J. Ris. Kim.
Vol. 1 No. 1, September 2007
UJI PREKLINIS VIRGIN COCONUT OIL TERHADAP PENINGKATAN KADAR
KOLESTEROL BAIK HDL, PENURUNAN KADAR TRIGLISERIDA,
PROFIL KIMIA ASAM LEMAK (C6-C18) DAN OMEGA-3 PADA
SERUM DARAH TIKUS PUTIH (Mus musculus)
1
Sumaryati Syukur, 1 Rina Dahlyanti, 1 Titi Sumanti, 1 Yulia Murni, 1 Zoni Hidayat,
2
Helmi Arifin, 3 Endang Purwati, 4 Risfaheri
1
Laboratorium Biokimia/Bioteknologi Jurusan Kimia FMIPA -UNAND Padang
2
Laboratorium Farmakologi Jurusan Farmasi FMIPA -UNAND Padang
3
Laboratorium Nutrisi Ternak FATERNA-UNAND Padang
4
Laboratorium LITBANG Pasca Panen Dep.Pertanian Cimanggu, Bogor
ABSTRACT
The Virgin Coconut Oil (VCO) products have different qualities and controversy effects of lipids
metabolism. This research has been used one of VCO product that was produced by fermentation
method using Lactobacillus sp. It has high amount of lauric acid (C12) up to 51 %, caprilic acid
(C8) 8.9 %, capric acid (C10) 7 % include Omega-3, 6 and 9, vitamins A, D, E, K and three kinds
of phytohormone. The ratio of Omega-3 and 6 was very proportional, therefore it is important to
investigate the Pre Clinic Test of animal experiment. Pre Clinic Test of dietary VCO as food
supplement has been determined by using 40 mice’s, which divided into 4 groups. Feeding on egg
yolk to Group I (negative control), Group II (positive control) increased cholesterol level. The
others were Group III (egg yolk and VCO 2 %) and group IV (egg yolk and VCO 4 %). It was
determined the total of cholesterol, HDL at 10th, 20th and 30th day treated by using the enzymatic
methods. The dietary of VCO 2-4 % resulted in significant increases in HDL levels from 32 % to
69 %. The dietary of VCO 4 % for four weeks did not toxic to mice metabolism. Triglycerides
level decreased 50 % from 177 to 85 and similar resulted to cholesterol ratio. Feeding on VCO for
4 weeks, the SCFA and MCFA not detected in serum of mice. The LCFA (C16) palmitate in
significant decreased from 0.96 to 0.1%. The significant level of Omega-3 increased more than
three times in serum of mice dietary VCO 2-4 %.
Keywords: Coconut Oil, Lactobacillus
PENDAHULUAN
Virgin Coconut Oil (VCO) atau minyak kelapa
murni dengan kandungan phytohormon dan
omega-3 tinggi (4 %) dikenal dengan merek
dagang Bio Virco Phytomega telah banyak
digunakan oleh masyarakat Indonesia, manca
negara dan Sumatera Barat khususnya.
Kandungan nutrisi utama seperti phytohormon,
omega dan vitamin A, D, E, K belum pernah
dipublikasikan oleh produsen VCO lainnya[1,2].
Nilai nutrisi dari minyak kelapa murni sangat
bervariasi tergantung cara dan teknologi
pembuatannya. VCO dengan merek dagang
Bio Virco Phytomega, mempunyai kandungan
asam laurat (C12) tinggi rata-rata (55%), dan
mengandung asam kaprilat (C8) 8,9 %, asam
kaprat (C10) 7 %[3,4].
ISSN : 1978-628X
Mikroba yang digunakan dapat meningkatkan
kandungan vitamin A, D, E, K, omega-3, serta
asam lemak askorbil rantai pendek laurat
(C:12) yang langsung dapat dimetabolisme
dalam tubuh menjadi asam kaprat (C:10) dan
monokaprat. Proses metabolisme ini cepat
terjadi langsung ke hati dan menghasilkan
energi tinggi hampir 100 %. Asam kaprat dan
kaprilat berfungsi sebagai anti-bodi dan anti
mikroba dalam tubuh sama seperti yang
terdapat dalam air susu Ibu[3,5].
