Cymbopogon citratus, y determinación de porcentaje relativo y sus componentes hidrocarbonados, teniendo en 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación cuenta su amplio uso comercial en el mundo y su potencial desarrollo en nuestro país, y lograr un mejor aprovechamiento de este recurso natural, por lo cual se planteó el siguiente problema: ¿Cuáles son las características fisicoquímicas de los aceites esenciales de las hojas de Cymbopogon citratus y el porcentaje relativo de sus componentes hidrocarbonados y oxigenados? IC A De acuerdo a lo expuesto el trabajo estuvo orientado a cumplir los siguientes objetivos: UI M OBJETIVOS Determinar las características fisicoquímicas de los aceites esenciales de las hojas BI O Q Objetivo General A Y Cymbopogon citratus y el porcentaje relativo de sus componentes hidrocarbonados M AC I y oxigenados. Realizar la extracción del aceite esencial de las hojas de Cymbopogon citratus DE CA (Hierba luisa). Separar los componentes hidrocarbonados y oxigenados de los aceites esenciales de IO TE FA R Objetivos Específicos BI BL las hojas de Cymbopogon citratus (Hierba luisa). 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación II. MATERIAL Y METODO 1. Descripción del diseño 1.1. Materiales 1.1.1. Material Botánico Se obtuvo muestras del jardín botánico de plantas medicinales “Bertha Rosa IC A Elena de los Ríos” de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad UI M Nacional de Trujillo. 1.1.3. Equipos BI FA R M Estufa eléctrica “Memmert” AC I A Y 5 kg de hojas de Cymbopogon citratus O Q 1.1.2. Material biológico Balanza analítica “Sartorius” DE Equipo Clevenger – extracción de aceites volátiles. CA Columna cromatográfica de vidrio IO TE 1.1.4. Material de vidrio y porcelana BL Pipetas 1 y 5 mL. BI Vasos de precipitación de 50 y 100 mL. Fiolas de 50 y 100 mL Cápsulas de porcelana 1.1.5. Reactivos -Cloruro de sodio, Merck -Sulfato de sodio, Merck -Agua destilada 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación - Alcohol 96º - n- hexano - Metanol - Sílica Gel 1.1.6. Otros -Viales de 5 cc, color ámbar. IC A -Algodón hidrofílico. M -Termómetro, Q UI -Papel filtro BI O -Cocina eléctrica. A Y -Frascos color ámbar. AC I 1.2. PROCEDIMIENTO FA R M 1.2.1 Recolección e identificación taxonómica 7,9,10,11,12 DE Se recolectó 5 kg de hojas de Cymbopogon citratus obtenidas del Jardín CA Botánico de plantas medicinales “Bertha Rosa Elena de los Ríos” de la IO TE Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo. La planta fue llevada al Herbarium Truxillensis para su identificación BI BL correspondiente. 1.2.2 Preparación de la muestra a. Selección La planta recolectada fue transportada al laboratorio de Farmacognosia de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, donde se eliminó las sustancias extrañas presentes en la muestra. 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación b. Lavado Luego de la separación de las sustancias extrañas, se procedió a lavar las hojas con agua destilada, seguido de una desinfección utilizando hipoclorito de sodio, a una concentración de 200 ppm. 1.2.3. Obtención del aceite esencial de Cymbopogon citratus El aceite esencial se extrajo a partir de las hojas frescas por el método de IC A hidrodestilación, se cortó en pequeños trozos y se pesó 100 g luego se colocó en UI M un balón y se agregó 400 mL de agua destilada y finalmente se calentó hasta O Q punto de ebullición durante 3 h. Como producto del proceso de condensación se BI obtuvo dos fases, una de aceite esencial y la otra, de agua; posteriormente se A Y separó el aceite esencial y se deshidrató las impurezas de agua en el aceite AC I esencial con Na2SO4 anhidro, se filtró y se guardó en un frasco de vidrio color DE temperatura de 4 oC7. FA R M ámbar (para evitar la descomposición por la luz), bajo refrigeración a una CA 1.2.4 Determinación del rendimiento de aceite esencial de Cymbopogon citratus7 IO TE A partir de 100 g de hojas de Cymbopogon citratus se obtuvo un determinado BL volumen que fue medido por el método gravimetría-volumétrico, mediante el cual BI se determinó el porcentaje de rendimiento del aceite esencial (% RAE), aplicando la siguiente fórmula: % RAE = Vol. AE (mL)/ Pmuestra (g) x 100 Dónde: % RAE: Porcentaje del rendimiento del aceite esencial Vol. AE: Volumen del aceite esencial obtenido en mililitros. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Pmuestra: Peso de la muestra a destilar en gramos. 1.2.5 Parámetros fisicoquímicos del aceite esencial 9, 10 1.2.5.1 Determinación de las características organolépticas Los carácteres organolépticos incluyen olor, color, sabor y textura. 1.2.5.1.1 Determinación de olor: Se tomó una tira de papel secante de IC A aproximadamente 1 cm de ancho por 10 cm de largo y se UI M introdujo en un extremo en la muestra de ensayo. Luego se óleo BI Determinación del color: En un tubo de ensayo bien limpio y Y 1.2.5.1.2 O Q y se determinó si corresponde con la característica del producto. AC I A seco, se llenó hasta las tres cuartas partes con la muestra de M ensayo y se observó el color, la transparencia, la presencia de FA R partículas y la separación en capas. DE 1.2.5.1.3 Determinación del sabor: Se tomó una pequeña alícuota y se CA probó el sabor. IO TE 1.2.5.1.4 Determinación de textura: Se tomó una alícuota y se sintió con BL el tacto la textura y consistencia. BI 1.2.5.2 Determinación de la densidad relativa. Se pesó el picnómetro vacío y secó, se llenó con la porción de ensayo, manteniendo la temperatura de 25 °C (±1°C) durante 15 min y luego se ajustó el líquido al nivel requerido, se pesó cuidadosamente el picnómetro con la porción de ensayo y se repitió la operación con el agua destilada a 25 °C. 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Expresión del resultado La densidad relativa a 25 ° C se calculó por la siguiente fórmula: D25 = M1 -M M2-M Dónde: UI M M2: peso del picnómetro con el agua (g) IC A M1: peso del picnómetro con la muestra (g) O Q M: peso el picnómetro vacío (g). Y BI Los resultados se aproximan hasta la tercera cifra. AC I A 1.2.5.3 Determinación del índice de refracción M Se colocó sobre el prisma de medición una gota de agua destilada, utilizando para FA R ello una varilla de vidrio que no tenga bordes agudos, se ajustó el equipo DE seleccionando la zona del espectro visible que aparece en la línea límite del campo CA visual, moviendo el compensador cromático y colocando la intersección del IO TE retículo sobre la línea límite de los campos claro y oscuro. BL Después de haber realizado el ajuste del refractómetro, se colocó una gota de la BI muestra de ensayo sobre el prisma de medición, se cerró el termo prisma y se enfocó la luz por medio del espejo, de modo tal que la misma incida sobre la apertura de entrada del prisma de medición y se procedió de la misma forma que con el agua. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación 1.2.5.4 Determinación del pH Se determinó el pH de la muestra mediante tira reactivas de pH. Se introdujo el papel pH en una muestra de aceite colocada previamente en un tubo de ensayo. 1.2.5.5 Solubilidad Se colocó en 7 tubos 0,5 mL de aceite esencial y luego se añadió a cada tubo por IC A separado 5 mL de agua, 5 mL de etanol 50%, 5 mL de etanol 70%, 5 mL de etanol M 80%, 5 mL de etanol 96%, 5 mL n-hexano y 5 mL de éter etílico respectivamente. Q UI Luego se agitó cada tubo y se observó en cada uno de ellos si se produce algún Se preparó una solución que consiste en una mezcla de partes iguales de AC I - A Y 1.2.5.6 Determinación del índice de acidez 7 BI O enturbiamiento. - FA R M alcohol-éter etílico neutralizado. En un matraz de capacidad adecuada se pesó entre 1 a 2 g de aceite DE esencial, luego se añadió 60 mL de alcohol-éter y III gotas de fenolftaleína, CA se agitó y valoró con la solución KOH 0.1 N hasta coloración ligeramente BL Se anotó los mililitros gastados y se efectuaron los cálculos. BI - IO TE rosada. IA = 5.61 x V P Dónde: IA: Índice de acidez P: Peso, en gramos de la muestra ensayada V: Volumen en mililitros, de hidróxido de potasio utilizado 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación 1.2.5.7. Separación y determinación del porcentaje relativo de componentes Hidrocarbonados y Oxigenados del aceite esencial 7,13 Medición de los índices de refracción de los solventes utilizados para el desarrollo de la cromatografía en columna Se medió alícuotas de los solventes n- hexano y metanol; y su índice de refracción según procedimiento. Se colocó sobre el prisma de medición una gota de solvente, IC A utilizando para ello una varilla de vidrio que no tenga cantos agudos, se ajustó el UI M equipo seleccionando la zona del espectro visible, moviendo el compensador O Q cromático y colocando la intersección del retículo sobre la línea límite de los BI campos claro y oscuro. Después de haber realizado el ajuste del refractómetro, se A Y colocó una gota de la muestra de ensayo sobre el prisma de medición, se cerró el AC I termo prisma y se enfocó la luz por medio del espejo, de modo tal que la misma FA R M incida sobre la apertura de entrada del prisma de medición y se procedió de la Preparación de la muestra CA DE misma forma que con el agua. IO TE Se pesará exactamente 1 g de aceite esencial en un vaso de precipitado de Montado de cromatografía en columna cromatográfica BI BL capacidad adecuada y se diluye este en 5 mL de n-hexano. Se adaptó en un soporte metálico una columna cromatografía de vidrio (de dimensiones: 3 cm de ancho por 30 cm de largo), posteriormente con ayuda de un embudo se empaca con sílica gel granulada hasta las ¾ partes, cuidando no respirar las partículas de SiO2, que se desprenden en el proceso. Una vez culminado el empacado se vierte con la ayuda del mismo embudo la muestra de aceite esencial la muestra de aceite esencial, repitiendo el proceso con 2 fracciones 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación sucesivas de 5 mL de n-hexano que garanticen el lavado total del vaso que contiene la muestra. Desarrollo Cromatográfico Sobre los primeros 10 mL de n- hexanos utilizados para adsorber la muestra sobre la sílica gel granulada, se vierten gradualmente 50 mL más del solvente, esperando IC A su elución total de la columna y colectando la fracción en un matraz de capacidad M adecuada. Enseguida se adicionó gradualmente 50 mL de metanol y se esperó la Q UI elución de la misma. Y BI O Determinación de los índices de refracción finales AC I A A una alícuota de las fracciones de n-hexano y metanol eluidas se midió el índice M de refracción. FA R Determinación de porcentaje de compuestos hidrocarbonados y oxigenados CA DE presentes en el aceite esencial IO TE Las fracciones de n-hexano y metanol eluidas se vertieron en cápsulas de porcelana de capacidad adecuada y posteriormente se evaporarán los solventes en BI BL baño de agua a 70 ºC cuidando la permanencia de las fracciones de aceite esencial. Plan de recolección, procesamiento y análisis de datos La información se almacenó en una hoja de datos diseñado para este fin, posteriormente fueron ingresados en una hoja de cálculo del programa Excel ver. 2016, procesados para ser expuestos en tablas de doble entrada, de acuerdo a las características fisicoquímicas, separación de componentes y porcentaje relativo de componentes hidrocarbonados. 