Hampir semua masyarakat pengguna Bio Virco
Phytomega melaporkan banyak manfaatnya
untuk kesehatan total (personal data),
terbanyak
untuk
menghilangkan
penggumpalan darah, pegal linu, dan diabetes
59
Vol. 1 No. 1, September 2007
serta jantung koroner. Adanya kandungan
asam laurat yang tinggi yang dikenal dengan
Medium Chain Fatty Acids (MCFA) yaitu
asam lemak jenuh dengan rantai karbon atom
(C12) yang langsung diserap diusus tanpa
adanya
lipase
pankreas
dan
cepat
dimetabolisme di hati menjadi energi hampir
100 %. MCFA ini tidak ditumpuk di jaringan
melainkan cepat dipecah menjadi energi di
mitokondria hati[6,7].
Tingginya asam laurat dan derivatnya
mempunyai aktifitas antimikroba beberapa
mikroorganisme yang mempunyai membran
lipid tinggi. MCFA bila dimakan langsung
dirubah menjadi monogliserida selanjutnya
dimetabolisme menjadi kalori atau panas. Dari
hasil metabolisme dalam tubuh dihasilkan
senyawa asam mono laurat, monokaprat dan
caprilat (C10, C8 dan C6) yang dapat
bertindak sebagai Short Chain Fatty Acids
(SCFA) yang dapat merusak membran lipid
dan menghancurkan inti sel dan asam nukleat
DNA/RNA dari virus dan bakteri patogen
seperti, Virus HIV, Cytomegalo virus, Herpes,
bakteri vibrio dan lain-lain [1,2,6,8,9].
Hasil penelitian para nutrisi dunia sekarang ini
melaporkan bahwa lemak/minyak tak jenuh
yang mengandung ikatan rangkap sangat
berbahaya untuk kesehatan jantung dan
hipertensi, bahkan disebut sebagai pembunuh
diam-diam. Pada pengolahan makanan dengan
panas, atau pada proses penyimpanan
sekalipun ikatan rangkap pada minyak tak
jenuh tersebut akan mengalami isomerisasi
dari konfigurasi “Cis” menjadi konfigurasi
“Trans”[10,11,12]. Adanya ikatan rangkap poli
maupun mono unsaturated pada minyak akan
terbentuk senyawa epoksi dan radikal bebas
yang bersifat ultimat karsinogen langsung
berikatan dengan basa-basa DNA yang
bermuatan negatif dan menyebabkan mutasi
DNA atau sel kanker.
Bio Virco Phytomega dapat meningkatkan
kesehatan mata, kulit, aliran darah dan tulang
dengan kandungan vitamin A, D, E, K dan
Omega-3, 6 dan 9 untuk kecerdasan dan
phytohormon untuk peningkatkan stamina dan
energi.
60
J. Ris. Kim.
Hingga saat ini belum ada laporan penelitian
tentang hal yang sama dengan yang diusulkan
Bio Virco Phytomega, dimana prosesnya
secara alamiah menggunakan mikroba
(Laktobasilus sp. dan Sacharomyces sp.) yang
diisolasi dari proses fermentasi VCO itu
sendiri, sehingga dapat menghasilkan Omega 3, 6 dan 9 serta phytohormon (auxin, cytikinin
dan giberilin) yang cukup tinggi. BioVircoPhytomega telah diteliti pengaruhnya terhadap
penurunan kadar trigliserida dan peningkatan
kadar kolesterol baik HDL pada mencit
percobaan[12,13].
METODOLOGI
Penentuan Trigliserida, Kolesterol
dan LDL
HDL
Reagen pereaksi untuk penentuan kadar
kolesterol total, trigliserida dan HDL masingmasing tersedia dalam bentuk kit dari
DIASYS®, dimana komposisi masingmasingnya berisi enzim-enzim yang akan
menghidrolisa dan mengoksidasi kolesterol
total, trigliserida dan HDL menjadi senyawa
berwarna kinonimin yaitu berwarna merah
violet. Senyawa berwarna ini akan diukur
dengan
menggunakan
spektrofotometer
Tm 20
Genesys
pada panjang gelombang = 500
nm[8,9].