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación III. RESULTADOS Tabla 1. Determinación del rendimiento del aceite esencial (%RAE) de las hojas de Cymbopogon citratus (Hierba luisa) 100 g Volumen de aceite esencial 0.7 mL % RAE 0.7 IC A Peso de muestra BI O Q UI M Tabla 2. Características organolépticas del aceite esencial de las hojas de Cymbopogon citratus (Hierba luisa) Y CARACTERÍSTICAS ORGANOLÉPTICAS Cristalino amarillo Olor Sabor Suigéneris Astringente, amargo, pungente Textura Aceitosa, oleosa DE FA R M AC I A Color IO TE CA Tabla 3. Parámetros físicos del aceite esencial de Cymbopogon citratus (Hierba luisa) RESULTADO Densidad relativa 0.898 Índice de Refracción 1.4730 pH 5 BI BL PARAMETRO FISICO 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Tabla 4. Solubilidad del aceite esencial de las hojas de Cymbopogon citratus (Hierba luisa) ASPECTO MISCIBILIDAD Agua Dos fases No Alcohol 50% Turbio No Alcohol 70% Turbio Medianamente Alcohol 80% Opalescencia y turbidez Medianamente Alcohol 96% Soluble cristalino Sí n-Hexano Soluble medio cristalino Éter etílico Soluble cristalino UI M IC A SOLUCION Sí Y BI O Q Sí AC I A Tabla 5. Parámetros químicos del aceite esencial de las hojas de Cymbopogon citratus (Hierba luisa) RESULTADO FA R M PARAMETRO QUIMICO 21.318 DE Índice de Acidez IO TE CA Tabla 6. Porcentaje relativo de los componentes Hidrocarbonados y Oxigenados del aceite esencial de las hojas de Cymbopogon citratus (Hierba luisa) BL CARACTERÍSTICAS BI Componentes Hidrocarbonados Componentes Oxigenados CANTIDAD (g) PORCENTAJE (%) 0.1329 13.29 0.0292 2.92 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación IV. DISCUSIÓN La extracción del aceite esencial de Cymbopogon citratus (Hierba luisa), se utilizó el método de hidrodestilacion, técnica muy utilizada para la obtención de esencias fluidas, especialmente las utilizadas en perfumería. Al utilizar agua como solvente se obtiene una ventaja importante en la posible aplicación del aceite en contacto directo con alimentos, puesto que las propiedades del agua no perjudican al aceite. Se utiliza a nivel industrial IC A debido a su alto rendimiento, a la pureza del aceite obtenido y porque no requiere UI M tecnología sofisticada6,7. O Q De esta manera de 100 g de muestra se obtuvo como resultado un 0.7 % de rendimiento BI (Tabla 1), según la norma mexicana NMX-F-062-1974, el rango de rendimiento para A Y aceites esenciales se encuentra del 0.2 – 2 %, en tanto el rendimiento obtenido se AC I encuentra dentro de los límites especificados. Existen diferentes factores que afectan el FA R M rendimiento de la extracción de aceite esencial, un factor determinante es el método DE empleado para la obtención del aceite esencial, en el estudio realizado por Maria C. CA Colecio Juarez y col (2011), se encontró que el mejor método para realizar la extracción IO TE de aceites esenciales es la destilación por arrastre de vapor o hidrodestilación, según AttiSantos et al. (2005), los métodos más empleados son hidrodestilación, presión, BI BL compresión, destilación por arrastre de vapor, extracción con fluidos supercríticos, lo que corrobora que el método empleado es el más apropiado14,15,16. Dentro de las características organolépticas observadas se encontró; color: cristalino amarillo, olor: suigéneris, sabor: astringente, amargo, picante y pujante, textura: aceitosa y oleosa. (Tabla 2), dichos resultados son contrastados con la descripción de la Norma Mexicana NMX-F-366-S-1980, cumpliéndose en su totalidad11. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación En la evaluación de la densidad relativa, la Farmacopea de los Estados Unidos (USP) refiere un rango de 0.869 a 0.894 para densidad relativa, la norma Mexicana NMX-F366-S-1980 proporciona el mismo valor, en el caso del aceite esencial en estudio tiene una densidad de 0.898 (Tabla 3), por lo que se encuentra ligeramente por encima de los parámetros normales de calidad establecidos para los aceites esenciales, cabe recalcar que los aceites esenciales al estar compuestos fundamentalmente por terpenos y IC A derivados, y estos compuestos orgánicos a su vez por átomos ligeros (C, H, O) formando M cadenas y anillos, tienen una densidad menor que el agua (densidad menor que 1 g/m3) Q UI pero hay algunos aceites esenciales con mayor densidad como los de almendras amargas, BI O mostaza, canela, perejil o clavo 11, 14 . A Y El índice de refracción se utiliza como prueba fisicoquímica para el control de pureza y AC I calidad de aceites puros. El procedimiento más empleado para esta determinación se FA R M señala en la United Stated Pharmacopoeia 40, método 831. Los refractómetros utilizan DE como principio de medición, la determinación del ángulo límite el cual presenta en el CA campo visual un contraste claro y otro oscuro. La línea de separación entre ambos IO TE campos establece el ángulo límite de la luz incidente. El índice de refracción reportado en el estudio fue 1.4730 (Tabla 3), la norma antes mencionada indica que el aceite debe BI BL tener un índice de refracción entre 1,4830 – 1,4873, por lo que el valor obtenido en el análisis es inferior, esto puede deberse a que la temperatura a la cual se realizó la medida fue superior a la especificada en la Farmacopea de referencia, ya que en general las mediciones se deben realizar a temperatura ambiente, es decir cerca de 20°C, otro factor que influye en la medición del refactómetro, es la presión y la longitud de onda 10,12 . Con la densidad e índice de refracción se pueden hacer deducciones sobre componentes. Por lo tanto, densidades menores a 0.9 e índices de refracción menores de 1.47 sugieren un alto porcentaje de hidrocarburos terpénicos o compuestos alifáticos, si la densidad es 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación mayor de 0.9 y el índice de refracción menor de 1.47 es posible la presencia de compuestos oxigenados alifáticos en la muestra. Los hidrocarburos aromáticos tienen densidades menores de 0.9 pero sus índices de refracción son mayores de 1.47, y los compuestos oxigenados aromáticos o alicíclicos tienen densidades e índices de refracción superiores a los límites señalados 13. El pH identificado del aceite esencial de Cymbopogon citratus (Hierba luisa) fue de 5 IC A (Tabla 3), sin embargo se debe resaltar que la medida de este se realizó mediante tira UI M reactiva de pH, y no mediante pH-metro, sin embargo da una referencia del valor, no se O Q encontró como una característica necesaria de analizar según la norma técnica NMX-F- BI 062-1974, de igual manera otras normas como la Farmacopea Europea, indican que es A Y una análisis que no aplica para este tipo de producto. El pH ácido está dado por la AC I concentración de hidrogeniones que se liberan de los compuestos que poseen radical FA R M hidroxilo, formilo y carboxilo presente en el aceite esencial11,12. DE En cuanto a la solubilidad (Tabla 4), los aceites esenciales son completamente solubles CA en alcohol puro, si al alcohol le vamos añadiendo agua de forma progresiva, la mezcla IO TE disolverá cada vez menos aceite esencial, esta mezcla se trata de un equilibrio liquido- . BI 14 BL liquido-liquido, en un sistema formado por 3 componentes aceite esencial, agua y alcohol La prueba de solubilidad se realizó empleando 0.5 mL de muestra, siendo soluble cristalino en alcohol de 96%, soluble medio cristalino en n-hexano y soluble cristalino en éter etílico, medianamente soluble y turbio en alcohol de 70%, opalescencia y turbio en alcohol de 80%, siendo insoluble y turbio en agua y alcohol de 50%. La solubilidad de un aceite en etanol depende de su contenido de compuestos oxigenados12, 13. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación El índice de acidez del aceite esencial es de 21.318, el cual es elevado y se atribuye a muchos factores entre los que resaltan el tiempo de almacenamiento de la muestra y edad de las hojas procesadas14. En la determinación del porcentaje de componentes hidrocarbonados (eluida con Metanol) se obtuvo 13.29 % y componentes oxigenados (eluida con n-hexano) (Tabla 6), se obtuvo 2.92 %, lo que en total componen el 16.21 % de la muestra empleada en la IC A cromatografía, el porcentaje restante se pudo haber perdido en el proceso de elución de UI M la columna y en el proceso de vaporización de las fracciones de solvente (realizada a O Q 68ºC) o debido a la temperatura de ambiente, ya que los aceites esenciales en presencia Y BI de oxígeno son susceptibles a oxidación14. AC I A Existen otros factores que pueden influir en la biosíntesis de aceite esencial en la planta, M estás características varían de región y claramente por país, de tal manera que la FA R biosíntesis de aceites esenciales puede variar aunque la especie sea la misma, los factores DE son, el pH del suelo de cultivo, esto afecta directamente la absorción de nutrientes CA composición del suelo, por ejemplo la absorción de metales como el hierro, Zinc, IO TE magnesio, se dificulta en suelos de carácter alcalino (pH mayor a 7) debido a que la sales BL de estos son menos solubles en este medio y se facilita en suelos con pH ácido, clima, BI altura, condiciones ambientales como el déficit de nutrientes y agua, existen también microorganismos asociados (simbiosis) con las plantas que ayudan a absorben compuestos fosfóricos, los terrenos pobres en nutrientes no favorecen el desarrollo de la panta, además de restringir el crecimiento de la planta pueden ocasionar la acumulación de carbohidratos no estructurales y aumento de la síntesis de sustancias de defensa, basadas en carbono, el balance carbono y nutrientes ha sido encontrada en especies que crecen en ambientes con baja disponibilidad de nutrientes, en las que se produce aumento de taninos, lignanos, fenoles o glicósidos de fenoles10, 17. 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Por otro lado, los aceites esenciales refractan la luz polarizada, también presentan un poder rotatorio característico, debido a que en su composición existen numerosos productos ópticamente activos, esta propiedad es de importancia en la detección de BI BL IO TE CA DE FA R M AC I A Y BI O Q UI M IC A adulteraciones en las esencias11. 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación V. CONCLUSIONES Se realizó la extracción del aceite esencial de Cymbopogon citratus (Hierba luisa) siendo el rendimiento de extracción de 0.7 % Se obtuvieron las siguientes características fisicoquímicas: Densidad relativa de 0.8983, índice de refracción de 1.4730, pH de 5, índice de acidez de 21.318, respecto IC A a la solubilidad se determinó que es soluble en alcohol de 96%, N-hexano y Éter M etílico. Medianamente soluble en alcohol de 70% y 80%. Siendo insoluble en agua y Q UI alcohol de 50%. BI O Se realizó la separación de los componentes hidrocarbonados y oxigenados del Y aceite esencial de Cymbopogon citratus (Hierba luisa), el cual se consiguió obtener AC I A el porcentaje relativo de sus componentes hidrocarbonados de 13.29 % y 2.92 % BI BL IO TE CA DE FA R M oxigenados. 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación VI. RECOMENDACIONES Se recomienda estudios posteriores para la determinación, caracterización y cuantificación de los componentes del aceite esencial de Cymbopogon citratus. Se recomienda estudios para la determinación, caracterización y determinación de la IC A concentración específica y porcentaje de compuestos Hidrocarbonados y Oxigenados BI BL IO TE CA DE FA R M AC I A Y BI O Q UI M del aceite esencial de las hojas de Cymbopogon citratus. 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1. Jorge L. Botanica de los cultivos tropicales. (3era, ed) revisión aumentada. San Jose Costa Rica. Ed Agroamerica – Instituto Interamericano de cooperación para la Agricultura. Pp: 370, 461, 475 – 477; 2000. 2. Cabieses, F. Apuntes de Medicina Tradicional: La racionalización de lo irracional. Lima: A&B; 1993. IC A 3. Rivadeneira V y De Benavente H. Fundación Chankuap. Ficha técnica. Aceite esencial UI M hierba luisa. Ecuador: Macas; 2011. O Q 4. Guerra,O & Rodríguez,G. Actividad Antimicrobiana del aceite esencial y crema del Y BI Cymbopogon citratus (DC) .Revista Cubana de Plantas Medicinales 9; 2004. AC I A 5. Rodriguez R., Ruiz C., Arias G., Castro H., Martinez., J., y Stashenko, E. Estudio M comparativo de la composición de cuatro especies del género Cymbopogon (Poaceae) FA R cultivadas en Colombia. Boletín latinoamericano y del Caribe de Plantas Medicinales y DE Aromáticas, 11; 2011. CA 6. Del Pozo, X. 2006. Obtención de aceite esencial a partir de las hojas de hierba luisa IO TE Cymbopogon citratus (DC) Stapf, para su aplicación como antibacteriano y BL antimicótico. Tesis de grado. (en línea) Consultado 29 de abril de 2017. Disponible en: BI http://repositorio.espe.edu.ec/bitstream/21000/511/1/T-ESPE-025025.pdf 7. Mendoza, D, Taborda M. Composición Química y Actividad acaricida del aceite esencial de Cymbopongon citratus stapf contra el ácaro intradomiciliario Dermatophagoides farinae (acari: Pyroglyphidae). Biosalud,9 (2); 2010. 8. Natural bioactive compounds of Citrus limon for food and health. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 51(2), 327–345. 12. 2010 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación 9. Bertha Boncún de Linares, Gilmer Zari Gil, Segundo Guillermo Ruiz, Marilú Soto Vásquez, Edmundo Vengas Casanova, Armando Cuéllar, Lorenzo Medina Zumarán. Guía de Prácticas Asignatura de Farmacognosia. Universidad Nacional de Trujillo. 2015 10. Universidad Nacional Federico Villareal. Actividad Antimicrobiana del aceite esencial de “Hierba Luisa” frente a Vancomicina contra Staphylococcus Aureus. 2008 Consultado 29 de abril de 2017. Disponible en: http://es.scribd.com. IC A 11. NMX-F-062-1974. Alimentos. Aceite esencial destilado de Limón Mexicano. Normas M Mexicanas. Dirección General de Normas,1974. Q UI 12. USP. United Stated Pharmacopeial 40 . USA: U.S Pharmacopeial Convention; 2017. BI O 13. Aguirre Y, Gutierrez C. Características Fisicoquímicas y determinación del porcentaje Y relativo de sus componentes hidrocarbonados y oxigenados de la raíz de Cúrcuma FA R M Nacional de Trujillo. Perú; 2016. AC I A longa L (cúrcuma) procedente de la selva peruana – Madre de Dios. Universidad 14. Mejia F. Extracción de aceite esencial de romero (Rosmarius officinalis). Universidad DE Nacional de San Agustín Tecnología de Aceites y Grasas. Perú. p 18-20; 2010 IO TE 1985. CA 15. Puhlow M. El gran libro de las plantas medicinales, 6ta ed España, Editorial Everest, BL 16. El-Hilaly, J., Hmammouchi, M., Lyoussi, B., Ethnobotanical studies and economic BI evaluation of medicinal plants in Taounate province (northern Morocco). Journal of Ethnopharmacology 86; 2003. 17. Gunther E. The essential oil. New York, USA: Editorial Van Nostran Co. Inc. Vols. 1, 2, 3 y 4); 1996. 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI O Q UI M IC A Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación BI BL IO TE CA DE FA R M AC I A Y ANEXOS Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación ANEXO N° 1 CÁLCULOS 1. Determinación del rendimiento del aceite esencial (%RAE) de Cymbopogon %𝑅𝐴𝐸 = 𝑉𝑜𝑙. 