Persiapan dan Perlakuan Hewan Percobaan
Hewan percobaan yang digunakan adalah
mencit putih jantan galur Swiss yang berumur
2 bulan dengan berat 20-30 g. Mencit yang
digunakan sebanyak 40 ekor yang dibagi
menjadi 4 kelompok, yang terdiri dari: 4 ekor
mencit digunakan untuk penentuan kadar
kolesterol total, trigliserida, HDL dan LDL
normal mencit dan sisanya 36 ekor dibagi
menjadi 3 kelompok. Kelompok kontrol positif
diberi makan kuning telur untuk menginduksi
kadar kolesterol total dan trigliserida darah
mencit dan dua kelompok lainnya diberi
makanan kuning telur dan VCO dengan variasi
kosentrasi 2 % (0,4 mL/20 g BB) dan 4% (0,8
mL/20 g BB). Setiap kelompok terdiri dari 4
ekor mencit untuk pengukuran kadar kolesterol
total, trigliserida dan HDL pada hari ke-10, 20,
dan 30.
ISSN : 1978-628X
J. Ris. Kim.
Vol. 1 No. 1, September 2007
Pengukuran Kadar Kolesterol Total,
Trigliserida, HDL dan LDL
Pengukuran kadar kolesterol total dan
trigliserida dilakukan pada serum darah,
dimana darah diambil dengan cara memotong
pembuluh darah di leher, darah ditampung
dengan tabung reaksi, lalu didiamkan selama
15 menit. Setelah itu darah disentrifus selama
10 menit dengan kecepatan 3000 rpm
kemudian
serumnya
dipisahkan
dari
hemoglobin dan trombosit.
Untuk pengukuran kadar kolesterol total dan
trigliseridanya masing-masing serum dipipet
sebanyak 10 L, dimasukkan ke dalam tabung
reaksi, ditambahkan larutan pereaksi kolesterol
dan trigliserida sebanyak 1000 L lalu larutan
dicampur dengan baik dengan menggunakan
vortex. Kemudian dibiarkan selama 20 menit
pada suhu kamar dan diukur serapan pada
panjang gelombang maksimum 500 nm
terhadap blanko.
Pengukuran serapan standar dilakukan dengan
cara yang sama dengan pengukuran serapan
kolesterol total dan trigliserida[8,9].
Untuk penentuan kadar kolesterol HDL, serum
dipipet sebanyak 0,02 mL, dimasukkan ke
dalam tabung sentrifus, lalu ditambahkan
larutan pengendap 0,5 mL. Larutan dicampur
dengan menggunakan alat vortex, kemudian
dibiarkan selama 10 menit pada suhu kamar
lalu disentrifus selama 10 menit pada
kecepatan 4500 rpm. Supernatan diambil
sebanyak 0,1 mL dimasukkan ke dalam tabung
reaksi, ditambahkan larutan pereaksi kolesterol
sebanyak 1 mL, larutan dicampurkan dengan
menggunakan vortex, lalu dibiarkan selama 10
menit pada suhu kamar dan diukur serapannya
pada panjang gelombang maksimum 500 nm.
Kadar LDL ditentukan dengan menggunakan
rumus :
HASIL DAN DISKUSI
Mutu VCO Bio Virco PhytoMega
VCO yang digunakan dalam penelitian ini
telah melalui uji standar mutu minyak kelapa
(SNI-1992). Hasil uji mutu VCO Bio Virco
Phytomega dapat dilihat pada Tabel 1.
Penentuan kadar Trigliserida (TG)
Kadar Trigliserida dan LDL (Tabel 2) yang
diperoleh menunjukkan bahwa pada dosis 2 %
memberikan hasil yang baik, dimana terjadi
penurunan kadar trigliserida dan LDL. Untuk
dosis 2 % dan 4 %, pola yang sama terjadi
penurunan
kadar
trigliserida
secara
signifikan[13,14,15]. Dari hasil penelitian ini
ternyata VCO tidak bersifat toksik untuk
hewan percobaan[13,15].
Analisa Profil Asam Lemak Jenuh (C6C16) dan Omega -3
Hal yang sangat menarik dari profil asam
lemak jenuh (C6-C16) pada Tabel 3, adalah
Hampir tidak ditemukannya asam lemak jenuh
(C6-C16) pada serum darah tikus yang diberi
VCO selama 1 bulan, sedangkan kandungan
Omega-3 meningkat 10 kali lipat pada serum
darah tikus yang diberi VCO dengan dosis 2%
dan 4% selama 1 bulan.