𝐴𝐸(𝑚𝐿) 𝑥100 𝑃𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎(𝑔) UI M Dónde: IC A citratus (Hierba luisa). O Q % RAE: Porcentaje del rendimiento del aceite esencial BI Vol. AE: Volumen del aceite esencial obtenido en mililitros. AC I A Y Pmuestra: Peso de la muestra a destilar en gramos. FA R M De los datos obtenidos: DE Vol. A.E: 0.7 mL %𝑅𝐴𝐸 = 0.7 𝑚𝑙 𝑥100 100 𝑔 %𝑅𝐴𝐸 = 0.7 v/p BI BL IO TE CA Pm: 100 g de Cymbopogon citratus 2. Determinación de las características Fisicoquímicas del aceite esencial de Cymbopogon citratus (Hierba luisa). a. Determinación de la densidad relativa D25 = M1 − M M2 − M Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Dónde: M1: Peso del picnómetro con la muestra A.E (g) M2: Peso del picnómetro con el agua (g) M: Peso el picnómetro vacío (g). De los datos obtenidos: IC A M1: 2.2007 g M M2: 2.3531 g Q UI M: 0.8541 g BI O 2.2007 − 0.8541 2.3531 − 0.8541 1.3466 1.499 FA R M AC I 𝐷25 = A Y 𝐷25 = DE 𝐷25 = 0.8983 IA = 5.61 x V 𝑃 BL IO TE CA b. Determinación del índice de acidez BI Dónde: IA: Índice de acidez P: Peso en gramos de la muestra A.E V: Volumen en mililitros de KOH utilizados De los datos obtenidos: P: 1 g V: 3.8 mL Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación IA = 5.61 x 3.8 1 IA = 21.318 3. Determinación del porcentaje de los componentes Hidrocarbonados y Oxigenados IC A de Cymbopogon citratus (Hierba luisa). UI M a. Separación O Q Componentes Hidrocarbonados Y BI Muestra Metanol + Wcap = 18.3539 g AC I A Wcap = 18.2210 g FA R M Wmuestra = 0.1329 g ------------ 13.29% Componentes oxigenados DE Muestra n-Hexano + Wcap = 12.8077 g CA Wcap = 12.7785 g BI BL IO TE Wmuestra = 0.0292 g ------------ 2.92% Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación ANEXO N° 2 IMAGENES Se pesarón 100 g de muestra y se sometieron a destilación en el quipo Clevenger. BI BL IO TE CA DE FA R M AC I A Y BI O Q UI M IC A Rendimiento del Aceite esencial de Cymbopogon citratus (Hierba Luisa). Se obtuvo el % rendimiento del aceite esencial Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Caracteristicas Fisicoquímicas del Aceite esencial de Cymbopogon citratus (Hierba Luisa). a. pH Y Solubilidad BI BL IO TE CA DE FA R M AC I A b. BI O Q UI M IC A Se obtuvo un pH de 5 0.5 ml de aceite esencial + 5 ml de agua (Insoluble) 0.5 ml de aceite esencial + 5 ml de etanol 50% (Insoluble turbio) 0.5 ml de aceite esencial + 5 ml de etanol 70% (Medianamente soluble) 0.5 ml de aceite esencial + 5 ml de etanol 80% (Opalescencia y turbidez) Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación 0.5 ml de aceite esencial + 5 ml de etanol 96% (Soluble cristalino) Y BI O Q UI M IC A 0.5 ml de aceite esencial + 5 ml de N-hexano (Soluble medio cristalino) BI BL IO TE CA DE FA R M AC I A 0.5 ml de aceite esencial + 5 ml de Éter etílico (Soluble cristalino) Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación EXTRACCIÓN DE COMPONENTES HIDROCARBONADOS Y OXIGENADOS Por cada 10 ml decantados se procedía hacer la lectura en el refractómetro Para n-Hexano: I.R Inicial: 1.36 I.R Final: 1.325 Metanol o n-Hexano Sílica gel BI BL IO TE CA DE FA R M AC I A Y BI O Q UI M IC A Para Metanol: I.R Inicial: 1.363 I.R Final: 1.359 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. 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Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación n-hexano (Componentes oxigenados) FA R M Muestra que se formaba luego de la vaporización del n-Hexano. AC I A Y BI O Q UI M IC A Se sometió a vaporización del solvente BI BL IO TE CA DE Se obtuvo un peso final de 0.0292 g donde estaban concentrados los componentes oxigenados. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/