Tabel 1. Mutu Minyak Kelapa (SNI-1992) dan Perbandingan dengan VCO yang dihasilkan
Komponen Uji
Kadar air
Kotoran
Bilangan iod (g Iod/100 g sample)
Bilangan penyabunan (mg KOH/g sample)
Bilangan peroksida (mg O2/g sample)
Asam lemak bebas
Warna dan aroma
ISSN : 1978-628X
Bilangan
Maks.0.5%
Maks.0.5%
8-10.0
255 - 265
Maks. 5.0%
Maks.2.5%
Normal
VCO
< 0.12
<0.012
4.99
258.150
1.08
0.11
Bening, Khas Kelapa
61
Vol. 1 No. 1, September 2007
J. Ris. Kim.
Pada penelitian ini, kolesterol total tidak bisa
dijadikan parameter karena total kolesterol
terdiri dari kolesterol jahat (LDL) dan
kolesterol baik (HDL). Oleh karena itu rasio
kolesterol (CR) yang didapat dari jumlah total
kolesterol dibagi HDL, lebih bisa dijadikan
parameter. Semakin kecil angka CR pada
suatu bahan, maka semakin baik karena akan
mengurangi resiko terkena jantung koroner dan
arterosklerosis[5,7,9].
Pada penelitian ini didapat peningkatan kadar
kolesterol total seiring dengan waktu
pemberian VCO. Hal ini disebabkan karena
terjadinya peningkatan kadar HDL di dalam
serum darah mencit putih jantan (Tabel 4).
Persentase kenaikan kadar HDL untuk dosis
2% terjadi pada hari ke-20 dari 32,029%
menjadi 69,011% pada hari ke-30 dan untuk
dosis 4% persentase kenaikan pada hari ke-20
dari 2,990% menjadi 74,089% pada hari ke-30.
Hasil penelitian ini menunjukkan kenaikan
HDL yang sangat signifikan juga telah
dilaporkan pada pasien kolesterol tinggi[6,7,8,9].
Rasio kolesterol yang didapat (Tabel 5)
menunjukkan penurunan seiring dengan waktu
pemberian VCO, yaitu untuk dosis 2% pada
hari ke-10 adalah 4,098 turun menjadi 1,154
pada hari ke-30 pemberian VCO, sedangkan
untuk dosis 4% pada hari ke-20 turun dari
1,893 menjadi 1,613 pada hari ke-30
pemberian VCO, sehingga pemberian VCO
secara teori ini akan mengurangi resiko terkena
penyakit–penyakit akibat kolesterol jahat
mungkin dapat terbukti.
Tabel 2. Kadar Trigliserida (TG) pada
perlakuan A dan waktu B
Perlakuan
(A)
Kontrol (-)
Kontrol (+)
VCO 2 %
VCO 4 %
Tabel 4. Persentase kenaikan HDL
Perlakuan
Penentuan Kadar Kolesterol HDL dan
Ratio Kolesterol
Waktu (B)
Kadar TG hari ke (mg/dL)
10
20
30
59,07
59,07
59,07
136,94 135,46
177,49
90,81
80,27
75,78
85,469 70,210
65,9762
7
Waktu (Hari ke )
10
20
30
VCO 2 %
5.252 %
32.029 %
69.011 %
VCO 4 %
2.245 %
42.990 %
74.086 %
Tabel 3. Profil Asam Lemak Jenuh (C6-C16) Dan Omega 3 pada Serum Darah Tikus
No
1
2
3
4
5
6
7
Jumlah Rantai Karbon
C6
C8
C10
C12
C14
C16
Omega-3
% Kontrol
1,5
0,96
0.001
VCO 2%
0,10
0.01
VCO 4%
0,01
0.02
Tabel 5. Rasio Kolesterol
Perlakuan
62
Hari
Rata - rata
10
20
30
Kontrol (-)
1.326
1.326
1.326
1.326
Kontrol (+)
7.252
6.069
4.427
5.582
VCO 2 %
4.098
1.416
1.154
2.222
VCO 4 %
1.000
1.893
1.613
1.502
ISSN : 1978-628X
J. Ris. Kim.
KESIMPULAN
Dari penelitian yang telah dilakukan, dapat
disimpulkan bahwa dengan pemberian VCO,
persentase kenaikan kadar HDL untuk dosis 2%
terjadi pada hari ke-20 dari 32,029% menjadi
69,011% pada hari ke-30 dan untuk dosis 4%
persentase kenaikan pada hari ke-20 dari
2,990% menjadi 74,089 % pada hari ke-30 serta
Ratio (CR) turun dari 4 menjadi 1. SCFA dan
MCFA (C6-C16) tidak ditemukan, kandungan
Omega-3 meningkat secara signifikan pada
serum darah tikus yang diberi VCO selama 1
bulan.
UCAPAN TERIMA KASIH
Terima kasih kepada pimpinan proyek Research
Grand TPSDP Unand 2005-2006 atas
pendanaan penelitian ini. Apresiasi yang tinggi
juga ditujukan kepada: Ketua Jurusan Kimia
FMIPA Unand, Kepala Laboratorium Analisa
Kimia Pasca Panen Bogor, Bapak Lalu Sukarno
dan tim atas kerja samanya mendukung
penelitian ini dan untuk analisa Omega serta
asam lemak.
DAFTAR KEPUSTAKAAN
1. Sumaryati Syukur, 2004, Bioteknologi
Virgin Coconut Oil dan Potensi Kandungan
Zat Anti Mikroba dan Virus, Workshop
Bioteknologi/ Biomolekuler., Padang.
2. Sumaryati Syukur, Endang Purwati dan
Iman
Rahayu,
2005,
Effectiveness
Pathogen Bacteria of Virgin Coconut Oil,
Proceeding
Asian
Congress
of
Microbiology, September, Bali, 1-7.
3. Sumaryati Syukur, Rina Dahlyanti, Titi
Sumanti, Helmi Arifin , Endang Purwati,
Risfa
Heri,
2005,
Biokimia
dan
Metabolisme Lipid MCT pada Virgin
Coconut Oil VCO pada Tikus Percobaan,
Proceeding Seminar Nasional VII dan
Kongres X Perhimpunan Biokimia dan
Biologi Molekuler Indonesia, Desember 3,
1-10, UNRI Pekanbaru Riau.
ISSN : 1978-628X
Vol. 1 No. 1, September 2007
4. Sumaryati Syukur, Rina Dahlyanti, Titi
Sumanti, Helmi Arifin , Endang Purwati,
Risfa Heri, 2006, Profil Kimia dan
Biokimia Virgin Coconut Oil (VCO),
Proseding Seminar dan Simposium Kimia
LIPI, Jan 24, 1-8.
5. Sumaryati Syukur, Rina Dahlyanti, Titi
Sumanti, Helmi Arifin dan Endang Purwati,
2005, Bioteknologi Virgin Coconut Oil,
Peningkatan
Kesehatan
Total
dan
Pengentasan
Kemiskinan
Masyarakat
Pedesaan, Seminar Terpadu Lembaga
Pengabdian Masyarakat Univ. Andalas,
Padang 14 , 1-15.
6. Enig, M. G., Atal,S., Sampugna J., dan
Keency M., 1990, Trans Fatty Acids in the
US Diet, J. Nutr., 9: 471- 486.
7. Kurup, P. A., Rajmohan T.H., 1994,
Consumption of Coconut Oil and The
Incidence of Atherosclerosis in Human
Nutrition, Proceeding symposium on
coconut oil, Kochi, India.
8. Deacon, A.C., and Dawson, P.J.G., 1979,
Enzimatic Assay of Total Cholesterol
Involving
Chemical
or
Enzymatic
hydrolysis -A Comparison Method-,
Clinical Chemistry., 25 (16), 976-983.
9. Deeg, R., and Ziegenhorn, J., 1983, Kinetic
Enzymatic
Method
for
automated
Determinated of Total Cholesterol in
Serum, Clin. Chem., 29: 802.
10. Khosla, P., and Hayes, K.C., 1996, Dietary
trans-mono-unsaturated
fatty
acids
negatively impact on plasma lipids in
humans, J. Am. Nutr., 15: 325-339.
11. Murray, R. K., 1989, Lemak, Metabolisme,
dan
Penyakit
Jantung
Koroner,
Laboratorium
Biokimia
Fakultas
Kedokteran Universitas Andalas., Padang.
12. Mensink, R. P., and Katan, M. B., 1990,
Dietary Trans Fatty Acids, The New
England Journal of Medicine., 323: 439445.
13. Bambang Setiadji., 2004, Virgin Coconut
Oil dan Serangan Jantung, Trubus., 417:
127-127.
14. Bach, A.C., and Babayan,V.K., 1982,
Medium Chain Triglycerides, Am. J. Clin.
Nutr.,36:950-962.
63